单纯疱疹病毒Ⅱ型CTL表位DNA疫苗的Th1/Th2免疫应答研究

目的探讨单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）CTL表位疫苗对小鼠Th1/Th2型免疫应答的影响。方法用构建的HSV-2pVAX-gD-CTL重组质粒免疫BALB/c小鼠3次,末次免疫后第4周检测小鼠血清中gDIgG水平;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况;ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清中INF-γ,IL-4水平;流式细胞仪测定小鼠CD4^＋,CD8^＋T淋巴细胞亚群。结果HSV-2pVAX-gD-CTL疫苗免疫小鼠后可以诱导脾淋巴细胞增殖及分泌INF-γ和IL-4,诱导CD4^＋,CD8^＋T细胞百分比的升高;并能刺激血清HSV-2gD特异性抗体的产生。其中pVAX-gD-CTL组在脾淋巴细胞刺激指数及其分泌INF-γ水平、CD4^＋,CD8^＋T细胞百分比升高方面均显著高于pVAX-gD对照组。结论CTL表位对单纯疱疹Ⅱ型重组DNA疫苗诱导的Th1型免疫应答有促进作用。     

面部原发性皮肤T细胞淋巴瘤1例

报告1例以双眼睑、双颊、上唇肿胀为主要表现的T细胞淋巴瘤。患者男,20岁,双眼睑、双颊无痛性肿胀7月,于院外接受糖皮质激素治疗,无明显好转,近4月出现上唇无痛性肿胀。组织病理检查示:真皮内可见大量大小不一、核深染的淋巴细胞,部分可见异型;免疫组化提示LCA(+),CD3(+),CD99(+),病变符合T细胞淋巴瘤,T细胞型。予CHOP方案第1次化疗后,皮损明显消退。目前正在随访治疗中。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体真核表达载体的构建及表达

背景：单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1真核表达载体的构建可以为研究单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1在病毒潜伏复发中的功能奠定基础。目的：构建含存单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1的真核表达载体,并通过转染非洲绿猴肾细胞（Vero）,验证载体的体外表达情况。方法：根据单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1基因序列设计一对引物,以单纯疱疹病毒Ⅱ型333标准株基因组为模板PCR法扩增出开放读码框1基因,克隆至真核表达载体上,并进行酶切鉴定以及测序;利用X-fect转染试剂盒将重组质粒pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1转染vero细胞,RT-PCR检测其mRNA水平的表达,并用荧光倒置显微镜观察融合蛋白的表达。结果与结论：开放读码框1基因的体外扩增目的片段为741bp,所构建的真核表达载体pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1经双酶切鉴定,与预期大小一致,测序结果与NCBI收录的开放读码框1基因序列一致;重组质粒pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1转染vero细胞后,RT-PCR验证有目的基因的转录,荧光显微镜观察到融合蛋白在转染的Vero细胞中表达。表明成功构建pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1真核表达载体,并且实现其在非洲绿猴肾细胞（Vero）中的表达。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型新型DNA疫苗的构建

目的：针对Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）包膜糖蛋白gD以及包膜糖蛋白gB的CTL表位,构建重组真核表达质粒pVAX—gD—CTL。方法：根据GeneBank提供的HSV-2G株糖蛋白D基因（gD）序列设计PCR引物,以已构建好的pc—gD为模板,特异性扩增HSV-2gm片段,将其克隆于pVAX1载体中构建成质粒pVAX—gD,再将其双酶切后引入CTL片段构建重组真核表达质粒pVAX—gD—CTL。结果：将重组的pVAX—gD—CTL真核表达质粒转化大肠杆菌后,筛选阳性克隆进行酶切及测序鉴定。结论：初步构建HSV-2 pVAX—gD—CTL重组真核表达质粒。     

脊髓痨1例

临床资料 患者男,55岁.因双下肢进行性无力10个月,加重伴四肢麻木5个月入院.患者2007年7月无明显诱因出现双下肢乏力,行走有脚踩棉花感.2007年底双下肢乏力加重,伴肌肉萎缩,并出现腰部束带感、阳痿、视物模糊、腰背部闪电样疼痛.在当地医院行头颅CT、MRI检查未见异常,予营养神经等对症治疗无改善.入院查体:生命体征稳定,全身未见皮疹,右眼外展不能,余颅神经检     

皮肤动静脉性血管瘤1例

患者男,61岁.囚右侧面部出现暗红色增生物5年就诊.患者5年前无明显原因右侧面部出现暗红色丘疹,无明显不适,后缓慢增大,形成蚕豆大结节,随着皮损增大,颜色逐渐变成红色,且有轻度触痛.为进一步明确诊断,于2008年3月5日来我院就诊.     

卡介菌多糖核酸联合西替利嗪、氯苯醇溶液治疗丘疹性荨麻疹疗效观察

笔者近5a采用卡介菌多糖核酸联合西替利嗪、氯苯醇溶液治疗丘疹性荨麻疹96例,取得良好的效果,现报告如下。     

系统性红斑狼疮患儿Epstein-Barr病毒基因异常表达的研究北大核心CSCD

目的 探讨Epstein-Barr病毒（EBV）基因在儿童系统性红斑狼疮（SLE）中的表达和意义.方法 分离20例SLE患儿和12例健康对照外周血单-核细胞（PBMC）,用酶联免疫吸附测定（ELISA）鉴定出血清中编码EBV衣壳抗原-IgG/IgM抗体阳性的SLE患儿,取其分泌EBV的细胞上清液与提取的PBMC共同培养12d,提取培养前后的PBMC的RNA,用反转录实时定量PCR（RT-PCR）的方法检测EBV基因的表达.结果 10例患儿和1例健康对照检测到LMP1表达,两者差异有统计学意义（P＜0.05）.4例患儿和1例健康对照检测到LMP2表达,13例患儿和3例健康对照检测到EBNA1表达,3例患儿和1例健康对照检测到BCRF1表达,5例患儿和2例健康对照检测到BLLF1表达,但患儿和健康对照比较,差异均无统计学意义.用分泌EB病毒的细胞上清液培养PBMC后,发现患儿组和健康对照组潜伏期基因和裂解期基因表达均有不同程度的增加,潜伏期基因LMP1、LMP2、EBNA-1和裂解期基因BCRF1、BLLF1的表达与健康对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 儿童SLE患者存在EBV基因的异常表达,EBV基因可能参与了SLE的发病.     

自噬在黑素合成中的作用

黑素在黑素小体内合成,可保护皮肤和眼睛抵御紫外线辐射,防止内部组织过热,是机体的一种自我保护机制。黑素合成受到精确地调控,体内的多种细胞因子、无机离子等的改变均可明显影响黑素的生物合成。近期有研究表明,自噬亦可作用于参与黑素合成过程中的黑素小体、黑素细胞,影响黑素合成并参与某些色素性疾病的发生、发展。本文就自噬在黑素合成中作用的研究进展作一概述,为相关研究提供线索。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体真核表达载体的构建及表达

背景：单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1真核表达载体的构建可以为研究单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1在病毒潜伏复发中的功能奠定基础。 目的：构建含存单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1的真核表达载体,并通过转染非洲绿猴肾细胞(Vero),验证载体的体外表达情况。 方法：根据单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放读码框1基因序列设计一对引物,以单纯疱疹病毒Ⅱ型 333标准株基因组为模板PCR法扩增出开放读码框1基因,克隆至真核表达载体上,并进行酶切鉴定以及测序;利用X-fect转染试剂盒将重组质粒pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1转染vero细胞,RT-PCR检测其mRNA水平的表达,并用荧光倒置显微镜观察融合蛋白的表达。 结果与结论：开放读码框1基因的体外扩增目的片段为741 bp,所构建的真核表达载体pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1经双酶切鉴定,与预期大小一致,测序结果与NCBI收录的开放读码框1基因序列一致;重组质粒pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1转染vero细胞后,RT-PCR 验证有目的基因的转录,荧光显微镜观察到融合蛋白在转染的Vero细胞中表达。表明成功构建pEGFP-C2/潜伏相关转录体开放读码框1真核表达载体,并且实现其在非洲绿猴肾细胞(Vero)中的表达。