羟基红花黄色素 A 对糖氧剥夺/复糖复氧后星形胶质细胞保护作用及其机制研究

目的:探讨糖氧剥夺/复糖复氧(OGD/R)状态下羟基红花黄色素A(HSYA)对星形胶质细胞(Ast)的保护作用及其机制。方法:分离小鼠原代Ast,实验设置为正常对照组、模型组和HSYA处理组。MTT、LDH检测Ast活力;免疫荧光检测GFAP蛋白表达;RT-PCR和Western blot检测C3、S100A10、PTX3极化指标;RT-PCR和ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10炎症因子表达;氧化检测试剂盒检测CAT、SOD、GSH-Px、RNS、ROS、MDA含量;Western blot检测GFAP、p-NF-κB(p65)、p-STAT3、Nrf2、HO-1蛋白表达。结果:Ast经OGD/R处理后被激活且形态发生改变;同时A1型Ast增加,TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子及RNS、ROS、MDA表达升高;A2型Ast降低,CAT、SOD、GSH-Px降低。HSYA可减轻OGD/R状态下Ast的形态异常,减少A1型Ast,同时减少炎症因子分泌以及RNS、ROS和MDA含量,降低p-NF-κB(p65)和p-STAT3表达;增加IL-10分泌和CA...     

胡黄连苷Ⅱ通过激活自噬作用抑制泡沫细胞的形成与炎症反应

目的:从巨噬细胞泡沫化角度探讨胡黄连苷Ⅱ抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:CCK-8法确定胡黄连苷Ⅱ对细胞无毒性的浓度;氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导与药物干预后,采用油红O染色观察泡沫细胞的形成,酶法检测细胞内胆固醇水平;激光共聚焦显微镜观察胡黄连苷Ⅱ对巨噬细胞自噬的影响。采用Western blot检测巨噬细胞ABCA1、ABCG1、NLRP3、ASC的蛋白表达水平。结果:胡黄连苷Ⅱ对ox-LDL诱导的THP-1源巨噬细胞在0～100μmol/L的范围内无细胞毒性。各浓度胡黄连苷Ⅱ的干预均可抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成。胡黄连苷Ⅱ浓度依赖性降低细胞内总胆固醇、胆固醇酯和胆固醇酯化率,显著增加ABCA1/ABCG1、LC3Ⅱ/Ⅰ和beclin1的表达;减少TNF-α、IL-1β和IL-6等炎症因子的表达,显著降低NLRP3、ASC和caspase-1的表达。结论:胡黄连苷Ⅱ显著抑制巨噬细胞泡沫化,相关的作用机制可能是通过促进巨噬细胞自噬,上调巨噬细胞ABCA1/ABCG1表达,抑制NLRP3炎症小体的激活,从而促进巨噬细胞内胆固醇外排,抑制炎症反应。     

国家级首批线上一流课程免疫学基础与病原生物学的建设与推广

线上一流课程作为一种新型的教学课堂模式,其建设与推广不仅使教师的教和学生的学呈现多元化,而且也使教师的教学和研究水平、学生的学习兴趣和能力得到了有效提升。本团队建设与推广的国家级首批线上一流课程免疫学基础与病原生物学已经完成6个学期的运行,累计学习人数40 395人,累计选课学校84所。本文从建设背景与建设目标、整体框架与建设资源、实施过程与推广应用、教学运行与互动、教学考核与评价、思考和展望等6个方面总结该课程的建设与推广情况。     

间歇性禁食与肿瘤细胞免疫的研究进展

间歇性禁食(IF)可引起机体能量代谢过程变化,改善健康状态并影响多种疾病的进程。新近研究显示,间歇性禁食能改变肿瘤细胞能量代谢,抑制其生长并影响机体肿瘤细胞免疫应答。此外,抗PD-1单抗为代表的免疫检查点抑制剂(ICB)疗法会改善肿瘤微环境中T细胞的葡萄糖利用率,提示IF与ICB联合使用在临床肿瘤免疫治疗中具有潜在的应用前景。本文综述了IF与肿瘤细胞免疫的相关研究进展并讨论了仍待阐明的科学问题,以期为IF在临床肿瘤免疫治疗中的应用提供帮助。     

嵌合抗原受体T细胞靶向PD-L1的初步研究

目的:采用嵌合抗原受体(CAR)T细胞技术将肿瘤免疫检查点抑制剂序列(MEDI4736)整合至CART细胞,构建一种新的抗PD-L1的CART(αPDL1-CART)细胞,并探索αPDL1-CART细胞的作用机制。方法:共培养结合实验检测αPDL1-CAR的结合性,流式细胞术分析αPDL1-CART细胞表达,细胞毒性实验检测αPDL1-CART细胞杀伤性。结果:αPDL1-K562细胞可特异性结合PDL1-K562细胞,阳性表达率为(48.9±13.9)%;与T vs K562组、T vs PDL1-K562组和αPDL1-CART vs K562组相比,αPDL1-CART vs PDL1-K562组αPDL1-CART细胞可显著减少PDL1-K562细胞数[(2 136.9±766.1)个,P<0.05]。结论:αPDL1-CART细胞可特异性结合和杀伤PDL1-K562细胞,将进一步促进CART细胞与免疫检测点结合研究。     

温胆汤方剂对睡眠剥夺小鼠氧化应激及炎症反应的影响

目的:研究温胆汤对睡眠剥夺小鼠的改善作用以及对小鼠氧化应激和炎症水平的影响。方法:将30只SPF级昆明雌性小鼠随机分为5组:对照组、模型组、温胆汤低浓度组(含生药0.5 g/ml)、温胆汤高浓度组(含生药2 g/ml)和艾司唑仑片组(0.15 mg/kg),每组6只。采用改良版水平转盘睡眠剥夺法构建失眠小鼠模型,记录小鼠行为学改变(精神状态、饮食)、毛发和体质量。药物持续灌胃7 d,1次/d。处死小鼠,收集血清,分离脑组织。流式检测小鼠脑组织活性氧(ROS)水平;生化检测小鼠血清和脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)酶活及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)浓度;ELISA检测小鼠血清和脑组织TNF-α、IL-6和IL-1β浓度;Western blot检测小鼠脑组织NF-κB及p-NF-κB蛋白表达水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠精神状态及毛发较差,饮食量减少,体质量显著降低(P<0.05),脑组织中ROS水平及p-NF-κB表达显著增加(P<0.05),血清与脑组织的MPO、MDA、TNF-α、IL-6和I...     

归芪白术方联合奥沙利铂对胃癌荷瘤小鼠机体免疫炎症分子的影响及抑癌作用

目的:探讨归芪白术方联合奥沙利铂在IL-6/JAK2/STAT3通路中对MFC胃癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及对炎症分子影响。方法:建立MFC胃癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、奥沙利铂组、奥沙利铂加归芪白术方高、中、低剂量组,10只/组,另选10只健康小鼠作为空白组;各组小鼠经口灌胃给予相应药物,空白组、模型组给予生理盐水,连续治疗14 d。处死小鼠取脾脏、胸腺、肿瘤称重,计算脏器指数及抑瘤率;HE染色观察小鼠瘤体病理形态学变化;ELISA法检测小鼠血清中IL-6含量;RT-qPCR和Western blot分别检测瘤组织中IL-6、JAK2、STAT3 mRNA及IL-6、p-JAK2、p-STAT3蛋白含量;免疫组化法检测肿瘤组织中c-Myc、Cyclin D1蛋白。结果:各治疗组小鼠瘤体重量显著低于模型组(P<0.01),联合用药高、中剂量组瘤体重量明显低于奥沙利铂组(P<0.05,P<0.01);与空白组相比,模型组小鼠的脾指数、胸腺指数降低(P<0.01),与模型组相比,奥沙利铂组小鼠的脾指数、胸腺指数降低(P<0.01),与奥沙利铂组相比,联合用药高剂...     

儿童及青少年间变性大细胞淋巴瘤预后因素的Meta分析

目的:应用Meta分析方法,对儿童及青少年间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)一些有争议的临床预后因素进行定量分析,以客观评价这些因素对患者生存率的影响。方法:计算机检索中英文数据库,搜索从建库起至2020年12月31日间,儿童及青少年ALCL回顾性队列分析的文献。筛选文献并提取其中的生存数据,应用Review Manager5.3软件进行Meta分析,结果应用合并风险比(HR)及95%可信区间(95%CI)进行评价,以明确各因素对五年总生存率的影响。结果:共纳入13篇文献,研究对象共1 792例。对纳入研究进行基于Kaplan-Metier法绘制的生存曲线的单因素分析的合并Meta分析,结果显示,具有以下因素患者的五年总生存率差异具有统计学意义:临床有B组症状[HR=1.43,95%CI(1.08,1.90),P=0.010]、免疫表型表达CD3[HR=2.03,95%CI(1.43,2.88),P<0.001]、肿瘤侵犯骨髓[HR=2.23,95%CI(1.43,3.48),P<0.001]、肿瘤侵犯皮肤[HR=1.38,95%CI(1.13,1.69),P=0.002]。对...     

四妙勇安汤含药血清对 ox-LDL 诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响

目的:探究四妙勇安汤含药血清对ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化与自噬的影响,并探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法:灌胃给予SD大鼠不同剂量四妙勇安水煎液制备含药血清。油红O染色观察泡沫化巨噬细胞脂滴变化;CCK-8法观察含药血清对泡沫巨噬细胞活化的影响;ELISA检测炎症性细胞因子IL-6、IL-10和IFN-γ表达;透射电镜观察细胞自噬水平;免疫荧光标记法检测LC3Ⅱ表达;RT-PCR及Western blot检测细胞AMPK/mTOR/p70S6K通路相关因子表达变化。结果:油红O染色显示,ox-LDL干预后胞质内可见大量橘红色脂滴;CCK-8显示浓度30%以下的含药血清干预泡沫化巨噬细胞OD值无明显变化(P>0.05)。与模型组相比,含药血清刺激后,IL-6、IFN-γ表达降低,IL-10表达升高(P<0.05),含药血清组及雷帕霉素组细胞自噬小体形成增加,LC3Ⅱ、AMPK表达提高,mTOR、p70S6K表达降低(P<0.05)。结论:四妙勇安汤含药血清可调节ox-LDL诱导的泡沫化巨噬细胞活化以及AMPK/mTOR/p70S6K信号通路,抑制炎...     

基于基因芯片技术结合CIBERSORT反卷积算法研究骨关节炎的免疫机制及潜在中药靶向预测

目的:探究骨关节炎(OA)的免疫机制,挖掘其潜在干预中药。方法:通过GEO数据库获取OA滑膜组织相关基因探针,以正常人群滑膜组织为对照组,采用R软件识别差异表达基因并进行功能相关分析,采用STRING数据库对差异基因进行蛋白网络互作(PPI)分析,并筛选核心靶基因,通过CIBERSORT反卷法计算免疫细胞浸润情况及相关性,采用COREMINE数据库对显著富集的免疫相关生物学过程及核心靶基因进行中药预测。结果:共筛选出716个差异基因,其中上调基因382个,下调基因334个;差异基因PPI涉及IL-6、CXCL8、JUN、VEGFA、IL-1β、MMP9、ITGB2、FOS、APOB、CXCL12 10个核心靶基因;GO结果显示,上调基因与免疫炎症反应关系最为密切;免疫细胞浸润矩阵分析显示,浆细胞、M0型巨噬细胞和未活化的肥大细胞在OA滑膜组织中含量较高,而未活化的CD4记忆T细胞、活化的NK细胞、活化的肥大细胞在OA滑膜组织中含量降低;免疫细胞间相关性分析显示,OA未活化CD4记忆T细胞与活化的肥大细胞呈正相关,而未活化的肥大细胞与活化的肥大细胞呈负相关。COREMINE预测发现,青风...