促进乳腺癌增殖转移和肿瘤干细胞特征的研究

目的 研究Gankyrin在乳腺肿瘤中的表达及其促进肿瘤进展的分子机制。方法 利用数据库研究Gankyrin在乳腺癌中的表达情况,并分析其表达与患者生存的关系。在BT549和MDA-MB-231乳腺癌细胞系过表达和敲减Gankyrin基因后,利用CCK-8、Transwell和流式细胞实验分析细胞增殖、转移和肿瘤干细胞的比例。结果 通过数据库分析显示Gankyrin在乳腺癌组织表达较高(P＜0.01),其高表达与患者的不良预后有关(P＜0.01)。与正常乳腺组织相比,乳腺癌组织中Gankyrin启动子甲基化水平较低(P＜0.01)。通过在乳腺癌细胞中过表达和敲减Gankyrin基因后,表明Gankyrin具有促进乳腺肿瘤细胞增殖和转移的能力,可以维持乳腺癌细胞的肿瘤干细胞特征(P＜0.01)。结论 Gankyrin在乳腺癌高表达与患者的不良预后相关,其可能作为乳腺癌肿瘤标记物。     

自噬介导的雷公藤甲素提高西妥昔单抗对SW480细胞治疗效果的实验研究

目的观察雷公藤甲素联合表皮生长因子受体单克隆抗体西妥昔单抗对人结直肠癌细胞SW480细胞株生物学行为的影响。方法雷公藤甲素、西妥昔单抗单独或联合作用于SW480细胞株, MTT法、细胞克隆实验检测细胞增殖抑制率;细胞划痕实验检测细胞的迁移能力;Western blot检测雷公藤甲素诱导细胞自噬性凋亡标记物p62、LC3-Ⅱ;雷公藤甲素及西妥昔单抗单独和联合作用细胞后,Western blot分析上皮间质转化(EMT)标记物E-cadherin、Vimentin以及mTOR、Snail、Twist蛋白水平。结果雷公藤甲素及西妥昔单抗对SW480细胞的增殖抑制作用均呈剂量依赖性,两药联用可明显抑制SW480细胞增殖;雷公藤甲素诱导SW480细胞p62蛋白下调,LC3-Ⅱ上调,发生自噬性凋亡;雷公藤甲素单药组、联合用药组均能明显抑制SW480细胞发生EMT,其标记分子E-cadherin蛋白上调,Vimentin蛋白下调,关键分子Snail、Twist表达下调。结论雷公藤甲素联合西妥昔单抗抑制SW480细胞增殖和转移具有明显协同作用,雷公藤甲素通过抑制mTOR通路,可以诱导细胞自噬性凋亡,自噬介导的雷公藤甲素抑制肿瘤细胞EMT可能是逆转西妥昔单抗耐药的机制。     

CPEB4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及其对细胞株增殖、凋亡和侵袭力的影响

目的研究CPEB4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及其对细胞株增殖、凋亡和侵袭力的影响。方法选取我院于2016年3月～2018年3月进行透明细胞性肾细胞癌患者80例作为研究组,并选择我院同期收治的肿瘤周围正常肾组织50例为对照组,观察两组患者CPEB4表达相关情况。结果研究组CPEB4表达高于对照组,且对照组细胞存活率高于研究组,迁移距离低于对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。对照组CPEB4阳性率为10.00%,Ⅳ组患者阳性率最高为100.00%,随着级别升高患者阳性率随之升高,淋巴结转移者CPEB4表达高于未转移,Ⅲ～Ⅳ期CPEB4表达高于Ⅰ～Ⅱ期。研究组男女性别之间CPEB4表达差异无统计学意义(P 0.05)。结论 CPEB4在透明细胞性肾细胞癌中表达较高,对细胞株增殖侵袭较强,有利于后期诊断治疗,明确患者治疗意义,在临床中具有重要意义,值得应用。     

骨髓增殖性肿瘤JAK2V617F突变与中医证候的相关性分析及清肝化瘀解毒方的临床干预作用

目的观察骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者JAK2V617F基因突变与中医证候的相关性,以及清肝化瘀解毒方联合西药干预的疗效。方法将75例中医辨证为肝热血瘀证的MPN患者按照JAK2V617F基因突变结果分为阳性组(44例)和阴性组(31例),2组均给予清肝化瘀解毒方加减联合羟基脲、干扰素治疗,以1个月为1个疗程,3个疗程后进行疗效判断。观察治疗前后2组患者的西医有效率、中医主要症候积分和有效率、血常规、脾肿大情况及并发症发生率。结果 75例患者的JAK2V617F基因突变率为59%(44/75),其中真性红细胞增多症(PV)为71%(20/28),原发性血小板增多症(ET)为56%(14/25),骨髓纤维化(MF)为45%(10/22)。阳性组在临床及中医证候疗效上优于阴性组。阳性组血常规异常和脾肿大(P<0.05),但清肝化瘀解毒方联合西药治疗可明显改善MPN患者外周血象和脾肿大情况,阳性组尤为明显(P<0.05)。阳性组具有更明显的血瘀证表现,特别是在刺痛、瘀血、瘀斑方面、肌肤甲错和麻木方面(P<0.05)。治疗后,2组患者在主要症状方面均有明显的改善,各项证候计分均有所下降,2组治疗前后差异均有统计学意义(P<0.05)。阳性组并发症发生情况高于阴性组,但差异无统计学意义。结论 JAK2V617F基因突变阳性的MPN患者具有更高的外周血象、脾肿大发生率和更典型的血瘀证表现;但JKA2V617F基因突变阳性的MPN患者对清肝化瘀解毒方联合西药治疗具有敏感性。     

气道平滑肌细胞增殖的分子机制研究进展

哮喘患者气道可出现上皮损伤、胶原沉积、基膜增厚及气道平滑肌增生等气道重构表现,气道重构是哮喘重要的病理特征,其严重程度与哮喘的严重程度密切相关,其中气道平滑肌细胞(ASMCs)是气道的关键结构和效应细胞,在哮喘中起重要作用。ASMCs通过收缩或舒张气道调节气流,并在生长因子、细胞因子、炎症介质以及酶等多种因素的作用下过度增殖,参与气道重构,从而加重哮喘。造成ASMCs增殖的相关分子机制有多种,主要包括钙离子通道途径、促分裂原活化蛋白激酶途径及氧化应激途径等。     

宫颈癌新辅助化疗前后三维能量多普勒超声特征的变化及其与恶性分子表达的关系

目的:研究宫颈癌新辅助化疗前后三维能量多普勒超声特征的变化及其与恶性分子表达的关系。方法:选择武汉市红十字会医院诊断为宫颈癌并接受新辅助化疗的患者作为宫颈癌组,另取同期在本院接受宫颈活组织检查并经病理结果证实为宫颈上皮内瘤变I期的患者作为对照组;活检前进行三维能量多普勒超声检查并测定VI、FI、VFI;取宫颈癌组患者化疗前后的组织及对照组患者的活检组织并测定增殖、侵袭、血管新生基因的表达量。结果:宫颈癌组化疗前及化疗后VI、FI、VFI的水平以及组织中Piwil2基因(Piwil2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、N-Myc下游调节基因3(NDRG3)、CXC基元配体5(CXCL5)、组织蛋白酶-L(CAT-L)、包含EGF腓骨蛋白样胞外基质蛋白1(EFEMP1)、血管紧张素(Ang)1、Ang2、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)的mRNA表达量均显著高于对照组,组织中血小板反应蛋白2(THBS2)、Smac基因(Smac)、大肿瘤抑制因子1(LATS1)、半胱氨酸丰富蛋白Kazal基元(RECK)、纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)的mRNA表达量均显著低于对照组,且宫颈癌组化疗后VI、FI、VFI的水平以及组织中Piwil2、CyclinD1、NDRG3、CXCL5、CAT-L、EFEMP1、Ang1、Ang2、ANGPTL4的mRNA表达量均显著低于化疗前,组织中THBS2、Smac、LATS1、RECK、PAI-1的mRNA表达量均显著高于化疗前;宫颈癌组织VI、FI、VFI的水平与Piwil2、CyclinD1、NDRG3、CXCL5、CAT-L、EFEMP1、Ang1、Ang2、ANGPTL4的mRNA表达量呈正相关,与THBS2、Smac、LATS1、RECK、PAI-1的mRNA表达量呈负相关。结论:宫颈癌新辅助化疗前后三维能量多普勒超声参数的变化能够反映病灶内增殖、侵袭、血管新生基因表达的改变。     

AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1信号通路及其相关因子在阿尔茨海默病病理改变中的作用

阿尔茨海默病(AD)是老年人常见的中枢神经系统退行性疾病,主要病理表现为β淀粉样蛋白(Aβ)积聚形成神经炎性斑、过度磷酸化的微管Tau蛋白形成神经元纤维缠结、神经元缺失和胶质增生,其中Aβ的生成和清除研究较多。大脑能量代谢异常可导致上述AD样病理变化,而AMP活化的蛋白激酶(AMPK)活化后可改善大脑能量代谢,通过抑制β位淀粉样前体蛋白裂解酶1表达及活性,进而调节淀粉样前体蛋白的裂解,以减少Aβ的生成,过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)也具有类似的作用。此外,AMPK与沉默信息调节因子1的激活及相互作用对PPAR-γ、PGC-1α的信号转导及生理功能起重要作用。     

慢病毒介导叉头框转录因子F2过表达抑制子宫内膜癌RL95-2细胞增殖与迁移

目的:探讨慢病毒介导叉头框转录因子F2(FoxF2)过表达对子宫内膜癌RL95-2细胞增殖与迁移的影响。方法:将体外培养的RL95-2细胞随机分为3组:Control、Lv-NC组和Lv-expFoxF2组。分别采用FoxF2过表达的慢病毒颗粒(Lv-expFoxF2组)和空载体对照慢病毒颗粒(Lv-NC组)感染RL95-2细胞,检测各组细胞FoxF2的mRNA和蛋白表达水平和各组细胞的增殖活性、细胞周期及体外迁移能力。结果:与Control组比较,Lv-expFoxF2组RL95-2细胞中FoxF2 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P0.001)。与Control组比较,Lv-expFoxF2组的细胞存活率显著降低(P0.05),G_0/G_1期细胞百分比明显增加,S期细胞百分比明显减少(P0.05),体外迁移细胞数显著降低(P0.05)。结论:慢病毒介导的FoxF2过表达可抑制子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖和迁移,诱导细胞发生G_0/G_1期阻滞。     

基于Akt/ERK探讨丹蒌片对主动脉平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响＊

目的 观察丹蒌片对同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）诱导的兔主动脉血管平滑肌细胞（rabbit aortic smooth muscle cell，RASMC）增殖、迁移和凋亡的影响，并探讨其与Akt及ERK信号通路的关系。方法 培养RASMC，建立Hcy诱导RASMC增殖模型，实验分为空白组、Hcy组、丹蒌片组、瑞舒伐他汀组（即可定组）、丹蒌片联合瑞舒伐他汀组（即混合组），后三组分别给于丹蒌片、瑞舒伐他汀及丹蒌片联合瑞舒伐他汀含药血清。作用24 h后，Cell Titer-Glo法测细胞增殖，Transwell法测细胞迁移，流式细胞仪Annexin V/PI双染法测细胞凋亡率，蛋白印迹法（Western blot）测信号通路相关蛋白Akt和ERK总蛋白及磷酸化蛋白表达量。结果 ①与空白组相比，Hcy组细胞增殖和迁移显著增加（P < 0.01），凋亡率显著降低（P < 0.01）；与Hcy组相比，三种含药血清组细胞增殖和迁移明显减少（P < 0.01），凋亡率明显增加（P < 0.01）；其中混合组增殖和迁移较丹蒌片组和可定组明显降低（P < 0.01），凋亡率更高（P < 0.01）；与可定组比，丹蒌片组增殖略高，但差异均无统计学意义（P > 0.05），丹蒌片组细胞迁移数明显多于可定组（P < 0.05），凋亡率明显低于可定组（P < 0.05）。②各组Akt及ERK总蛋白表达水平无明显变化（P > 0.05）；与空白组比较，Hcy组p-Akt及p-ERK蛋白表达量均显著上调（P < 0.01）；与Hcy组相比，三种含药血清组p-Akt及p-ERK蛋白表达量明显下调（P < 0.01）；其中混合组的p-Akt及p-ERK蛋白表达较丹蒌片组和可定组进一步下降（P < 0.01）；与可定组比，丹蒌片组p-Akt及p-ERK蛋白表达量增加，但差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 丹蒌片可拮抗Hcy诱导的兔动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移，促进其凋亡，其作用可能与上调p-Akt及p-ERK信号通路蛋白有关。