肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的克隆、表达、纯化及生物学活性鉴定

目的：在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的可溶性片段（soluble TNF-related apoptosis-inducing Ligand，sTRAIL），并鉴定其生物学活性。方法：以人胎盘cDNA为模板，根据GenBank中序列NM_003810设计引物，以PCR方法扩增sTRAIL基因，将其克隆人pET-32a，转化BL21（DE3），IPTG诱导后，收集菌体，超声破碎，离心取上清纯化，鉴定其生物学活性。结果：表达载体经DNA测序鉴定，氨基酸序列与预期一致。宿主菌高效表达目的蛋白，经SDS-PAGE、氨基酸测序鉴定均正确。可溶部分占表达总量的20％。经过两步纯化，sTRAIL纯度达到95％，表达量可达20mg／L培养基。纯化产物在体外能够明显诱导L929、NCI157、BEL7402、DU145等细胞凋亡，Hela细胞不敏感。对于L929，其半数致死量为0．10μg／ml。结论：本研究在原核表达系统中表达了sTRAIL，获得高纯度sTRAIL蛋白，为其进一步研究提供了良好基础。     

1,3-β-D-葡聚糖定量测定在真菌感染诊断中的研究进展

1,3-β-D-葡聚糖广泛存在于各类真菌细胞壁中,是细胞壁的重要组成部分之一。研究表明,除少数真菌外,所有真菌细胞壁上都含有1,3-β-D-葡聚糖,以酵母样真菌含量最高。当真菌进入人体血液或深部组织,经吞噬细胞吞噬、消化后,1,3-β-D-葡聚糖可从胞壁中释放出来,其在血液及其他体液（如尿、脑脊液、腹水、胸腔积液等）中的含量增加。因此,1,3-β-D-葡聚糖已成为检测真菌感染的一个有意义的指标。     

抗风疹病毒IgM类抗体生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法的建立与性能评价

摘要：目的：建立抗风疹病毒IgM类抗体（RV IgM）生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法（BA Mac TrFIA）并评价其分析性能。 方法：用鼠抗人μ链单克隆抗体（抗-μ McAb）作为包被抗体,生物素化RV重组抗原为桥接抗原,链霉亲合素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,测定抗RV IgM抗体,并对其检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、试剂热稳定性进行评价,与同类方法学比对检测1 020例样本,比对实验的一致性分析采用Kappa检验。 结果：本方法检测国家检测限参考品L1、L2和L3的结果均为阳性反应（S/CO≥1.00）,批内变异系数（CV）＜15.00%,国家阴性参考品符合率为10/10,国家阳性参考品符合率为5/5;本方法的试剂盒于37 ℃恒温放置6 d后,检测性能无明显改变;与珠海海泰公司试剂结果符合率为98.82%,Kappa=0.96。 结论：本方法灵敏度高,特异性强,精密度好;与同类方法学检测结果相关性好,能满足临床应用需要。     

锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品的研制和性能评价

目的研制锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品,并评价其性能,促进锂、钠、钾、镁、钙、氯电解质测定的标准化。方法收集含不同浓度锂、钠、钾、镁、钙、氯离子的无溶血、脂血和黄疸血清,经多重过滤、除菌后分装,制备成3个水平的候选品,-70℃保存。以钾离子作为均匀性评价的特性量,采用单因素方差分析评价候选品的均匀性。以钾、钠、氯离子作为稳定性评价的特性量,采用线性回归分析评价候选品的稳定性。采用参考方法或经验证的方法定值,并计算不确定度。评估候选品、新鲜血清样本在参考方法或经验证的方法与4个常规检测系统间的互通性。结果 3个水平侯选品中,钾离子的均匀性检验F值分别为1.630 1、1.498 6和1.020 8,均F0.05;钾、钠、氯离子在2～8℃、20～25℃和-20℃条件下,均至少可稳定30 d。3个水平侯选品中,锂离子定值结果分别为(0.649±0.022)、(1.195±0.032)、(1.334±0.008)mmol/L(k=2),钠离子定值结果分别为(120.057±2.206)、(142.030±1.521)、(158.228±1.293)mmol/L(k=2),钾离子定值结果分别为(5.042±0.143)、(5.739±0.106)、(6.158±0.094)mmol/L(k=2),镁离子定值结果分别为(0.732±0.021)、(0.857±0.026)、(1.144±0.026)mmol/L(k=2),钙离子定值结果分别为(2.014±0.078)、(2.348±0.056)、(3.070±0.024)mmol/L(k=2),氯离子定值结果分别为(90.814±2.005)、(108.875±0.908)、(128.156±1.453)mmol/L(k=2)。钠、钾、镁、钙和氯离子3个水平侯选品浓度均在新鲜血清样本的95%可信区间内,互通性良好。结论制备的锂、钠、钾、镁、钙、氯复合电解质冰冻人血清国家标准品候选品均匀性、稳定性好,钠、钾、镁、钙和氯离子侯选品互通性良好,定值准确可靠,可作为国家标准品使用。     

地龙蛋白肽30d经口染毒对Wistar大鼠的亚急性毒性作用

<正>地龙,为蚯蚓干燥体,是一种传统的动物源性天然中药材,性寒味咸,具有活血化瘀,镇痛消炎等作用,其药用价值在《神农本草经》及《本草纲目》均有记载。地龙中提取的地龙蛋白含有多种蛋白质组分,包括胶原酶、纤溶酶、蚓激酶、纤溶激活蛋白和钙调素结合蛋白等。对于地龙蛋白的药理活性已经有不少研究,认为地龙可以通过调节体内凝血系统和纤溶系统,抑制并促溶血栓,改善微循环及防治心脑血管疾病~([1-3]);可通过抑制血管紧张素转化酶活力控制高血压~([4]);可通过促进细     

营养指导对初产妇孕期体质量控制及妊娠结局的影响

目的 探讨营养指导对初产妇孕期体质量控制及妊娠结局的影响。方法 随机选取中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)于2018年1～12月收治的80例初产妇,按随机数字表法分为对照组及研究组,每组40例。对照组予常规产检,研究组在常规产检基础上进行营养指导。对比两组孕妇孕前、孕26～38周体质量增长幅度情况及对妊娠结局的影响。结果 研究组孕妇体质量增长幅度低于对照组,但差异无统计学意义 (P>0.05)。研究组初产妇剖宫产、妊娠期高血压、妊娠期糖尿病、巨大儿的发生率以及新生儿体质量低于对照组,差异均有统计学意义 (P<0.05) 。结论 给予初产妇营养指导对控制孕期体质量增长幅度无显著影响,但可显著控制剖宫产率、降低孕产妇妊娠期并发症的发生率及改善新生儿状况。     

小切口修补腹股沟疝的临床效果观察

目的分析小切口修补腹股沟疝的临床效果。方法78例腹股沟疝患者分别行小切口修补术及常规修补术,分别对应观察组和对照组各39例,对比两组患者手术效果。结果观察组手术时间、下床时间、切口长度、住院时间及并发症发生率均少于对照组(P0.05)。结论小切口修补腹股沟疝的临床效果显著,并发症少,可促进患者较快康复。     

依达拉奉注射液对AD大鼠学习记忆和海马内APP mRNA表达的影响

目的 观察依达拉奉注射液对老年性痴呆(AD)模型大鼠学习记忆功能和海马内APP mRNA表达的影响。方法 44 只大鼠随机分为空白对照组12只,造模组12只,依达拉奉低剂量干预组(干预Ⅰ组) 10只,依达拉奉高剂量干预组(干预Ⅱ组) 10只。用腹腔注射 D-半乳糖和灌胃 AlCl3法建立AD模型,从实验开始第9周开始,干预Ⅰ组和干预Ⅱ组分别于大鼠尾静脉注射依达拉奉3 mg·kg^-1·d^-1 和6 mg·kg^-1·d^-1,造模组和对照组分别注射等量生理盐水。实验开始12周后以Morris水迷宫实验检测学习记忆能力,以RT-PCR法检测大鼠脑内海马APP mRNA的表达。结果 依达拉奉能显著改善AD模型大鼠的学习记忆障碍(P<0.05),依达拉奉干预Ⅰ组和干预Ⅱ组大鼠脑内海马内APP mRNA表达的水平亦较造模组明显降低(P<0.05)。结论 依达拉奉注射液对AD模型大鼠的学习记忆障碍有明显的改善作用。     

金黄色葡萄球菌黏附因子ClfA作为金黄色葡萄球菌疫苗组分的研究

目的研究黏附因子丛生因子A（clumping factor A,ClfA）在金黄色葡萄球菌（SAU）不同菌株中的分布情况,为开发具有广泛保护效果的SAU疫苗奠定基础。方法采用PCR法扩增目的基因,构建重组质粒,以大肠杆菌BL21（DE3）为表达宿主,对目的蛋白进行表达、纯化。PCR及点杂交法检测ClfA在不同菌株中的分布情况。结果得到纯度较高的目的蛋白,PCR及点杂交结果显示ClfA存在于菌株USA300,而在菌株546、1884、1885中并无分布。结论 ClfA在SAU各菌株中分布不广泛,可能难以作为具有广泛保护效果的SAU疫苗组分。