南京地区腹泻患儿腺病毒感染的分子流行病学研究

目的 了解南京地区腹泻患儿腺病毒的感染状况、临床特点及分子流行病学特征.方法 采集2009年6月至2011年6月南京医科大学附属南京儿童医院5岁以下腹泻患儿粪便标本和流行病学资料,采用聚合酶链反应(PCR)检测腺病毒,对腺病毒阳性株进行序列测定和系统进化分析.结果 2009年6月至2011年6月共730份标本,检测出腺病毒21例,检出率为2.88％ (21/730),主要的血清型为HAdV-41型,占总检出率的42.86％(9/21),非肠道腺病毒占总检出率57.14％(12/21).结论 肠道腺病毒41型(HAdV-41)和非肠道腺病毒感染在南京地区婴幼儿腹泻中均占有重要地位,长期系统的监测具有重要意义.     

人博卡病毒VP2蛋白的原核表达及血清学检测方法的建立

目的 获得高表达量的人博卡病毒( HBoV1、HBoV2) VP2蛋白,建立血清学检测方法.方法 按照大肠埃希菌密码子使用偏性,对HBoV1、HBoV2 VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化合成.将合成的目的基因克隆至表达载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-VP2,转化大肠埃希菌BL21 (DE3),使用IPTG诱导表达并摸索最佳表达条件;粗提取蛋白进行Ni亲和层析纯化后建立间接酶联免疫吸附试验( ELISA),进行临床血清标本筛查,分析人群HBoV1、HBoV2感染情况.结果 优化合成的HBoV1、HBoV2 VP2基因正确连接至pET30a载体,开放阅读框正确,用1 mmol/L IPTG过夜诱导表达(25℃)得到高表达量的VP2蛋白,目的蛋白主要以包涵体的形式存在.粗提取蛋白经NiNTA亲和层析,在pH4.5时获得较理想的纯化蛋白,以其为抗原建立ELISA检查方法,筛查临床血清标本IgG抗体水平,结果显示健康儿童HBoV1阳性率为62.2％,HBoV2阳性率为55.5％,混合感染率为37％.结论 本研究成功将HBoV1、HBoV2 VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化,得到了较高的蛋白表达量,所建立的ELISA法可以应用于HBoV1、HBoV2人群血清流行病学调查.     

食管癌热疗的研究进展

食管癌是中国高发的一种消化系统恶性肿瘤,传统的治疗方法包括手术、放疗、化疗,但长期疗效欠佳且不良反应较明显。热疗作为一种传统的物理治疗方式,无明显不良反应,已被研究证实可以增敏放化疗,联合用于治疗食管癌可延长患者生存期和改善患者生存质量。材料、技术的革新也为肿瘤热疗带来新的突破。     

河南地区正常双胎和单胎妊娠孕中期孕妇血清AFP与F-β-hCG的水平分析

目的研究河南地区单胎妊娠和双胎妊娠母体血清中总游离β-人绒毛膜促性腺激素（F-β-hCG）,甲胎蛋白（AFP）水平的差异。方法选择2012年1月至2012年12月就诊于河南省妇幼保健院,行孕中期唐氏综合征筛查并经产后随访证实为正常胎儿的29 376例正常单胎妊娠孕妇和450例正常双胎妊娠孕妇,对两组人群的AFP和F-β-hCG指标进行统计学分析。结果研究表明,单胎孕妇血清AFP和F-β-hCG水平与双胎之间有明显差异。母血清中AFP和F-β-hCG水平与孕期体重具有显著相关性（P〈0.05）。结论正常单胎妊娠与双胎妊娠孕妇孕中期AFP和F-β-hCG水平有明显差异,建立河南地区人群双胎妊娠风险评价参数的数据库有重要临床意义。     

槲皮素在大鼠上颌快速扩弓时对腭中缝骨改建的影响

目的：研究槲皮素对大鼠上颌快速扩弓时腭中缝骨质改建的作用。方法：18只6周龄SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为3组,A组为空白对照组,B组为扩弓组,C组为扩弓并灌服槲皮素组,每组均6只。其中,A组不扩弓,也不灌服槲皮素;B﹑C组用双眼圈簧扩弓器扩弓,力值0.98 N,C组扩弓后每天灌服槲皮素（100 mg/kg）,A、B组根据体重灌服同剂量的生理盐水。14 d后处死大鼠,标本进行石蜡切片,行常规苏木精-伊红染色、Masson三色染色、免疫组织化学染色。利用Image-pro plus软件对切片吸光度进行分析,采用SPSS 19.0 软件包对数据进行统计学分析。结果：实验第14天,H-E染色和Masson染色显示,A组腭中缝见少量纤维组织,可见软骨细胞、间充质样细胞及成骨细胞等;B﹑C组腭中缝处纤维组织较多,成纤维细胞﹑软骨细胞增多,腭中缝近骨区域处多见成骨细胞;C组成骨细胞数量明显多于B组,有新骨钙化沉积。免疫组织化学染色显示,B组大鼠腭中缝组织中的BMP-2表达量在第14天时显著高于A组（P<0.01）,C 组大鼠腭中缝组织中BMP-2 的表达量显著高于B组（P<0.05）。结论：上颌快速扩弓可扩大生长发育期大鼠的腭中缝;槲皮素能够促进大鼠上颌快速扩弓时腭中缝BMP-2的表达,使骨质沉积钙化,加速新骨形成。     

2009至2010年南京儿童医院5岁以下儿童病毒性腹泻分子流行病学特点

目的对南京儿童医院（我院）5岁以下儿童轮状病毒（HRV）、人杯状病毒（HuCV）、星状病毒（AstV）和肠道腺病毒（AdV）感染的分子流行病学进行研究,为病毒性腹泻的防治提供基础数据和理论依据。方法收集2009年7月至2010年6月于我院消化科门诊就诊的5岁以下腹泻患儿的粪便标本。采用ELISA法检测A组HRV,阳性标本采用RT-PCR法进行毒株分型鉴定;HuCV、AstV和AdV采用RT-PCR或PCR法进行检测。结果研究期间共收集病毒性腹泻患儿粪便标本300份,其中男188例,女112例。年龄1～59月龄,平均（10.5±9.2）月龄。4种病毒检测阳性率依次为HRV（37.7%,113/300）、HuCV（23.7%,71/300）、AstV（4.0%,12/300）和AdV（2.7%,8/300）。①HRVG血清型以G3型（38.9%）最常见,其次为G2型（8.8%）;P基因型以P[8]（33.6%）为主。G血清型和P基因型组合以G3P[8]（15.9%）为主。113份HRV阳性标本中,7～12月龄儿童占43.4%（49/113）,高发季节为2009年10月至2010年1月。②HuCV感染中诺如病毒检出67份,扎如病毒4份。HuCV感染于2009年8月出现一个小高峰,发病年龄高峰为7～12月龄（38/71）,24月龄以下患儿占95.8%（68/71）。③10/12例AstV感染发生于2009年10月至2010年1月,月龄分布为2～16月龄。④8例AdV阳性标本PCR产物经克隆测序,AD2、3、5、7、12和41型各1例,AD31型2例。AdV感染高发于2010年1至6月,发病高峰为7～12月龄（4/8）。⑤60.0%（180/300）至少检出4种病毒中的一种。混合感染23份,其中12份（52.2%）为HRV＋HuCV,5份（21.7%）为HRV＋AstV,2份为HuCV＋AstV,HRV＋AdeV、HuCV＋AdeV、AdeV＋AstV、HRV＋AstV＋HuCV各1份。结论 HRV是引起婴幼儿病毒性腹泻最主要的病毒病原,以G3P[8]为主要优势株。HuCV、AstV和AdV也是重要的病原。     

南京地区婴幼儿杯状病毒感染的分子流行病学研究

目的 了解南京地区婴幼儿杯状病毒腹泻的感染状况、临床表现以及分子流行病学特征.方法 采集2010年7月至2011年6月南京医科大学附属南京儿童医院5岁以下腹泻患儿粪便标本及儿童保健中心健康婴幼儿粪便标本各428份.采用反转录-聚合酶链反应( RT-PCR)检测杯状病毒,测序确定其基因型别.结果 428份腹泻样本中有63份为杯状病毒阳性,检出率为14.72％.其中诺如病毒GⅡ型58例,未检出诺如病毒GⅠ型,札如病毒5例,以诺如病毒GⅡ-4 2006b型为主要流行株.428份健康对照组标本杯状病毒检出19例,诺如病毒6例,札如病毒11例,2例为诺如病毒GⅡ型和札如病毒混合感染.结论 南京地区婴幼儿中存在不同基因型杯状病毒感染,流行毒株以GⅡ.2006b为主.