Cdk5/p35参与了慢性应激诱导的大鼠抑郁样行为

背景:对抑郁症发生机制的研究表明,抑郁症患者表现为海马以及其他脑边缘结构的体积减少和细胞丢失,抗抑郁剂可显著促进抑郁模型动物海马神经元发生,提示神经可塑性机制涉及了抑郁症的发生过程。周期素依赖性蛋白激酶-5(Cdk5)及其活性调节蛋白p35是保持成熟神经系统内边缘系统,尤其是海马中神经元具有潜在可塑性的关键激酶。Cdk5在中枢神经系统发育过程中起着至关重要的作用,主要与神经元迁移、轴突生长和神经递质释放有关,还参与细胞骨架形成、轴突导向、膜转运、突触功能和多巴胺信号转导等多种神经功能调控。然而,在某些病理性因素作用下,Cdk5激酶活性异常升高会引起神经元的过度死亡,导致一些神经退行性疾病的发生。Cdk5在调节神经元的生存方面发挥着重要的作用,那么在抑郁症损伤的海马神经元中,Cdk5是否也参与了神经元的生存过程,从而介导了抑郁症的发生尚未见到报道。目的:本研究将基于抑郁症神经可塑性的研究基础,探讨Cdk5/p35在抑郁症模型大鼠抑郁样行为中的作用,以期进一步阐明抑郁症发生的神经生物学机制,并为临床发现新的治疗抑郁症的有效手段奠定理论基础。方法:采用连续21d的慢性不可预见性的中等强度应激抑郁模型(CMS),以动物的体重变化、蔗糖水偏爱(sucrosep reference)和自发活动能力为指标,考察抑郁模型动物行为学变化;通过测定Cdk5特定底物-组蛋白H1被磷酸化的程度检测大鼠海马部位Cdk5激酶活性,用Westernblot的方法检测p35蛋白的表达;同时在应激过程中,采用微量注射的方法,分别在海马齿状回(DG),CA1及CA3亚区给予Cdk5激酶抑制剂(butyrolactone),观察抑制不同脑区Cdk5激酶对抑郁症模型动物体重,糖水偏爱、自发活动性等抑郁样行为的影响。此外,在慢性应激的同时,连续给予抗抑郁药venlafaxine和mirtazapine,考察抗抑郁剂的治疗作用对海马p35蛋白表达水平的影响。结果:慢性应激大鼠海马部位Cdk5激酶活性显著升高;Western blot结果表明应激大鼠海马DG区胞膜组分p35蛋白的表达水平明显上调,而胞浆p35蛋白表达水平显著降低;相关性分析结果表明海马Cdk5激酶活性与胞膜p35蛋白的表达水平呈明显正相关,而与胞浆p35蛋白的表达水平呈明显负相关;大鼠体重增加值,糖水偏爱与海马胞膜p35蛋白的表达水平呈显著负相关。上述结果表明海马Cdk5激酶活性升高参与了慢性应激诱导的大鼠抑郁样行为。行为学检测结果表明,海马DG区微注射Cdk5激酶抑制剂butyrolactone(50,100ng)可显著逆转慢性应激引起的大鼠抑郁样行为,而在CA1和CA3区微注射butyrolactone(100ng)则对大鼠的抑郁样行为没有明显影响,说明抑制Cdk5激酶活性改善大鼠抑郁样行为具有脑区特异性。在慢性应激实验中发现连续给予抗抑郁药venlafaxine(40mg·kg-1)和mirtazapine(20mg·kg-1)可明显降低DG区胞膜p35蛋白的表达水平,促进p35蛋白由胞膜转运至胞浆,而抗精神病药aripiprazole(5mg.kg-1)对慢性应激引起的DG区胞膜p35蛋白表达增加没有明显影响,说明降低胞膜p35蛋白的表达水平,抑制Cdk5激酶活性是抗抑郁药物特异性的。结论:本研究通过一系列实验证实了Cdk5/p35在慢性应激大鼠抑郁样行为中的作用,抑制Cdk5活性可有效逆转动物的抑郁样行为,抗抑郁剂在发挥治疗作用的同时可抑制Cdk5激酶的异常激活。因此,本研究结果为抑郁症的神经生物学机制研究和临床抗抑郁治疗药物研究开发提供了新的思路。     

穿心莲内酯及穿心莲总内酯提取工艺的改进实验

按照《中药制剂汇编》所介绍的穿心莲内酯提取方法,用本厂贮存一年的穿心莲全草提取穿心莲内酯,收率只有0.37%。我们在原工艺的基础上摸索到一条较理想的提取穿心莲内酯的新工艺。旧工艺:取穿心莲全草粗粉,分别用5倍量和4倍量的乙醇浸渍三天和二天。合并浸溃液,加入0.5%(V/V)活性炭用乙醇回流脱色。过滤后,滤液减压回收乙醇至原体积的3～5%。放置3～5天析出结晶。收集结晶后,再浓缩至原体积1/3,再放置3～5天后析出结晶。二次结晶用乙醇再重结晶得到穿心莲内酯粗品。新工艺:穿心莲全草粗粉,乙醇浸提,脱色,减压回收乙醇均同旧工艺。醇浸膏于水浴上蒸至无醇味,放凉。加入3～4倍量的冷蒸馏水,搅拌,放置过夜,滤集沉淀。沉淀中加入一倍量蒸馏水饱和的醋酸乙酯研磨,抽滤得穿心莲内酯与穿心莲总内酯混合品。用10倍量乙醇,0.5～1%活性炭回流     

柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁动物下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性应激大鼠下丘脑垂体肾上腺(HPA)轴的影响。方法:采用不同应激因子交替持续应激21d复制大鼠慢性应激抑郁模型,经口分别给予柴胡加龙骨牡蛎汤浸膏干粉200、500mg·kg-1,观察柴胡加龙骨牡蛎汤对大鼠糖水消耗、开野实验行为学指标变化及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)水平的影响。结果:经过21d慢性应激,大鼠出现糖水消耗量减少、开野实验水平得分及垂直得分均明显减少、中央格停留时间显著延长等抑郁状态,同时血浆ACTH、CORT浓度较空白对照组显著升高;经口给予柴胡加龙骨牡蛎汤后可显著改善慢性应激抑郁模型大鼠的行为学和神经内分泌变化。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤可抑制慢性应激引起的HPA轴功能亢进,可改善大鼠的抑郁状态,具有较好的抗抑郁作用。     

四逆散催眠作用的实验研究

目的:对四逆散催眠药理作用进行初探.方法:采用协同戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用.结果:四逆散能明显延长阈上剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间,缩短入睡潜伏期,增加阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡率.结论:四逆散有明显的催眠作用.     

网络成瘾共病肥胖的神经生物学机制研究进展

网络成瘾和肥胖的发生率日益升高,已成为全球普遍性的问题,严重影响各年龄段人群的生理和心理健康,本文对两者之间的相关性、共病的原因以及可能的神经生物学机制进行综述.大量流行病学证据表明,网络成瘾与肥胖的发病呈显著正相关,其可能的原因包括低体力活动和久坐、低睡眠质量、高热量饮食和不吃早餐等不良生活习惯以及焦虑、抑郁等心理因...     

氯胺酮抗抑郁作用快速起效机制及发展前景

<正>抑郁症是一种常见的慢性复发性疾病。抑郁症的主要表现有快感缺失、无望感、无助感、自我评价下降等症状。全球有17%的人口饱受抑郁症困扰[1]。抑郁症严重性的另外一些表现是自杀危险性增加,以及对共病抑郁障碍的慢性躯体疾病病人愈后和转归产生消极影响。与其他严重疾病相比,抑郁症给社会造成的经济负担是惊人的。     

腹侧苍白球向基底外侧杏仁核的投射参与可卡因复吸简

腹侧苍白球是中脑边缘奖赏系统中的重要位点,它向伏隔核、泛杏仁体、边缘丘脑、黑质和腹侧被盖区（VTA）均有密集的纤维投射,参与VTA调节的奖赏行为。近日,来自南卡罗来医科大学Gary AstonJones研究小组的Mahler博士研究发现腹侧苍白球向VTA的投射在可卡因觅药行为中发挥重要作用。以往研究表明,腹侧苍白球是非均一质的结构,分为腹内侧（吻端,RVP）和背外侧（尾端,