人黄体期卵母细胞的体外成熟及玻璃化冷冻的实验研究

目的:探讨未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)技术联合玻璃化冷冻保存黄体期卵母细胞对某些女性肿瘤患者的生育能力的保存情况。方法:采集因妇科肿瘤等行卵巢切除手术过程中穿刺获取的256枚未成熟卵母细胞,按取卵时患者的月经周期分为卵泡期组(143枚)与黄体期组(113枚),每组再随即分为新鲜对照组及玻璃化冷冻组。分别进行IVM后行新鲜卵胞质内单精子注射(ICSI)授精和玻璃化冻融卵ICSI授精,比较各组间IVM后MII卵率、受精率、卵裂率、优质胚胎率。结果:①卵泡期与黄体期卵母细胞的IVM率差异无统计学意义;而组间复苏存活率(68.0%vs 48.1%)有统计学差异(P<0.05);卵泡期与黄体期卵母细胞新鲜组间受精率、卵裂率、优质胚胎率无统计学差异,冷冻组间差异亦无统计学意义。②与新鲜组相比,玻璃化冷冻使卵泡期与黄体期卵母细胞的受精率均降低(P<0.01)。结论:黄体期未成熟卵母细胞可以体外成熟并有继续发育为优质胚胎的能力;玻璃化冷冻使卵母细胞受精率、卵裂率下降。IVM和冻融后体外授精是某些女性肿瘤患者保存生育能力的一种有临床应用前景的方式。     

激光辅助孵化技术在冷冻复苏周期囊胚移植中的应用

目的 探讨激光辅助孵化(AH)技术在冷冻复苏周期囊胚移植中的应用效果.方法 选择复苏周期囊胚移植患者444例,根据有无行激光AH分为激光AH组(AH组)250例、非激光AH组(NAH组)194例,比较两组囊胚孵化程度、妊娠结局指标(胚胎植入率、生化妊娠率、临床妊娠率、活产率、流产率)和新生儿结局指标(新生儿出生体质量、...     

GRIM-19在小鼠植入前胚胎中的表达及其作用

目的 通过研究干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因 (GRIM-19)在小鼠植入前胚胎中的表达及其与胚胎质量之间的相关性,探讨GRIM-19在小鼠植入前胚胎发育中的作用。方法 采用实时定量PCR,检测小鼠植入前胚胎（2-细胞期、4-细胞期、8-细胞期、桑葚胚和囊胚）中GRIM-19 mRNA水平 (n =16);将小鼠8 细胞期胚胎按卵裂球大小、形态、透明带、胞质碎片分为优胚组和非优胚组,分别检测两组胚胎GRIM-19 mRNA水平,并分析其相关性 (n =13);制作假孕鼠（23只）,并随机分为A组（12只）和B组（11只）,采用移植器将优质和非优质8-细胞期胚胎移入假孕鼠的子宫内,观察两组雌鼠妊娠率及产仔率。结果 GRIM-19在小鼠植入前各期胚胎中均有表达,其mRNA水平从2-细胞期逐渐增高,至8-细胞期达高峰,随后呈下降趋势。优质8-细胞胚胎的GRIM-19 mRNA水平明显高于非优胚组（P <0.05）。两组8-细胞胚胎移植后,A组雌鼠妊娠率及产仔率显著高于B组雌鼠（P<0.05）。 结论 小鼠植入前胚胎中GRIM-19的表达量随发育时程的改变而变化,且与胚胎质量密切相关。     

环境化学物质VCD致卵巢功能早衰动物模型的构建

卵巢功能早衰(premature ovarian failure,POF) 是以闭经、性激素缺乏和高促性腺激素为特征的一组综合征,其发病率约1%～3.8%,近年它在女性因素不孕患者中所占比例有逐年上升的趋势.卵巢是女性重要的生殖和内分泌器官,环境中的化学物质能通过破坏卵泡中的卵母细胞影响卵巢功能~([1-3]),因此,环境化学物质对生殖健康的影响越来越受到关注.     

兔卵巢组织玻璃化冷冻的实验研究

目的:探讨玻璃化冷冻法保存兔卵巢组织的效果。方法:随机将25只新西兰雌兔分为对照组(5只)、慢速冷冻组(10只)和玻璃化冷冻组(10只),比较各组冻融前后卵巢组织学、超微结构、卵泡凋亡(原位末端标记法,TUNEL)和子宫系膜内移植后卵巢功能的恢复情况。结果:新鲜组织、慢速冷冻复苏组织和玻璃化冷冻复苏组织中正常形态卵泡比例分别为87.36%、81.96%和82.72%,两冷冻组正常卵泡比例均低于对照组,差异有统计学意义?P(0.05),但玻璃化冷冻组与慢速冷冻组差异无统计学意义(P>0.05)。3组间卵泡凋亡比率分别为21.4%、13.5%和17.1%,差异无统计学意义(P>0.05);3组移植后兔动情周期出现率均为100%,动情周期出现天数差异无统计学意义?P>0.05);移植存活的卵巢组织内可见各级形态正常的卵泡发育。结论:玻璃化冷冻可有效保存卵巢组织的结构和功能,是一种简单、可行的兔卵巢组织冷冻保存法。     

兔卵巢组织冷冻移植后卯母细胞成熟及受精发育能力的研究

目的 探讨兔卵巢组织冷冻复苏后移植对卵母细胞生长、成熟、受精发育潜能的影响. 方法 25只性成熟新西兰雌兔随机分为对照组(5只)、新鲜移植组(10只)及冷冻复苏移植组(10只),卵巢组织均自体多点移植于子宫系膜内.卵巢移植90d后对兔联合使用促排卵、体外成熟培养和卵泡浆内单精子注射技术,观察卵子的成熟情况以及体内和体外成熟卵子的受精率、卵裂率和囊胚形成率. 结果新鲜移植组和冷冻复苏移植组获卵数均低于对照组(P<0.05),而两移植组间获卵数差异无显著性;各组末成熟卵子所占比率以及未成熟卵子体外成熟后的成熟率间均无显著性差异;各组间体内成熟卵子、体外培养成熟卵子的受精率、卵裂率和囊胚形成率的差异不明显;各组内体内成熟卵子与体外培养成熟卵子相比受精率、卵裂率间无显著性差异,但体外培养成熟卵子囊胚形成率明显低于体内成熟卵子(P<0.05). 结论兔卵巢经冷冻复苏自体移植后,其卵泡能够重新生长发育;通过体外成熟和受精技术,体内和体外成熟卵子均可产生正常的胚胎.提示卵巢组织冻融移植结合辅助生殖技术可作为一种生育力保存的方法.     

人胚胎干细胞的研究进展

人类胚胎干细胞系的建立是人类发育生物学研究的重大突破 ,揭示了人体发生发展奥秘的进程 ,可能为现代临床医疗模式带来革命性的变化。现对人类胚胎干细胞的来源 ,建系、生物学特性、应用前景及所涉及的伦理学问题作一综述     

人类白细胞抗原-DR基因与不明原因的重复性流产的关联性研究

目的：探讨不明原因重复性自然流产(URSA)及其临床表现与人类白细胞抗原(HLA)DR1、DR3、DR4、DR10等位基因频率的关系。方法：运用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR—SSP）方法测定HLA—DR1、DR3、DR4、DR10的基因频率。结果：HLA—DR1、DR3的阳性率在URSA组与对照组差异无显著性，DR4阳性率在URSA组明显高于对照组，差异有显著性，DR10阳性率在URSA组高于对照组，但差异无显著性。DR4基因分布与URSA患者的不同临床特征无明显关联。与抗心磷脂抗体(ACA)有较强关联。结论：HLA—DR4与URSA有明显关联，尤其在ACA( )患者中关联更强。     

乳腺癌端粒酶活性表达研究

目的　探讨端粒酶活性水平同乳腺癌临床病理指标的关系及其作为化疗疗效评价指标的意义。方法　用半定量TRAP 银染法测定 5 3例乳腺癌、10例纤维腺瘤及 6例癌旁组织标本的相对端粒酶活性。结果　乳腺癌组织端粒酶活性表达明显高于乳腺良性病变 (P <0 .0 1) ;术前未经治疗的原发性乳腺癌中 ,端粒酶活性表达与TNM分期、局部淋巴结状态、雌激素受体及孕激素受体表达有关 ;术前化疗组端粒酶活性水平较未化疗组低。结论　端粒酶活性水平可反映肿瘤的侵袭性 ,并可作为乳腺癌的预后判断指标及化疗疗效的评价指标。