肿瘤研究需要转变观念

在我们对肿瘤研究进行得风风火火的时候,2011年美国癌症协会（AACR）年会上Tatin教授对现在的肿瘤假说提出了质疑,立刻引起了强烈关注．在此我们也对肿瘤假说提出了一些质疑,同时对肿瘤研究进行了思考,提出了一些自己的观点。     

常见小肠出血的原因分析及诊治体会

目的 分析总结常见小肠出血病因及诊治经验。方法 对1990-2004年第四军医大学西京医院普三科诊治的74例经手术及病理证实小肠出血的临床资料进行回顾性分析。结果 小肠出血发生原因依次分别为肿瘤（41.9%）、小肠憩室（25.7%）、血管病变（23.0%)及炎性肠病（9.5%）。＞45岁病人以肿瘤（55.6%）、血管病变（27.8%）为主,≤45岁以小肠憩室（42.1%）和肿瘤（28.9%）为主。全组病人均经手术治疗。结论 肿瘤是引起小肠出血的主要原因,其次为小肠憩室、炎性肠病及血管病变。选择性肠系膜血管造影、核素扫描和小肠气钡双重造影是小肠出血的主要诊断方法,对怀疑小肠出血,辅助检查无法明确诊断时剖腹探查是主要诊断方法。针对不同原因的小肠出血可以选择药物、内镜或手术治疗。     

Survivin和Bcl-2蛋白在甲状腺癌中的表达及其意义

目的:探讨survivin和Bcl-2蛋白在甲状腺癌发生发展中的作用及其临床意义.方法:用免疫组化ABC法对40例甲状腺癌组织进行survivin和Bcl-2蛋白的检测,并与20例正常甲状腺组织进行对照研究.结果:Survivin和Bcl-2在甲状腺癌组织中表达阳性率分别为67.5%、45%,而在正常甲状腺组织中未见survivin表达(P<0.05).Spearman相关分析表明survivin与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.05).结论:Survivin和Bcl-2蛋白的表达与甲状腺癌的发生发展密切相关,联合检测survivin和Bcl-2蛋白有助于甲状腺肿瘤的诊断及预后评估.     

大容量人乳腺癌单链抗体库的构建与初步鉴定

目的利用细胞内重组技术构建大容量人乳腺癌单链抗体(scFv)库。方法收集30例乳腺癌外周转移淋巴结,依次提取总RNA、mRNA,RT-PCR扩增全套可变区基因(VL、VH),各自克隆到T载体,构建T载体库。然后从T载体上酶切VL、VH分步克隆到噬粒载体pDAN5,经电转化TG1得到初级库。辅助性噬菌体感染初级库,使噬菌体抗体表面呈现。提纯噬菌体抗体,滴定浓度后感染大肠杆菌BS1365进行细胞内重组。噬菌体挽救后再次提纯滴定噬菌体,感染大肠杆菌DH5αF',得到次级库,并测序验证。结果VH、VLT载体库分别为3.5×108和1.7×108,初级库库容量2.5×109。次级库库容量为2.5×1011。结论所采用的引物能够高效扩增目的片段,T载体的应用能够提高抗体基因的克隆效率,细胞内重组将进一步扩大库容量及增加其多样性,这种基于RT-PCR、T载体过渡、细胞内重组的路线能够构建大容量抗体库。     

Survivin亚细胞定位与乳腺癌临床病理特征关系的研究

目的:探讨survivin的亚细胞定位与临床病理特征的关系。方法:收集行乳腺癌改良根治术、保乳手术和(或)腋窝淋巴结清扫手术,病理诊断为浸润性乳腺癌的患者标本80例。采用免疫组织化学方法对样本survivin表达水平进行检测,分析乳腺癌中survivin的亚细胞定位与临床病理特征之间的关系。结果:乳腺癌组织中survivin的阳性率为76%,其中26%定位于细胞核,15%定位于细胞浆,两者染色均阳性为35%。亚细胞定位差异与淋巴结转移相关(P<0.05),与病例分级、ER表达、肿瘤大小无关(P>0.05)。结论:survivin在乳腺癌表达具有亚细胞定位差别,并且与淋巴结转移相关,提示该基因的不同定位在乳腺癌发生和转移过程中发挥着不同的作用。     

胰腺假性囊肿55例

1 临床资料 2003-07/2008-06我科收治胰腺假性囊肿(PPC)患者55(男37,女18)例.年龄14～57(平均43.5)岁.有胰腺炎病史者43例,上腹部外伤7例,另5例未发现明确原因.临床表现为上腹部胀痛38例,伴恶心、呕吐、纳差25例,腹部包块22例,上消化道梗阻2例.经B超和CT影像学检查:囊肿位于胰头者16例(图1A),位于胰体尾者39例(图1B),其中1例合并脾动脉瘤,8例为多发部位囊肿.囊肿直径     

噬菌体抗体库筛选技术及在肿瘤研究中的应用

噬菌体抗体是指表达在噬菌体表面的抗体分子Fab或scFv,这些分子的群体称为抗体库。经特定抗原或细胞筛选后可以获得针对该抗原或细胞表面标志物的特异性抗体。经典的筛选方法为固相或液相抗原识别,前提条件是能得到抗原纯品,对于抗原无法提纯或抗原性质不确定的情况则不能适用,所以又出现全细胞筛选,直接利用肿瘤细胞或组织细胞进行筛选,无需纯抗原,但目标抗原一定要有较高的表达水平,对于表达较低的情况,一种策略是先利用正常细胞筛选,去掉无关抗原后,再利用肿瘤细胞筛选;另一种策略是细胞内化筛选,特异性抗体被内化入细胞,然后用酸性洗脱液洗脱掉细胞膜上非特异结合的噬菌体抗体后裂解细胞,获得特异性抗体。其余筛选方法还有切片组织筛选、体内筛选等,适用面较窄,未获推广。筛选效率主要通过以下几项的检测:转化数,即被感染的噬菌体数,它随筛选轮数的增加而增加;抗体基因插入载体的频率,高比例的丢失意味着筛选的低效率;抗体亲和性。抗体库技术避免了杂交瘤技术中的许多难点,如细胞融合、动物免疫等,目前该技术已逐渐在肿瘤诊断和肿瘤治疗中发挥重要作用。     

基于loxP-cre系统的细胞内重组技术

 噬菌体呈现技术近年来得到不断改进和完善。基于loxP-cre系统的细胞内重组技术是最为重要的改进。从双载体系统到单载体系统，从大样本抽样测序到肉眼直观判断，它使大库容量天然抗体库的构建变得简单易行，并有利于高亲和力抗体的获取。现对其改进和完善过程进行综述。     

建构主义在普外教学中的应用

回顾了建构主义的由来,比较了和普外传统教学模式的异同,介绍了建构主义在普外教学中的应用。教师充分调动学生的主动性,又不忽视自身对学生的引导和帮助,鼓励学生从已有的知识体系出发,温故知新,借助多种手段主动学习,使知识构架不断丰富和完善。     

两种菌落聚合酶链反应在抗体库筛选中的应用比较

摘要：目的：探讨两种菌落PCR方法在抗体库筛选中的应用价值。方法：分别以5个阳性克隆细菌菌落直接悬浮于去离子水中及悬浮于含0．1％的TritonX-100后经水浴煮沸作为模板，进行PCR反应。同时提取质粒DNA，进行双酶切鉴定。结果：5个克隆的菌落PCR及酶切鉴定均检测到目的基因。结论：菌落PCR可用于筛选阳性重组克隆。菌落直接加入去离子水中作为模板进行PCR反应的方法可在大规模阳性重组DNA的筛选鉴定中推广应用。