过敏性输血反应的原因分析及检测方法

<正>免疫相关非溶血性输血反应包括过敏反应、发热反应、输血后紫癜、输血相关移植物抗宿主病,输血相关急性肺损伤等。其中过敏反应发生率在近年来国内外报道中均高于其他种类输血反应。输血相关过敏反应(allergic transfusion reactions,ATRs)的临床表现症状有:荨麻疹、瘙痒、皮肤红斑、潮红、血管性水肿、支气管痉挛、肺水肿、血压下降以及过敏性休克等,一些症状主要累及局部组织器官发生过敏性炎症,药物治疗有效,但也会存在     

延肾口服液延缓肾间质纤维化进展的实验研究

目的 探讨肥大细胞(MC)在延肾口服液延缓肾间质纤维化(RIF)进程中的作用.方法 将75只雄性SD大鼠按随机数字表法均分为假手术组、模型组、贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组5组.采用单侧输尿管梗阻(UUO)致大鼠RIF模型.术前1 d治疗组开始灌胃贝那普利3.5 ml/d及延肾口服液2.8 ml/d、1.4 ml/d.术后42 d留取血、尿标本行肌酐、尿素氮测定.取肾组织行苏木素-伊红(HE)染色,观察肾间质病理改变;行甲苯胺蓝染色和免疫组化染色,检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β(TGF-β)及类胰蛋白酶表达;透射电镜下观察MC超微结构改变.结果 光镜下观察贝那普利组和延肾高、低剂量组RIF程度轻于模型组.与模型组相比,贝那普利组和延肾高、低剂量组MC数量显著减少(12.00±1.33、8.00±0.65、22.00±3.34比29.00±0.57,P<0.05或P<0.01);MC体积较大,无颗粒脱出.肾组织α-SMA、TGF-β类胰蛋白酶表达水平较模型组显著降低(α-SMA:1.82±0.94、1.61±0.16、2.04±0.26比3.41±0.10;TGF-β:1.72±0.14、1.63±0.47、2.16±0.11比3.23±0.43;类胰蛋白酶:0.43±0.50、0.52±0.47、0.85±0.50比1.47±0.27,P<0.05或P<0.01),量效关系较好.贝那普利组和延肾高、低剂量组血尿素氮(BUN)、尿肌酐(UCr)和尿尿素氮(UUN)均较模型组显著降低(均P<0.05);各组间血肌酐(SCr)比较差异均无统计学意义(均P>0.05).RIF程度与MC数量呈正相关(r=0.780,P<0.05),TGF-β阳性MC与类胰蛋白酶阳性MC呈正相关(r=0.887,P<0.05).结论 延肾口服液延缓RIF的作用与其抑制MC趋化、脱颗粒有关.     

人脑膜瘤细胞的原代培养

目的 建立一种人脑膜瘤细胞原代培养简单有效的方法.方法 新鲜脑膜瘤组织取自福建协和医院神经外科25例连续治疗的脑膜瘤手术病人,以胰蛋白酶消化法分离细胞,用含10%胎牛血清的DMEM培养液进行培养并传代,显微镜下观察脑膜瘤细胞生长状况.上皮膜抗原(EMA)、波形蛋白(Vimentin)对脑膜瘤细胞进行免疫组化鉴定.结果 用胰酶消化法培养脑膜瘤细胞,方法简单,细胞形态典型;EMA、Vimentin表达阳性,鉴定为脑膜瘤细胞.结论 单一的胰蛋白酶消化法是一种简单有效的脑膜瘤细胞原代培养的方法.     

急性肺损伤大鼠体内明胶酶的活性变化及大豆胰蛋白酶抑制剂的干预效应

目的探讨急性肺损伤大鼠体内基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,MMP-9)活性的变化以及大豆胰蛋白酶抑制剂(soybean trypsin protease inhibitor,SBTI)的干预效应。方法90只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组,n=30)、内毒素组(LPS组,n=30)、大豆胰蛋白酶抑制剂组(SBTI组,n=30)。向LPS和STBI组大鼠气管内一次性注入0.3ml含LPS(6mg.kg-1)的生理盐水复制ALI模型,假手术组大鼠则在气管内一次性注入等量生理盐水。SBTI组于造模前1天腹腔注射给予100mg.kg-1.d-1SBTI(溶于0.5ml生理盐水),假手术组和LPS组大鼠腹腔注射等量的生理盐水,3组动物同步于气管内LPS灌注后d1、d3、d7分别随机处死10只。收集肺泡灌洗液,冰浴匀浆肺组织制备匀浆液,-80℃冻存。Bradford法测定血浆蛋白含量和肺泡灌洗液中蛋白含量,计算肺通透指数;酶谱法测肺组织匀浆液和支气管肺泡灌洗液上清中MMP-2、MMP-9酶活力及免疫组织化学方法检测肺组织MMP-2、MMP-9蛋白表达情况;并进行肺组织形态学观察。结果酶谱法显示:与LPS组相比,SBTI组大鼠肺组织、支气管肺泡灌洗液中MMP-2、MMP-9活性明显下降,在d7活性变化明显,但MMP-9变化较MMP-2更明显。免疫组化显示MMP-2、MMP-9在LPS组肺组织细胞高表达。SBTI组大鼠肺组织MMP-2、MMP-9表达明显减弱。肺组织病理提示SBTI治疗组肺损伤病变局限且程度较轻,肺泡内渗出明显小于LPS组,PMN和红细胞渗出较少。结论MMP-2、MMP-9在LPS诱导大鼠急性肺损伤中发挥重要的作用,SBTI通过抑制MMPs的分泌及激活,降低基底膜的降解,减轻肺水肿及炎症反应,发挥肺保护的作用。     

重组牛胰蛋白酶抑制剂对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对大鼠慢性肝损伤的保护作用。方法大鼠98只,随机分成7组,分别为正常对照组、模型组、rBPTI3个剂量组(20,40和80MU.kg-1)、抑肽酶组(80MU.kg-1)和促肝细胞生长素组(100mg.kg-1)。除正常对照组外,其余各组皮下注射四氯化碳制备慢性肝损伤模型。8周后每天ip给药,给药4周后测定血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性、白蛋白(Alb)含量、白蛋白/球蛋白(A/G)比值、唾液酸(SA)含量及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,并进行组织病理学检测。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清GPT和GOT活性、SA含量及肝组织Hyp含量明显升高,血清Alb含量和A/G比值明显降低。与模型组比较,rBPTI各剂量组大鼠血清GPT和GOT活性、SA含量及肝组织Hyp含量降低,血清Alb含量和A/G比值明显增高。肝组织病理观察显示,rBPTI明显减轻由四氯化碳所致肝细胞脂肪变性及纤维组织增生等病理改变。结论rBPTI对四氯化碳诱导的大鼠慢性肝损伤具有保护作用和抗纤维化作用,在所观察的剂量范围内作用效果与抑肽酶相当。     

胰蛋白酶的固定化研究进展

固定化胰蛋白酶比自由酶有更好的热稳定性和pH稳定性、易于分离、可重复利用,因此更适合于实际应用。此文对近年来发展比较快的制备固定化胰蛋白酶固定化载体和方法进行综述。     

乌司他丁治疗急性胰腺炎临床分析

随着人们生活水平的提高,急性胰腺炎的发病率呈上升趋势,奥曲肽是目前治疗急性胰腺炎公认有效的药物,但由于其价格昂贵,限制了其临床广泛使用,乌司他丁是从人尿中提取的精制糖蛋白,有抑制胰蛋白酶、弹性蛋白酶、纤溶酶等蛋白水解酶及透明质酸酶、淀粉酶、脂肪酶等糖类和脂类水解酶的作用.我院2002～2006年对乌司他丁和奥曲肽治疗急性胰腺炎进行临床分析,总结如下.     

无细胞真皮基质的研制

目的研制人同种脱细胞真皮基质,用于大面积深度烧伤后真皮成分的替代、美容医学中的填充及皮肤组织工程中的支架材料。方法获得的正常人新鲜尸体皮肤,用高渗盐溶液去除表皮,十二烷基硫酸钠、胰蛋白酶等处理以去除真皮中的细胞成分,得到人同种脱细胞真皮基质,经光镜、电镜和免疫组织化学分析。结果经处理后得到的人无细胞真皮基质,完全去除了表皮和真皮中的细胞成分,保留了完整的基底膜复合物,胶原束结构和排列正常,弹力纤维结构正常。结论用此方法制备无细胞真皮基质,能完全去除表皮和真皮中的细胞成分,不改变真皮中胶原纤维和弹力纤维结构,其制备工艺操作性强,是一种简单有效的制备方法。     

乌司他丁对重症胰腺炎患者凝血功能的影响

乌司他丁是从男性尿液中分离纯化的尿胰蛋白酶抑制剂，除对多种蛋白酶、糖和脂水解酶有抑制作用外，还能延长部分活化凝血酶原时间和凝血酶时间，有抗纤溶作用。目前临床上主要用于急性胰腺炎的治疗。本研究旨在探讨乌司他丁对重症胰腺炎患者凝血功能的影响。     

胰蛋白酶与糜蛋白酶辅助治疗蝮蛇咬伤效果观察

毒蛇咬伤是夏秋季节南方农村常见的急症之一,其中蝮蛇又是最常见的致伤蛇种。我国的蝮蛇主要分布在浙、湘、赣、皖、豫等省[1-2]。蝮蛇咬伤可导致伤口红肿、出血、坏死,严重者出现呼吸衰竭或急性肾衰竭,治疗不当者后果严重[1]。为了探索蝮蛇咬伤的药物疗效,我院2001年4至10月选择158例蝮