氧化苦参碱缓释胶囊的制备及体外释放特性研究

目的制备氧化苦参碱24h缓释胶囊并对其体外释放特性进行研究。方法采用流化床包衣法,先将氧化苦参碱与聚乙烯吡咯烷酮溶于85%乙醇中,喷于空白丸芯制成含药微丸,再以乙基纤维素水分散体（Surelease）作为主要包衣材料进行包衣,得微丸装胶囊。建立体外分析方法并进行体外释药模型拟合。结果该缓释胶囊的释药符合Higuchi方程,具有缓释制剂的体外溶出特征。结论苦参碱缓释胶囊制备工艺简单,释药稳定,具备优良缓释制剂的特征。     

高效液相色谱法测定当归苦参丸中苦参碱和氧化苦参碱

目的建立测定当归苦参丸中苦参碱和氧化苦参碱含量的高效液相色谱法。方法采用Phenemonex C18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，流动相：乙腈-0．1％三氟醋酸溶液（5：95），流速：1．0mL·min^-1，检测波长：208nm，柱温：35℃。结果苦参碱和氧化苦参碱线性范围分别为0．0512～0．3584μg（r=0．9990）和0．1924～1．3468μg（r=0．9999）；平均回收率分别为98．73%,100．14％（n=6）。结论该方法操作简单，重现性好，检测灵敏度、准确度高，且样品分离效果好。适用于当归苦参丸中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定。     

HPLC法测定苦参总碱中苦参碱与氧化苦参碱的含量

目的:采用高效液相色谱法测定苦参总碱中苦参碱和氧化苦参碱的含量。方法:采用 Elite Hypersil NH_2柱(5μm,250mm×4.6 mm),乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(81:10:9)为流动相,流速:1.0 mL·min~(-1),检测波长220 nm,柱温:25℃,进样量:10 μL。结果:苦参碱、氧化苦参碱的线性范围分别为5.32～53.2μg·mL~(-1)(r=0.9997),65.7～525.6μg·mL~(-1)(r=0.9995)。苦参碱平均加样回收率为99.5%,RSD=1.0%(n=6);氧化苦参碱的平均加样回收率为99.7%,RSD=0.6%(n=6)。结论:本方法操作简便、快速、可靠,可用于控制苦参总碱质量。     

苦参素磷脂复合物在大鼠体内的生物利用度研究

目的：研究苦参素磷脂复合物在大鼠体内的药时曲线,计算其在大鼠体内的药动学参数；并与苦参素比较研究苦参素磷脂复合物的相对生物利用度。方法：大鼠灌胃苦参素磷脂复合物100 mg·kg^-11后,于不同时间点采血,血浆用甲醇去蛋白,直接进样测定。电泳运行缓冲液：0.04 mol·L^-11 Tris-10 mmol·L^-11磷酸二氢钠溶液-4%异丙醇(pH 7.6),检测波长为205 nm,西米替丁为内标。结果：灌服苦参素和苦参素磷脂复合物的曲线下面积(AUC)分别4.52,6.21 mg·mL^-11·h^-11,复合物的生物利用度提高了1.4倍。结论：苦参素磷脂复合物与苦参素相比亲脂性显著增加,从而增强了苦参素在胃肠道中的吸收,提高了苦参素的口服生物利用度。     

HPLC同时测定苦豆子中槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的含量

目的：建立同时测定苦豆子中槐定碱、氧化槐果碱及氧化苦参碱含量的HPLC测定法。方法：色谱柱为Phenomenex Gemini C₁₈(46 mm×250 mm,5 μm),以甲醇(A)-02%磷酸水(B)为流动相,检测波长205 nm,流速1 mL·min^-1,柱温30 ℃。结果：在线性范围内3个对照品的标准曲线呈良好的线性关系(r≥0999 7)。平均回收率分别为1000%,970%,970%。结论：可通过HPLC同时测定苦豆子中槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材的质量控制。     

氧化苦参碱对心肌损伤大鼠心功能保护作用的研究

目的：观察氧化苦参碱（Oxymatrine，OMT）对异丙基肾上腺素（Isoproterenol，ISO）致大鼠心肌损伤的保护作用。方法：利用皮下注射ISO诱导大鼠心肌损伤模型，观察OMT对心肌损伤大鼠心脏功能的影响，并测定各组大鼠血浆乳酸脱氢酶（LDH）的活力、丙二醛（MDA）的含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）的活性。结果：与正常对照组比较．ISO组大鼠LVESP降低30．8％（P〈0．01）、LVEDP增加145．8％（P〈0．05）、±LVdp／d tmax分别降低37.4％、40．11％（均P〈0．01），且血浆LDH、MDA的含量分别增高45．5％、23．8％（均P〈0．01），SOD、GSH—PX的活力分别下降14．8％、12．4％（P〈0．05）；与ISO组比较，OMT低高剂量治疗组均可明显减轻心内膜下心肌缺血性损伤，并改善心肌损伤大鼠的心功能。结论：氧化苦参碱可通过抑制心肌脂质过氧化、增强抗氧化能力，从而改善心肌损伤大鼠的心功能，对损伤心肌产生保护作用。     

Effects of oxymatrine on the serum levels of T helper cell 1 and 2 cytokines and the expression of the S gene in hepatitis B virus S gene transgenic mice: a study on the anti-hepatitis B virus mechanism of oxymatrine

BACKGROUND: Oxymatrine has been shown to have a remarkable inhibitory activity to hepatitis B virus (HBV) infection with a hepatitis B virus e antigen (HBeAg) serum conversion rate of approximately 45%. In order to explore the anti-HBV mechanism of oxymatrine, the effects of oxymatrine on serum levels of T helper (h)1 cytokines (interferon (IFN)-gamma and interleukin (IL)-2) and Th2 cytokines (IL-4 and IL-10), and the expression of S gene in HBV S gene transgenic mice were studied. METHODS: Each transgenic mouse was either injected with oxymatrine or saline intraperitoneally once a day for 30 days. Serum levels of IFN-gamma, IL-2, IL-4 and IL-10 were quantitated and compared to the data before the treatment. The expression of HBV S gene in transgenic mice was analyzed at the DNA, mRNA and protein levels. RESULTS: The serum levels of IFN-gamma in transgenic mice before or after oxymatrine treatment were 3.108 +/- 3.172 and 11.059 +/- 6.971 pg/mL, respectively. In contrast, serum levels before and after oxymatrine treatment for IL-4 were 29.045 +/- 13.235 and 13.024 +/- 9.002 pg/mL, respectively (P < 0.001). The serum levels of IL-2 in the control (saline injection) and oxymatrine-treated mice were 1.070 +/- 0.447 and 5.537 +/- 2.887 pg/mL, respectively (P < 0.0001); and that of IL-10 were 97.226 +/- 73.306 and 33.607 +/- 23.154 pg/mL, respectively (P < 0.01). No significant differences were observed in the expression of HBV S gene in the transgenic mice at the DNA, mRNA and protein levels before or after oxymatrine treatment. CONCLUSIONS: The fact that Th1 cytokines are increased while Th2 cytokines are decreased suggests that oxymatrine treatment triggers the change of immune response to hepatitis B infection in transgenic mice, which leads to improved HBV inhibitory activities. The study can help us better understand the mechanisms of the anti-HBV drug, oxymatrine, and how it has potential as an application in clinical chronic hepatitis B treatment.     

Effect of oxymatrine on murine fulminant hepatitis and hepatocyte apoptosis

目的　观察氧化苦参碱 (oxymatrine ,OM)对实验性小鼠暴发型肝炎 (fulminanthepatitis,FH)及其早期肝细胞凋亡的保护作用 ,并研究其药理机制。方法　腹腔注射 (ip)脂多糖 (LPS) +氨基半乳糖 (GalN)造成小鼠FH模型。两次实验均设生理盐水对照组、暴发型肝炎组和OM预保护组 (5 0mg/kg ,ip ,bid× 3d)。分别于注射GalN/LPS后 5h、7 5h取血清检测肿瘤坏死因子(TNFα) ,同时在 5h点取肝组织作原位凋亡细胞检测 ,并于电镜下观察凋亡细胞超微结构 ;在 7 5h点取肝组织作HE染色及Fas及其配体 (FasL)的免疫组化检测。结果　与模型组相比 ,OM治疗组 5h、7 5h点TNFα水平明显减低 (P <0 0 5和 0 0 1) ,5h点肝细胞凋亡亦明显减少 (P <0 0 1)。OM组 7 5h点肝组织损伤及Fas、FasL表达程度均较模型组减轻 (P <0 0 1和P <0 0 5 )。结论　OM对GalN/LPS诱导的小鼠FH有保护作用 ,其机制可能为抑制TNFα释放及Fas、FasL表达 ,从而阻断肝细胞凋亡及坏死。     

固相萃取-反相高效液相色谱测定法评价氧化苦参碱的生物等效性

目的:建立一种测定人体血浆中氧化苦参碱浓度的反相高效液相色谱法,并对氧化苦参碱分散片与氧化苦参碱胶囊进行生物等效性评价。方法:待测的人体血样经固相萃取后,将其洗脱液于60℃氮气挥干并用流动相溶解残渣,取20μl进样。色谱条件:色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为0.005mol.L-1庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调pH为3.5)-乙腈=80∶20;流速为1.0ml.min-1;紫外检测波长为220nm。人体药动学试验采用双周期交叉设计方案,将18名男性健康志愿者随机分为2组,分别单剂量口服氧化苦参碱分散片和氧化苦参碱胶囊600mg。结果:本方法线性范围为0.025~1.600mg.L-1,r=0.9999,最低检测浓度为0.025mg.L-1,方法回收率为96.5%~110.2%,日内、日间RSD均小于10%;两种制剂的主要药动学参数经统计学分析无统计学差异。结论:本方法灵敏度高、特异性强、重现性好,两种制剂具有生物等效性。     

氧化苦参碱的理化常数

目的测定氧化苦参碱的溶解度、解离常数(pKa)、油水分配系数(P)等理化常数,指导药物剂型的合理设计。方法按《中华人民共和国药典》中溶解度的测定方法测定氧化苦参碱在不同溶剂中的近似溶解度;采用电位滴定法、分光光度指示剂法测定氧化苦参碱的pKa值;采用摇瓶法测定氧化苦参碱在不同pH下的表观油水分配系数。结果氧化苦参碱在水、0.15 mol.L-1柠檬酸、0.15 mol.L-1碳酸钠溶液、甲醇、氯仿中溶解良好,在质量分数为20%的氢氧化钠溶液、石油醚和乙酸乙酯中溶解度都很低;电位滴定法、分光光度指示剂法测得的氧化苦参碱pKa分别为6.98、6.71;氧化苦参碱表观油水分配系数随着pH值的增加而增加,其真实油水分配系数为0.2。结论氧化苦参碱是一个亲水性很强的弱碱性药物。