灰色链霉菌对芦丁的生物转化及产物的抗氧化活性

目的：研究灰色链霉菌对芦丁的生物转化及其产物对超氧阴离子（O2^-）的清除能力变化。方法：用标准马铃薯培养基培养的灰色链霉菌中加入底物后继续培养4天，发酵液经萃取后采用硅胶柱层析分离纯化，产物的结构根据光谱数据予以鉴定，通过化学发光法测定转化产物对邻苯三酚-鲁米诺-碳酸缓；中液（pH10．2）体系产生的O2^-的清除能力。结果：分离鉴定了6个代谢产物，分别是槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷、异鼠李素、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷和山柰酚，其中4个化合物的抗氧化活性比底物芦丁强。结论：此转化过程涉及到3类反应即糖苷水解、甲基化和去羟基化反应，其中苷类的去羟基化反应为首次发现，本研究表明微生物转化是增加天然化合物多样性的有效方法。     

石淋通颗粒质量标准的研究

OBJECTIVE To establish quality control method for Shilintong Granule.METHODS Thin layer chromatography was used for identification of Herba Desmodii Styracifolii.The content of total flavone(by Rutin computing) in preperation was determined with UV-spectr     

超临界萃取荞麦中芦丁的研究

采用荞麦为实验材料,比较系统的研究了超临界状态下,样品含水量、萃取温度、压力、时间对萃取率影响,确定最佳工艺条件,为批量生产提供依据。     

芦丁—PEG6000固体分散体的制备及其溶解性能研究

目的：研究芦丁－聚乙二醇６０００（ＰＥＧ６０００）共沉淀物的制备和性质,方法：采用溶剂法分别制成三种不同比例的固体分散体,并比较固体分散体,机械混合物和原药的溶解特性。结果：溶剂法可制得不同比例的芦丁－ＰＥＧ６０００固体分解体,１：３、１：６、１：１０共沉淀物样品的溶解率分别为８２６．１、２２０７．８、４３８５．７ｍｇ．１００ｍｌ＾－１。结论：制成的芦丁－ＰＥＧ６０００固体分散体能极显地提高原药的溶解度,溶出速率。     

Anti-Proliferative Effects of Rutin on OLETF Rat Vascular Smooth Muscle Cells Stimulated by Glucose Variability

PurposeProliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs) plays a crucial role in atherosclerosis. Rutin is a major representative of the flavonol subclass of flavonoids and has various pharmacological activities. Currently, data are lacking regarding its effects on VSMC proliferation induced by intermittent hyperglycemia. Here, we demonstrate the effects of rutin on VSMC proliferation and migration according to fluctuating glucose levels.ResultsWe found enhanced proliferation and migration of VSMCs when cells were incubated in intermittent high glucose conditions, compared to normal glucose. These effects were lowered upon rutin treatment. Intermittent treatment with high glucose for 72 h increased the expression of phospho-p44/42 MAPK (extracellular signal regulated kinase 1/2, ERK1/2), phospho-MEK1/2, phospho-PI3K, phospho-NF-κB, phospho-BMK1, and ROS, compared to treatment with normal glucose. These effects were suppressed by rutin. Phospho-p38 MAPK, phospho-Akt, JNK, and apoptotic pathways [B-cell lymphoma (Bcl)-xL, Bcl-2, phospho-Bad, and caspase-3] were not affected by fluctuations in glucose levels.ConclusionFluctuating glucose levels increased proliferation and migration of OLETF rat VSMCs via MAPK (ERK1/2), BMK1, PI3K, and NF-κB pathways. These effects were inhibited by the antioxidant rutin.     

芦丁对1型糖尿病小鼠肝功能及肝组织形态学的影响

目的 探究芦丁对链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病小鼠肝功能及肝脏组织形态的影响。方法 雄性昆明小鼠60只,选出12只作为正常组,余下小鼠腹腔注射STZ,连续给药5 d,建立1型糖尿病小鼠模型。成模小鼠随机划分为模型组与芦丁低、高剂量组。正常组与模型组给予羧甲基纤维素钠溶液, 芦丁低、高剂量组分别按小鼠体质量予芦丁50 mg/kg、100 mg/kg灌胃,给药8周,每日1次。测定给药第4周,第8周小鼠餐后随机血糖,血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的含量。通过HE、Masson染色及透射电镜观察肝组织形态。结果 与正常组比,模型组小鼠血糖上升（P<0.01）,血清中ALT、AST、LDH含量增高,TP、ALB含量降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组比,芦丁组小鼠给药第4周血糖降低（P<0.05）,给药第8周血清ALT、AST、LDH含量下降,TP、ALB含量升高,其中高剂量组作用更明显（P<0.05,P<0.01）。形态学结果显示,模型组肝细胞增大变形,肝索排列紊乱,肝组织纤维化程度较高;芦丁低、高剂量组小鼠肝组织形态有所改善,高剂量组作用更明显。结论 芦丁可改善STZ诱导的1型糖尿病小鼠的肝功能,缓解糖尿病小鼠肝脏组织的损伤程度。     

芸香苷逆转人大肠癌LoVo/5-氟尿嘧啶细胞耐药性及其机制

目的 探讨芸香苷（RT）对大肠癌耐药株LoVo/5-氟尿嘧啶（5-FU）细胞耐药性的影响及其机制。方法 采用浓度梯度递增法建立耐药株LoVo/5-FU细胞;用不同剂量的RT和（或）5-FU处理48 h后,采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,RT-PCR法检测P-糖蛋白（P-gp）和多药耐药相关蛋白1（MRP1）的mRNA表达水平,Western blotting法检测P-gp、MRP1、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、Akt、Survivin、细胞周期蛋白A（cyclin A）和细胞周期素依赖性蛋白激酶2（CDK2）的蛋白表达水平。结果 LoVo/5-FU细胞中P-gp、MRP1和Survivin蛋白表达水平均显著高于LoVo细胞;5-FU和RT对LoVo/-FU细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为21.77 mg/L和98.43 mg/L;在10 mg/L RT作用下,5-FU对LoVo/5-FU细胞的IC₅₀ 降至10.64 mg/L,逆转倍数为2.05;RT可协同增强5-FU引起的LoVo/5-FU细胞凋亡和S期阻滞,抑制P-gp和MRP1基因表达以及Akt磷酸化,下调Survivin、cyclin A和CDK2蛋白水平。结论 RT可通过抑制Akt信号通路以及耐药相关蛋白的表达反转LoVo/5-FU细胞对5-FU的耐药性。     

UPLC-MS/MS法检测复方芦丁片中芦丁的含量

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定复方芦丁片中芦丁含量的方法。方法采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法。色谱柱为ACQUITY UPLC RBEH C 18色谱柱(2.1×100mm,1.7μm),流动相为甲醇-水溶液(42∶58),电喷雾离子化(ESI)正离子模式下选择质荷比(m/z)为301离子进行检测。结果所建方法能快速检测芦丁,在2.5~40.7ng·mL^-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9995),平均加样回收率为99.5%,方法定量限为0.5ng·mL^-1,方法重复性和精密度良好。结论该方法专属性强,快速灵敏,适用于复方芦丁片中芦丁的含量测定。     

柿叶总黄酮在兔体内的药动学研究

目的：建立HPLC法测定兔血浆中柿叶总黄酮主要有效成分芦丁的方法,并用此法对柿叶总黄酮在兔体内的药动学进行研究。方法对6只雄性家兔耳缘静脉注射柿叶总黄酮,于不同时间取静脉血,用甲醇-冰醋酸（9∶1）沉淀蛋白,HPLC法测定芦丁的血药浓度;用3p87软件进行药动学参数计算。结果兔血浆芦丁浓度在0．1332～13．3200μg/ml范围内线性关系良好（r＝0．9991）;高、中、低三种浓度芦丁血浆样品日内平均RSD为7．13％,日间平均RSD为7．64％,平均回收率为（76．21±5．69）％。静脉注射给药后,芦丁在兔体内的药动学符合二室模型,半衰期t1/2（α）为（0．2865±0．0112）h,t1/2（β）为（1．7546±0．4451）h,AUC0→6为（8．0417±0．2169）μg/（h· ml）, AUC0→∞为（8．1286±0．2293）μg/（h· ml）。结论所建方法灵敏、简便快速,专属性强,可满足柿叶总黄酮药动学研究的需要。