HPLC法测定市售贝母中贝母乙素含量

目的：为了选择贝母乙素含量较高的贝母原材料,方法：建立了ＨＰＬＣ法分析贝母原材料中贝母乙素含量,贝母生药粉用氨水－９５％乙醇（１：５）混合液取,柱前用２,４－二硝基苯肼（ＤＮＰＨ）衍生,衍生化条件５０℃下反应３０min。分析色谱柱：ＨyopersilC18ODS2流动相;ＣＨ３ＣＮ－１００mmol/LCH3COONH4,(41:59)pH=5.0),流速为１．２mL/min,UV375nm检测.结果:４种市售贝母东贝母的乙素含量最高,结论;方法灵敏,重现性好,样品用量少,便于应用.     

RP-HPLC同时测定贝母药材中5种核苷类化合物

目的:建立一种同时测定贝母药材中核5种苷类化合物尿苷、腺嘌呤、鸟苷、胸苷、腺苷的高效液相色谱法。方法:采用Welch Materials XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-5 mmol.L-1乙酸铵-乙酸缓冲盐(pH4.30)作为流动相,以1 mL.min-1的流速进行梯度洗脱(洗脱梯度程序为:0~10 min,0%~1%A;10~20 min,1%~5%A;20~25 min,5%A;25~35 min,5%~30%A;35~37 min,30%~0%A;37~40 min,0%A);进样量20μL;检测波长260 nm。结果:在0.24~13.60 mg.L-1,各核苷类化合物的响应峰面积与其相应的浓度呈现良好的线性关系,r0.998 3;各待测物的日内精密度和日间精密度的RSD均小于2.1%;重复性良好(RSD5.5%);回收率范围在93.55%~101.88%,RSD3.0%。结论:不同种贝母药材中核苷类化合物的含量大致顺序为湖北贝母浙贝川贝≈平贝;本方法简便、可靠、准确,可用于贝母药材中核苷类化合物的含量测定,为全面开发利用贝母药材提供进一步依据。     

山东省市售百合饮片质量分析

目的分析市售百合饮片的整体质量及存在的问题。方法从山东省16个地市抽取共51批次百合饮片样品,按2015年版《中国药典》第一增补本百合项下规定进行检验,并进行探索性研究。结果与结论现行百合的检验标准较全面,经探索性研究发现,部分百合饮片存在过度硫熏和重金属(镉)含量较高的问题。     

新疆道地药材伊贝母HPLC-ELSD指纹图谱研究及西贝母碱的含量测定

目的:建立新疆道地药材伊贝母HPLC-ELSD指纹图谱及西贝母碱的含量测定方法。方法:采用HPLC-ELSD法测定了10批伊贝母药材样品。色谱条件:Cosmosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.03%二乙胺溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,进样量20μL;ELSD检测器,漂移管温度67℃;气体流速2.0 L.min-1。结果:建立了不同批次伊贝母的HPLC-ELSD指纹图谱,并进行相似度比较,对伊贝母中西贝母碱进行了含量测定。结论:该方法操作简便、重复性好,建立的伊贝母指纹图谱和西贝母碱的含量测定方法可用于伊贝母的质量控制。     

基于网络药理学研究瓜蒌-薤白药对抗高脂血症作用机制

目的:基于高脂血症大鼠模型和网络药理学技术分析瓜蒌-薤白药对抗高脂血症的作用机制。方法:通过瓜蒌-薤白药对低、中、高剂量(1,2,4 g·kg~(-1)·d~(-1))预防性给药高脂血症大鼠,检测血脂和炎症因子水平。采用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)和文本挖掘筛选瓜蒌-薤白药对活性成分,Swiss Target Prediction,Similarity ensemble approach(SEA),DrugBank数据库筛选与活性成分对应的作用靶点;通过Therapeutic Target Database(TTD),Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM),DrugBank和DisGeNET数据库收集疾病靶点。整合交集活性成分的作用靶点和疾病靶点,并通过拓扑学参数筛选,获得瓜蒌-薤白药对抗高脂血症的主要候选靶点。通过ClueGO进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集,the Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery(DAVID)数据库进行基因本体(GO)功能富集分析。通过Cytoscape构建中药-成分-靶点网络模型、靶点-通路网络模型,并分析其串扰靶点和信号通路。结果:动物实验表明,瓜蒌-薤白药对预防性给药可明显降低高脂血症大鼠血清中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,抑制白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达(P0.05,P0.01)。亚油酸乙酯,香叶木素,α-菠菜甾醇等27个活性成分可能是"瓜蒌-薤白"药对主要药效成分,16个串扰靶点和10条信号通路可能是其主要药效靶点和通路;药对主要靶向载脂蛋白A1(APOA1),载脂蛋白A2(APOA2),载脂蛋白C3(APOC3),脂蛋白脂肪酶(LPL),低密度脂蛋白受体(LDLR)等串扰靶点影响胆固醇代谢、胆汁分泌、过氧化物酶体增殖物激活型受体(PPAR)信号通路调节脂质水平;靶向肿瘤坏死因子(TNF),IL-6,IL-1B,丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1),C-C基序趋化因子2(CCL2)等串扰靶点影响TNF信号通路,Toll样受体信号通路,白细胞介素-17(IL-17)信号通路,缺氧诱导因子(HIF)信号通路调节炎症因子水平。DAVID数据库进行GO富集分析,表明药对主要通过炎症反应、脂质定位、储存和脂质代谢等生物学过程治疗高脂血症。结论:通过这些发现可预测瓜蒌-薤白药对干扰高脂血症的作用机制,为瓜蒌-薤白药对的物质基础和临床应用提供理论基础。     

不同产地浙贝母总生物碱含量测定与比较

目的 建立浙贝母总生物碱含量测定方法,比较不同产区浙贝母总生物碱含量。方法 采用酸性染料比色法测定总生物碱含量,以贝母素甲为对照品,采用紫外分光光度计测定。结果 浙贝母总生物碱在0.059 2~0.295 9 mg·mL^-1内线性关系良好,其回收率(97.74%)、精密度(RSD=2.05%)、重复性(RSD=3.22%)结果良好。对不同产地浙贝母总生物碱含量进行测定结果表明,磐安(0.53%)、缙云(0.52%)、象山(0.52%)产区浙贝母总生物碱含量较高,东阳(0.44%)居中,鄞州(0.41%)、舟山(0.38%)产区浙贝母总生物碱含量则低于其他产区。结论 不同产地浙贝母总生物碱含量存在差异,磐安、缙云、象山产区的含量较高。     

不同炮制方法对浙贝母药材3种生物碱含量的影响

目的：建立一种同时测定浙贝母饮片中贝母素甲、贝母素乙和贝母辛含量的方法,并比较不同产地及炮制方法对其含量的影响。方法：色谱柱（Hypersil C18,250mm×4.6 mm,5μm）,柱温为30℃,流动相为A（乙腈）及B（0.05%三乙胺水溶液）,两相梯度洗脱,流速为1.0mL/min,采用ELSD检测,漂移管温度55℃,载气40psi,增益10。结果：3种成分的峰面积对数值与浓度对数值的线性关系良好(R2≥0.9991) ,贝母素甲、贝母素乙和贝母辛的平均回收率(n=9)分别为100.1%、100.1%、96.9%;不同炮制方法处理的浙贝母商品以无硫护色组生物碱含量最高（0.082~0.24%,平均0.15%）,生晒处理组次之（0.058~0.23%,平均0.13%）,硫熏处理组次之（0.032~0.12%,平均0.092%）,贝壳灰法组含量最低（0.040~0.12%,平均0.072%）。结论：所建立的方法简单、准确、重现性好,可作为评价和控制浙贝母饮片的质量的依据;不同炮制方法对浙贝母药材3种生物碱含量有影响,硫熏和贝壳灰法处理会降低贝母饮片生物碱的含量。     

不同产地野生与栽培伊贝母药材UPLC-ELSD指纹图谱研究

目的 建立伊贝母药材UPLC-ELSD指纹图谱,为有效控制其质量提供可靠的方法。方法 采用UPLC-ELSD方法,色谱柱为Waters Acquity UPLC^TM BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,流动相为乙腈和0.02%三乙胺,梯度洗脱,流速0.25 mL·min^-1,柱温25℃,样品为室温度,ELSD漂移管温度40℃,喷雾器参数40%,增益值500,气体压力30psi。采用国家药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012 A版软件建立共有模式,以2种方法对29批野生与栽培伊贝母药材计算相似度评价图谱的相似性,同时利用聚类分析法分析结果。结果 29批伊贝母药材有16个共有特征峰,建立了UPLC-ELSD指纹图谱共有模式。各批次伊贝母药材相似度都≥0.801。29批野生与栽培伊贝母药材可通过系统聚类分成2~3类,同时定量测定了样品中的西贝母碱苷和西贝母碱。结论 所建立的UPLC-ELSD指纹图谱方法快速,可用于伊贝母药材的质量综合评价。     

中药川贝对哮喘模型小鼠气道重塑及TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的：观察中药川贝对哮喘模型小鼠气道重塑及转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad信号通路的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。方法：BALB/c小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白（OVA）建立小鼠哮喘模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0 mg·kg^-1和9.0 mg·kg^-1剂量给予中药川贝灌胃;阳性对照组雾化吸入0.5 mg·kg^-1地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天 1次,连续28 d。观察各组小鼠支气管管壁厚度和平滑肌厚度的变化以及支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞（EOS）计数的变化;酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测BALF和血清中TGF-β1浓度;蛋白印记分析（Western-blot）检测肺组织TGF-β1、磷酸化Smad2（p-Smad2）、Smad2、磷酸化Smad3（p-Smad3）、Smad3的表达;实时荧光定量PCR（Real Time-PCR）检测肺组织TGF-β1 mRNA、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA的表达。结果：模型组小鼠支气管管壁厚度和平滑肌厚度,BALF中EOS计数,BALF和血清中TGF-β1浓度,肺组织TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3的表达,肺组织TGF-β1 mRNA、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA的表达均明显高于对照组（P<0.01）,高剂量组,低剂量组和阳性对照组上述指标则明显低于模型组（P<0.05或P<0.01）。结论：中药川贝可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

从百合病论治自主神经功能紊乱

百合病和自主神经功能紊乱的临床表现都以主观症状较突出、客观体征不显著、无明显器质性病变为特点,且发病范围广泛,可涉及多个脏腑。二者病因均与久病或精神情志异常有关。研究发现,治疗百合病常用的百合及百合类方与治疗自主神经功能紊乱的B族维生素、谷维素及抗抑郁、抗焦虑药物在功效上具有相似性。因此,临床可通过辨病、辨证将百合病的治疗经验应用到自主神经功能紊乱的治疗中,中西互补,以获良效。