新生大鼠耳蜗柯替器体外培养的初步报告

目的 建立稳定的新生大鼠耳蜗柯替器的培养方法，为内耳的研究提供新的条件和模型。方法采用显微解剖技术完整地分离出新生大鼠整个耳蜗基底膜组织，分别采用组织贴壁法及立体定向法进行培养。结果耳蜗柯替器组织块培养24小时后，组织外周即可见明显新生上皮及成纤维细胞，内、外毛细胞及支持细胞等结构清晰可见；经丫啶橙和碘化丙啶双重荧光染色进行细胞活性鉴定，毛细胞及组织活性良好。结论用组织贴壁法及立体定向法进行耳蜗柯替器体外培养是一种理想的耳科实验造模方法。     

玉竹组培快速繁殖简报

玉竹组培快繁,经筛选:用花瓣作外植体,MS为基本培养基添加不同生长调节剂,在实验室的自然光照和温度条件下,成功诱导出再生植株。本方法简单,成本低,有实用价值。     

培养去原胸腺细胞胸腺小叶理想条件的探讨

目的探讨培养去原胸腺细胞的胸腺组织的理想方法。方法取6个月龄利凡诺引产儿胸腺,分离胸腺小叶,采用气液交界面培养法,培养于含1.35mmol/L 2＇-脱氧鸟苷的培养基,以不含2＇-脱氧鸟苷的培养基培养的胸腺小叶作为对照,分别于0d,3d,5d,7d,9d,10d,14d,21d,28d取培养的胸腺小叶经HE染色观察结果。结果用含2＇-脱氧鸟苷的培养基培养5d后,小叶中胸腺细胞大部分被清除,而对照组在培养的前14d小叶中胸腺细胞数量均无明显减少。在培养21d后实验组和对照组胸腺小叶中胸腺细胞都明显减少,但胸腺间质也出现不同程度坏死,而且随着培养时间的延长,坏死程度亦加重。结论使用含2＇-脱氧鸟苷的培养基培养5d,是制备去原胸腺细胞胸腺小叶的理想条件。     

生物工程技术与药用植物资源保护

随着我国中医药产业的快速发展及世界范围内天然药物的不断发展,国内外对中药资源的需求迅速增加.使我国中药资源的消耗加大,给濒危的药用植物资源带来毁灭性的危险.中药材栽培和野生抚育等手段不能完全解决资源的压力问题,生物工程技术可以在解决中药资源紧缺的问题上发挥作用.采用生物技术中的快速繁殖技术,可以达到快速生产优质种苗的目的.一种方法是通过愈伤组织诱导出种苗的地上部分和根,形成许多小的植物株;另一种方法是利用体细胞胚的途径,由体细胞胚再形成大量的小植株,形成的这些植物株可以用于栽培和野生抚育增加种群数量.利用生物工程技术,在反应器中培养药用植物的细胞、组织或者器官,可以直接快速地获得药用植物的活性成分,节约对原料药材的使用;同时在大规模培养条件下,生产成本可以大大降低.生物工程技术在药用植物资源上的应用,特别是对濒危药用植物资源保护方面的应用,对中国有着特殊的意义,一方面中药资源是整个中医药的基础,另一方面中国是世界上使用和出口药用植物原料最多的国家.     

同种异体软骨修复甲状软骨缺损的实验研究

目的　观察用不同类型的同种异体软骨修复喉软骨缺损的效果。方法　取新西兰白兔16只 ,平均分成两组。在每只兔的双侧甲状软骨切除 6mm× 3mm× 1mm全层软骨。一组动物将RPMI 16 4 0液和甲醛保存 30d的同种异体甲状软骨 (大小为 5mm× 2mm× 1mm)分别植入甲状软骨两侧缺损处 ,另一组动物于甲状软骨两侧缺损处分别植入新鲜的自体和异体软骨。分别于术后 7、30、180及 36 0d时处死取材 ,用大体观察、HE染色及免疫组织化学方法观察移植修复效果。结果经连续 1年观察 ,RPMI 16 4 0液保存的及新鲜的同种异体软骨与自体软骨移植排斥反应轻 ,均能较好修复甲状软骨缺损 ,而甲醛保存软骨早期有明显炎性细胞浸润 ,移植 180d至 36 0d时软骨基质明显吸收 ,软骨细胞退变 ,甲状软骨缺损区为纤维结缔组织修复。结论　RPMI 16 4 0液保存的及新鲜的同种异体软骨都具有活性 ,和自体软骨一样是软骨缺损修复的良好材料 ,可应用于临床     

红大戟的组织培养及植株再生

目的研究红大戟快速繁殖技术,为人工栽培提供种源。方法以野生红大戟的茎尖作外植体,通过不同的培养基进行诱导培养获得丛生芽,进而生根获得再生植株。结果M S BA 2.0 m g/L NAA 0.1 m g/L适合红大戟的丛生芽继代增殖。1/2M S NAA 1.0 m g/L适宜诱导生根获得健全再生植株。移栽成活率70%。结论本研究得出的方法可为人工栽培红大戟提供种源。     

AgNO3在铁皮石斛组织培养中抗衰老作用

目的解决铁皮石斛在组织培养过程中的衰老问题。方法在原球茎增殖培养基、丛芽增殖培养基和生根培养基中分别加入AgNO30、1、2mg/L,测定乙烯的产生量,观察试管苗生长情况。结果AgNO3抑制乙烯的产生,提高了原球茎的增殖速度和丛芽的分化效率,明显促进种苗的生长,提高移栽成活率2倍,表现出抗衰老功能。结论1mg/LAgNO3可以作为铁皮石斛组织培养的抗衰老剂。     

药用植物百部的组织培养与快速繁殖

目的 探讨百部的组培快繁技术，为优良品种的快速繁殖奠定基础。方法 以带侧芽百部茎段为外植，采用MS为基本培养基，附加不同植物生产调节剂进行试验。结果 采用MS 6-BA3.0mg/L IBA0.2mg/L的培养基能成功地诱导芽的分化；对于芽增殖，以MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L培养基较好；诱导生根以MS IBA2.0mg/L AgNO30.5mg/L培养基较好，培养30d后生根率可达50%以上；20mg/L多菌灵处理可明显提高移栽成活率。结论 初步建立了百部的组培快繁体系。使工厂化生产百部种苗成为可能。     

山莨菪碱对TNFα诱导的内皮细胞[Ca2+]i增高的拮抗作用

目的研究山莨菪碱对肿瘤坏死因子(TNFα)诱导的血管内皮细胞胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)变化的影响,以探讨山莨菪碱抗感染性休克的机制.方法人脐静脉内皮细胞株(ECV304)接种于35mm含有2ml DMEM培养基的组织培养盘中培养.Fluo-3/AM荧光探剂负载细胞,激光扫描共聚焦显微技术(LSCM)测定单个内皮细胞[Ca2+]i.结果TNFα 1.2×10-9mol/L能显著诱导单个内皮细胞[Ca2+]i升高[(216±34)%,与基础荧光值比较P<0.01];山莨菪碱2×10-5mol/L或4×10-5mol/L预处理均能显著抑制TNFα诱导的内皮细胞[Ca2+]i升高.结论山莨菪碱抑制TNFα诱导的内皮细胞[Ca2+]i升高可能是其抗休克的重要机制.     

人大肠癌癌旁组织体外培养研究

目的:建立大肠癌癌旁组织体外3-D培养实验平台,观察距瘤体不同距离肠上皮组织体外生长特性。方法:大肠癌手术时,分别从肿瘤近端距瘤体2cm、5cm、10cm的部位取肠上皮组织,运用重复贴壁法进行3-D培养,观察组织生长形态特征、肠隐窝微架构变化特征。结果:组织完全贴壁,上皮粘膜位于"气-液"交界进行培养有利于组织块的存活与成长;培养液中牛血清浓度对组织块生长及肠隐窝结构的维持有很大的影响,牛血清的存在不利于组织的存活,其浓度越高组织生长越受到抑制;血清的存在也很不利于隐窝微架构的存在,血清浓度越高肠隐窝微架构丧失的越快。结论:无血清培养条件下,结肠癌旁近、中、远三个不同部位的组织都可以进行体外培养,但培养过程中,维持隐窝最初离体时的结构还是比较困难,培养3d隐窝结构变化不大,7-21d隐窝结构内细胞会逐渐降解。血清的存在不利于隐窝的结构维持,隐窝结构丧失得更快。