下丘脑室旁核ATP敏感性钾离子通道参与大鼠炎性痛调节的作用研究

目的探讨下丘脑室旁核ATP敏感性钾离子通道(KATP通道)在大鼠炎性痛中的作用。方法♂SD大鼠(250²80 g),采用随机数字法分为5组(每组6只):正常组(Normal组)、完全弗氏佐剂致炎性痛组(CFA组)、生理盐水组(Saline组)、KATP通道特异性激动剂组(Diaoxide组)和激动剂溶媒组(Vehicle组)。以热痛敏刺激仪检测各组大鼠热缩足潜伏期(TWL),观察痛行为学变化;以免疫荧光技术观察室旁核KATP通道和脊髓背角c-Fos阳性细胞数的变化。并观察KATP通道激动剂对大鼠痛行为和脊髓背角c-Fos表达的影响。结果 1与术前和Saline组相比,CFA组大鼠炎症侧后足术后d 1、d 3和d 7的TWL降低(P<0.05),CFA组术后d 3、d 7的KATP阳性细胞数减少(P<0.01),脊髓背角c-Fos阳性细胞数增加(P<0.01);2与Vehicle组相比,激动剂组大鼠热痛觉过敏减轻(P<0.01),脊髓背角c-Fos阳性细胞数减少(P<0.01)。结论下丘脑室旁核KATP通道可能与CFA所致炎性痛的发生机制相关。     

抗抑郁药氟西汀对抗甲醛诱发炎性疼痛的作用

目的 观察抗抑郁药氟西汀的镇痛作用,并探讨其机制.方法 小鼠左后掌心皮下注射6％甲醛溶液10μl制备炎性疼痛模型小鼠；造模前1h给予氟西汀灌胃,观察小鼠疼痛行为的变化,计算疼痛加权评分(PIS).结果 模型组一相PIS=(533.50±54.40)s,与模型组比较,氟西汀(35、70 mg/kg)组PIS值明显下降[(198.28±62.71)s、(141.13±49.90) s];阿片受体阻断剂纳洛酮对此镇痛作用有一定的阻断作用,氟西汀与吗啡联合应用使镇痛效果加强.结论 抗抑郁药物氟西汀对甲醛诱发的炎性疼痛有抑制作用；氟西汀与吗啡联合应用具有协同镇痛效应.     

蛇床子素对髓核致坐骨神经痛大鼠DRG中CGRPR1表达的影响

目的探索硬膜外腔注射蛇床子素对髓核致坐骨神经痛大鼠DRG中CGRPR1表达的影响,以阐明其镇痛机制。方法♂SD大鼠54只,随机分为3组:Blank组(12只)、Sham组(12只)、手术模型组(NP,30只),检测大鼠术前1d,术后1、3、7、14、21 d的50%MWT和TWL。Blank组和Sham组于术后7 d及NP组于术后1、3、7、14、21 d取术侧L5DRG,用Western blot方法检测CGRPR1蛋白相对浓度。另♂SD大鼠72只,随机分为4组(每组18只):NP组,DMSO组,蛇床子素组,CGRP8-37组。手术前后所有大鼠均进行疼痛行为学检测,NP组、DMSO组、蛇床子素组于术后7 d取材,通过Western blot检测CGRPR1蛋白相对浓度。结果NP组在术后各时间点50%MWT和TWL比术前和Sham组明显降低(P<0.05),术侧L5DRG中CGRPR1蛋白表达水平比Sham组明显升高(P<0.05)。与NP组和DMSO组相比,蛇床子素组50%MWT和TWL明显升高(P<0.05),同时术侧L5DRG中CGRPR1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论 CGRPR1表达上调参与介导髓核源性坐骨神经痛,蛇床子素可通过抑制CGRPR1蛋白表达而缓解痛觉过敏。     

p38丝裂原活化蛋白激酶与病理性疼痛

病理性疼痛病理机制复杂,临床常用的药物治疗效果差。p38丝裂原活化蛋白激酶可通过多种方式影响疼痛的形成与维持。动物试验及部分临床研究初步表明,p38MAPK特异性的抑制剂用于治疗病理性疼痛可能具有良好的应用前景。     

电针对CFA致炎性痛大鼠脊髓ATF-2Thr71位点磷酸化的干预研究

目的:观察电针的镇痛效应及其对脊髓背角活化转录因子2(ATF-2)苏氨酸71(Thr71)位点活化的干预作用。方法:实验分为空白对照组(N组)、模型对照组(CFA组)和电针治疗组(EA组)。CFA组和EA组通过足内注射弗氏完全佐剂(CFA)建立大鼠炎性痛模型,EA组于造模后1d选取双侧"足三里"、"昆仑"穴进行电针治疗。分别观察造模前、造模后1、3和14d的足缩腿阈(PWTs),及患侧脊髓背角磷酸化ATF-2(p-ATF-2)(Thr71)阳性细胞数。结果:与N组相比,于造模后各时段,CFA组大鼠PWTs显著降低(P0.05),p-ATF-2(Thr71)阳性细胞数增多(P0.01);造模后3、14d时,EA组大鼠PWTs显著高于同期CFA组(P0.01),而p-ATF-2(Thr71)阳性细胞数则明显少于同期CFA组(P0.05)。结论:电针抗炎性痛作用与抑制脊髓背角ATF-2(Thr71)的磷酸化密切相关。     

钙调神经磷酸酶在弗氏佐剂致大鼠炎性痛中的作用

目的探讨钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)在弗氏佐剂致大鼠炎性痛痛觉过敏中的作用。方法选择雄性SD大鼠75只,体重200~300g,将其随机均分为对照组(C组)、完全弗氏佐剂(CFA)组(F组)和CaN+CFA组(NF组)。C组大鼠右侧后爪趾底注射生理盐水100μl,F组和NF组大鼠右侧后爪趾底注射CFA 100μl制备炎性痛模型,NF组大鼠于右侧后爪趾底注射CFA前1d鞘内注射CaN 10 U。三组大鼠于右侧后爪趾底注射前30 min(T0)、注射后0.5h(T_1)、1h(T_2)、2h(T_3)及4h(T_4)测定大鼠热刺激缩足潜伏期(PWTL);同时各取5只大鼠脊髓组织,Western blot法测定各组大鼠脊髓中CaN、核因子κB(NF-κB)p65蛋白含量;RT-PCR法测定大鼠脊髓中CaN及NF-κB基因的表达。ELISA法测定大鼠脊髓组织中IL-1β、TNF-α和IL-10浓度。结果T_2~T_4时F组,T_3、T_4时NF组PWTL明显短于T0时和C组(P0.05);T_2~T_4时NF组PWTL明显长于F组(P0.05)。T_1~T_4时F组,T_2~T_4时NF组脊髓组织CaN蛋白含量明显低于,NF-κB p65蛋白明显高于T0时和C组(P0.05);T_2~T_4时F组、NF组脊髓组织CaN基因表达、IL-10浓度明显低于,NF-κB基因表达及IL-1β、TNF-α浓度明显高于T0时和C组(P0.05);T_1~T_4时NF组脊髓组织CaN蛋白含量和基因表达明显高于,NF-κB p65蛋白含量和基因表达及IL-1β、TNF-α明显低于,IL-10浓度明显高于F组(P0.05)。结论 CaN通过抑制NF-κB,调节抗炎细胞因子和促炎细胞因子的平衡,抑制大鼠炎性痛的发生发展。     

福尔马林所致炎性痛后脑内三种COX亚型的变化及不同选择性COX抑制剂的镇痛效应比较

目的:比较炎性痛后三种环氧合酶(cyclooxygenase,COX)亚型的表达变化,以及选择性COX抑制剂不同应用方式对炎性痛的镇痛效应。方法:小鼠足底注射福尔马林诱导炎性痛。用放射免疫分析及RTPCR分别评估脑COX1、COX2及COX3在福尔马林注射前、注射后1、12h、1、3、7、14、30、60d的变化。在镇痛效应的比较中,动物被分成5组:对照组、SC组、NS组、IN组及NS SC组。前4组分别灌胃生理盐水、SC560、NS398和indomethacin。NS SC组在前一个月接受NS398,后一个月接受SC560。测定各组动物在福尔马林注射前、注射后1、12h、1、3、7、14、30、60d的热痛阈。结果:COX2的表达在炎性痛后12h到3d升高显著,而COX1的表达在2周到2月升高显著。在整个观察时限内COX3的表达无明显变化。与其他组相比,NS SC组动物的热痛阈在整个炎性痛过程中均明显提高。结论:炎性痛后早期COX2升高而晚期COX1升高。COX3变化不明显。COX1抑制剂和COX2抑制剂的结合使用比单纯使用其中一种能取得更好的镇痛效果。     

丹参酮ⅡA通过抑制脊髓HMGB1表达缓解炎性痛大鼠痛觉过敏的研究

目的:探讨丹参酮ⅡA (TSN ⅡA)对完全弗氏佐剂(CFA)引起的炎性痛大鼠机械性痛敏的影响及其作用机制。方法:雄性Wistar大鼠完全随机数字法分为4组(n=6只):正常对照组(Control)、TSA ⅡA处理组(TSA ⅡA)、炎性痛组(CFA)、炎性痛+TSA ⅡA处理组(CFA+TSA ⅡA)。利用CFA注射大鼠左下肢足底制作炎性痛大鼠模型,各组大鼠分别用腹腔注射法给予20 mg/kg TSN ⅡA或等量生理盐水,利用von Frey丝检测各组大鼠的痛行为学变化,利用Western Blot检测各组大鼠脊髓Toll样受体4(TLR4)和高迁移率蛋白-1(HMGB1)蛋白表达变化,利用Real-time RT-PCR检测TNF-α、IL-1β和IL-6等分子m RNA表达变化。结果:CFA可诱发大鼠出现明显的痛敏反应,TSN ⅡA可以显著地缓解炎性痛大鼠机械性痛敏; CFA引起的炎性痛大鼠脊髓TLR4、HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6等分子表达增加,而TSN ⅡA可以显著逆转上述分子的表达上调。结论:TSN ⅡA可通过抑制HMGB1-TLR4通路缓解CFA引起的大鼠炎性痛。     

大蒜素通过抗氧化应激缓解小鼠炎性痛的机制研究

目的探讨大蒜素抗炎性痛作用及抗氧化应激机制。方法采用冰醋酸致小鼠扭体、小鼠足底注射甲醛致痛、二甲苯致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶致小鼠足趾肿胀等实验,观察不同剂量大蒜素的抗炎性痛效应;采用生化法检测角叉菜胶致小鼠足趾肿胀组织SOD、MDA、GSH-Px及T-AOC含量变化。计量资料比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果与阴性对照组比较,大蒜素20 mg/kg组及40 mg/kg组小鼠扭体次数和累计舔足时间均降低;大蒜素40mg/kg组小鼠耳廓肿胀度和小鼠足趾肿胀度均低于阴性对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,大蒜素40 mg/kg组小鼠足趾肿胀组织SOD、GSH-Px、T-AOC含量增加,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论大蒜素对小鼠炎性痛有一定的缓解作用,其机制与抗氧化应激作用有关。     

外周肥大细胞参与炎性大鼠痛觉过敏的机制

目的研究完全弗氏佐剂（CFA）所致炎性痛大鼠模型中炎症局部肥大细胞（MCs）的表达,探讨MCs在炎性痛中的可能作用机制。方法SD大鼠70只,随机分为A、B、C、D4组（n=8、8、27、27）,于右后肢踝关节外侧皮下分别注射0.9%生理盐水（A、C组）或0.1%CFA（B、D组）50μl。A、B组用热敏测痛法测定注射生理盐水或CFA前及注射后1、4、12h及1、3、7、9、14d时大鼠热缩足反射潜伏期（TWL）;C、D组在上述时间点取注射局部组织用甲苯胺蓝法染色MCs并观察MCs的数目和形态学变化。结果（1）B组TWL在4h时与A组相比,显著降低,差异有高度统计学意义（P〈0.01）,12h时为最低点,TWL下降62%,持续3d后逐渐恢复,14d时基本恢复至基础水平（P〉0.05）。（2）与C组相比,D组MCs总数在1h时显著上升,在7d时最多,14d时仍显著高于C组同时点,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）;脱颗粒MCs数在1h时明显增多（P〈0.01）,12h时达到高峰,1d后渐降,14d时基本正常（P〉0.05）;镜下见D组MCs胞体增大,细胞多呈不规则状。结论CFA能诱导大鼠产生为期2周的炎性痛,MCs通过聚集和脱颗粒启动并参与炎性痛觉过敏的发生和维持。