化学物对毛发毒性的体外评价方法

目的本研究通过建立大鼠毛囊体外游离培养方法,探讨体外毛囊培养方法作为化学物毛发毒性损害评价系统的可行性,建立快速、简便的化学物对毛发毒性评价方法。方法本研究选用SD大鼠背部皮肤毛囊和触须毛囊,在Williams’E无血清培养基中进行体外游离培养,经过研究比较和统计分析,确定不同部位毛囊的选择、不同生长阶段的毛囊选取、观察时间、评价指标和样本量等要素,建立毛发毒性体外评价系统。在此基础上,以来氟米特、阿糖胞苷、米诺地尔、神经生长因子、表皮生长因子、环孢素A为受试物对该评价系统进行测试。结果通过研究比较和分析,评价系统选用出生后8~12d的SD大鼠背部皮肤毛囊为研究材料,以毛囊培养前4天为观察时间,以每日生长长度和4d净增长度为评价指标,以15枚毛囊为每组样本量。结果来氟米特平均4d净增长长度分别为(0.839±0.111)、(0.683±0.102)、(0.412±0.073)mm,与对照组比较,除2.5μg/ml组外差异均有统计学意义(P<0.05),25和50μg/ml则完全抑制毛发生长,未见毛发生长现象。阿糖胞苷平均4d净增长长度分别为(0.719±0.127)、(0.588±0.109)和(0.413±0.141)mm,与对照组比较,4d平均净增长长度差异都有统计学意义(P<0.05),而且25、50和75μg/ml3组之间,差异也都具有统计学意义(P<0.05)。对已知可促进毛发生长的受试物米诺地尔(Minoxidil)、环孢素A(cyclosporin A,CsA)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)进行观察。结果发现,米诺地尔在浓度为70、140和280μg/ml的对体外培养的毛囊具有促进生长的作用,毛囊4d平均净增长长度与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),在560μg/ml时毛囊4d平均净增长长度为(0.458±0.136)mm,对毛囊具有抑制生长的作用。其他受试物环孢素A(120μg/L)、神经生长因子(100μg/L)、表皮生长因子(20μg/L)均有促进毛发生长的作用,4d平均净增长长度与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论采用SD大鼠背部皮肤毛囊体外培养建立研究化学物对毛发毒性的评价系统是可行的。该系统简单易行,针对性强,周期短,取材方便,指标客观量化,经过进一步完善和验证有望成为一个化学物对毛发生长毒性和药理作用的评价方法。     

Epo多克隆抗体对抗Epo活性的研究

促红细胞生成素(Erythropoieti Epo)是促进骨髓红系祖细胞生长、增殖、分化和成熟的主要刺激因子,在高原红细胞增多症(HAPC)发病机理中起关键性作用。本文采用Epo多克隆抗体作为Epo拮抗剂,观察其抑制红系增殖、分化和成熟的作用,为临床应用Epo抗体治疗高原红细胞增多症提供理论依据。作者随机选取高原红细胞增多症患者8例,对其均进行临床检查及血液化验,于髂骨抽取骨髓,分离单个核细胞,在高原现场(海拔3680m)做以下条件骨髓培养:空白对照培养(既不加Epo,亦不加Epo抗体);加Epo常规培养(加Epo,但不加Epo抗体);加Epo抗体实验培养(既加Ep…     

用氮源调控的FLD1启动子开发在毕赤酵母中生产外源蛋白的高细胞密度流加补料培养技术

构建了一株可在P．pastoris甲醛脱氢酶1基因的启动子（PFLD）转录控制下，表达稻根霉脂肪酶基因的毕赤酵母重组菌，以研究该表达系统可否用于无需甲醇诱导的高细胞密度流加补料培养技术生产重组蛋白。使用PFLD系统开发了简单可靠的流加补料技术，在诱导期分别用甲胺和山梨醇作为氮源和碳源。在3种恒定生长速率下分别进行3项流加补料发酵试验，     

人体细胞体外转化研究进展(综述)

在癌变原理研究的实验系统中最经典的是动物诱癌模型,但是试验周期长,人力物力花费大,而且对细胞癌变过程中发生的复杂生物学现象难以进行直观的分析。嗣后,发展了哺乳动物细胞体外转化系统。由于动物试验和动物细胞体外转化获得的结论只具有相对参考价值,不可轻易地外推到人癌的发生情况,因此,采用人     

奇异变形杆菌引起慢性肠炎一例报告

患者：×××、女、49岁，由88年7月吃香蕉后引起腹泻，大便呈糊状，并伴有腹痛，每天大便次数为2-4次，特续一个多月，临床诊断为慢性肠炎，曾用过痢特灵、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素治疗；效果不佳。后要求作大便培养及药敏试验。经分离培养，鉴定为奇异变形杆菌。通过药敏试验，提示丁胺卡那霉素敏感、使用该药三天后，病人腹泻仃止，大便恢复正常。     

推按运经仪治疗输尿管石街11例报告

本院自2000年1月至2003年1月运用体外液电冲击波碎石治疗泌尿系结石400例，其中11例因结石大于2．5cm，碎石治疗后在输尿管形成石街，以至肾积水及肾功能损害，经中西排石药物治疗2周后，效果欠佳，后采用推按运经仪进行排石治疗，效果良好，现报告如下：     

体外不同培养条件对脑动静脉畸形血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖和迁移与脑动静脉畸形(CAVM)的栓塞、放射治疗后的病理变化过程密切相关。我们研究了碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及重组骨桥蛋白(rhOPN)对体外培养的CAVM的VSMC增殖和迁移的影响。     

组织工程血管管状支架的制备与动态培养在血管组织工程中的应用

目的探索体外构建组织工程血管及细胞种植的方法。方法(1)制备管状支架模具,采用模具成形,冷冻干燥等技术,应用胶原和透明质酸复合体外预构管状支架;(2)分动态种植和静态培养两组进行细胞分层种植,每组12个,应用水溶性磺酸四唑(WST-1)测定,扫描电镜观察,5-溴2-脱氧嘧啶核苷(BrdU)细胞标记鉴定比较两种方法的细胞生长情况。结果(1)成功制备了管状支架,在培养液中约3周可保持管腔形态不变形,不塌陷;2.WST-1测定值在培养6、14、20 d分别为:动态组0.842±0.110、1.124±0.102、1.132±0.112,静态组0.386±0.121、0.489±0.245、0.499±0.265,两组比较差异有统计学意义,电镜和BrdU标记表明动态组细胞排列整齐有序。结论应用模具成形,冷冻干燥技术预构管状支架的方法切实可行,动态培养有助于细胞种植,本研究为组织工程血管的构建方法提供了思路。     

阴道粘膜上皮细胞的分离培养和鉴定

目的 初步建立阴道粘膜上皮细胞体外培养方法,为阴道粘膜上皮研究提供实验模型.方法 取雌性新西兰大白兔阴道粘膜组织小块,胶原酶Ⅳ和胰蛋白酶联合消化分离法收集上皮细胞,接种于角朊细胞无血清培养液中静置培养、传代.动态观察细胞生长增殖情况,扫描和透射电镜观察超微结构,流式细胞仪测定细胞增殖周期,并进行免疫组织化学鉴定.结果 体外培养的阴道粘膜上皮细胞为二倍体细胞,增殖状态良好,细胞间可见桥粒连接,免疫组化角蛋白染色阳性.细胞的超微结构和免疫组化染色均具有上皮细胞特征.结论 在本实验条件下,体外培养的阴道粘膜上皮细胞具有较好的增殖能力,可作为阴道粘膜上皮研究的理想实验模型.     

国产和日本产柱晶白霉素与其它常用抗生素的体外抗菌活性比较

用试管双倍稀释法测定国产与日本产柱晶白霉素对104株革蓝氏阳性球菌的体外抗菌活性并与9种常用抗生素进行比较。结果表明:国产和日本产柱晶白霉素对革蓝氏阳性球菌的抑菌率基本一致。国产柱晶白霉素的抑菌、杀菌作用强于红霉素;略优于氯霉素和四环素;与青霉素G、庆大霉素基本相似,但不及氨苄青霉素、苯唑青霉素、丁胺卡那霉素及强力霉素。