国产和进口荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的比对分析

目的分析国产和进口实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)试剂检测乙型肝炎病毒(HBV)-DNA的相关性,探讨国产和进口试剂在临床应用中的差异。方法使用国产和进口试剂平行检测262例乙型肝炎(乙肝)患者血浆当中的HBV-DNA水平,国产试剂采用手工提取标本,罗氏LightCycler480Ⅱ(LC480Ⅱ)进行核酸扩增;进口试剂则采用罗氏COBAS AmpliPrep(CAP)和COBAS Taqman48(CTM)进行标本提取和扩增;对HBV-DNA病毒载量数据进行对数转换(log10),并将两组数据进行相关分析。结果国产和进口试剂检测结果,经线性拟合,R2=0.814 3。HBV-DNA浓度在10~103 IU/mL的标本,R2=0.300 6;浓度在104~105 IU/mL的标本,R2=0.411 8;浓度在106~108 IU/mL的标本,R2=0.801 7。进口试剂阳性检出率为75.57%(198/262),明显高于国产试剂阳性检出率[65.65%(172/262)]。结论国产试剂和进口试剂相比,相关性良好。HBV-DNA浓度在106~108IU/mL时,相关性最高;浓度在104~105 IU/mL时,相关性一般;浓度在10~103 IU/mL时相关性较差,国产试剂与进口试剂有明显差异,灵敏度有待进一步提高。     

免疫分型在单株丙球蛋白血症中的应用评估

目的探讨免疫分型、血清免疫球蛋白的定量检测在单株丙球蛋白血症诊断中的价值。方法收集118例单株丙球蛋白血症患者进行血清蛋白电泳(SPE)、免疫固定电泳(IF)、免疫球蛋白(Ig)定量及血清轻链(κ、λ)检测。针对免疫分型阳性、Ig定量阴性患者进行分析。结果免疫分型阳性、Ig定量阴性患者56例,其中游离轻链型6例(κ轻链型2例,λ轻链型4例),未分泌型1例;免疫分型阳性、Ig定量阳性的患者62例。结论 IF技术对单株丙球蛋白血症的诊断及分型具有重要意义,可以结合血清Ig及轻链的定量检测等其他实验室诊断。     

计算机辅助定量评价肌肉急性挫伤后高频超声二维图像纹理特征变化

目的 采用超声回波强度界面多级分解法定量评价急性钝挫伤后人体肌肉高频超声二维图像纹理特征的变化,初步探讨其临床应用价值。方法 采用高频超声检测10例男性上臂肌肉单纯急性挫伤患者的局部肌肉二维超声图像,于脱机状态下通过Matlab 7.0软件选取患者同一图像上的肌纹理正常感兴趣区（ROI）和肌纹理疑似损伤ROI,提取两个ROI的纹理灰度值的均值（Mean）、灰度值的标准差（SDev）、纹理的密致性（NOB）、纹理基元形状的不规则度（IRGL）、纹理基元的平均大小（SOB）、纹理分布的均匀性（HOD）、纹理分布的方向性（DOD）和纹理分布的周期性（POD）8个特征参数,采用超声回波强度界面多级分解法自动计算两个ROI之间8个纹理特征的相似度差值。选取10名男性健康志愿者同部位正常肌肉二维超声图像作为对照,任意选取两个ROI,计算两个ROI之间上述8种纹理特征的相似度差值。对上臂肌肉挫伤患者和健康志愿者8个纹理特征的相似度差值进行对比分析。结果 急性上臂肌肉挫伤区局部肌束回声增强,肌纤维层次紊乱,纹理模糊,回声变化较周边肌纹理正常区显著。急性上臂肌肉挫伤患者肌纹理疑似损伤ROI和肌纹理正常ROI之间IRGL、DOD、POD、Mean和SDev等5个纹理特征相似度差值与健康志愿者任意两个ROI之间该5个纹理特征相似度差值差异有统计学意义（P均<0.01）。结论 基于超声回波强度界面多级分解法的计算机辅助定量评价技术能够对急性挫伤后肌肉高频超声二维图像纹理特征变化做出较人眼识别更精细的量化诊断,可能具备一定的临床实用价值。     

不同方法检测HBeAg低值血清的效果评价

目的 通过检测HBeAg低值血清,评价ELISA方法和时间分辨免疫荧光法（IrMA）的检测效果.方法 对2014年1月至6月我院HBeAg阳性结果进行回顾性分析,同时收集门诊和住院受检人群化学发光法（CMIA）检测HBeAg结果为1.00～29.99 S/CO区间内的低值血清样本81份,采用ELISA和IFMA法进行复孔检测.结果 HBsAg阳性人群的HBeAg检测结果与HBsAg呈正相关（r=0.680,P＜0.01）.HBeAg阳性样本占HBsAg阳性样本的32.69％,HBeAg低值样本占HBeAg阳性样本的39.35％,均主要分布于青中年人群.HBeAg阳性率随HBsAg阳性人群的年龄增高而降低（x2=386.041,P＜0.01）.ELISA和IFMA法检测HBeAg低值样本的阳性率分别为60.49％和45.68％,两者比较差异无统计学意义（x2=3.569,P＞0.05）.两种方法在检测1.00～4.99S/CO、5.00～29.99 S/CO水平的阳性率分别为25.64％、92.86％（ELISA）和10.26％、78.57％（IFMA）.相关性分析中,ELISA和IFMA法检测HBeAg低值样本的结果与CMIA方法检测结果均呈明显正相关（r=0.868和0.858,P＜0.01）.结论 由于方法灵敏度方面的原因,ELISA和IFMA法在检测HBeAg低值样本时存在较高比例的漏检情况,因此上述两种方法不适用于检测HBeAg低值样本以评估受检者感染HBV的疾病状况.     

高效液相色谱法分析微生物代谢物埃博霉素B的含量

目的建立检测黏细菌纤维堆囊菌发酵液中代谢物埃博霉素B(EpoB)含量的方法。方法用高效液相色谱法测定EpoB的含量,色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1.0 mL/min,进样量为3μL,检测波长为247 nm。结果平均回收率为99.55%,RSD为1.94%(n=9),精密度试验表明,日内RSD为0.94%(n=5),日间RSD为1.98%(n=5),EpoB在0.625~10 mg/mL浓度范围内呈线性关系。最低检测限为1.25μg/mL。结论此法可以用于检测代谢产物的含量,具有良好的准确度和精密度。     

双抗体夹心ELISA定量检测血清Cap43蛋白方法的建立与评价

目的建立定量检测血清Cap43蛋白表达双抗体夹心ELISA法。并初步探讨血清Cap43蛋白表达水平在肺癌患者与正常人群间有无差异，以及该蛋白表达水平的高低与肺癌组织学分型间的关系。方法建立双抗体夹心ELISA方法对肺癌患者与正常人群血清中Cap43蛋白的含量进行定量检测。结果双抗夹心ELISA包被Ⅰ抗羊抗人NDRGl多克隆抗体（PcAb）、Ⅰ抗兔抗人Cap43PcAb以及辣根酶（HRP）标记的羊抗兔Ⅱ抗的最佳工作浓度分别为1：750，1：1200，1：350，标准蛋白曲线的回归方程为：y=0．53566＋0．00046x，R2=0．9939，P〈0．0001。应用该方法初步检测结果显示：肺癌组血清标本Cap43蛋白含量明显高于正常对照组（P〈0．01），且肺腺癌组病人血清Cap43含量高于肺鳞癌组（P〈0．01）。该方法的敏感度（SE）为84．51％，特异度（SP）为35．00％。结论建立了一种敏感度高，重复性好的定量检测血清中Cap43蛋白的双抗体夹心ELISA方法；Cap43蛋白在肺癌患者血清中呈现高表达，且在肺腺癌组病人血清中表达水平高于肺鳞癌组。     

贝类中诺如病毒ELISA与荧光定量PCR检测技术的研究

目的:贝类中诺如病毒是世界范围内急性非细菌性流行性胃肠炎的重要病原。目前我国沿海地区也暴发了诺如病毒,为了更准确的检测,本文寻找和建立了贝类产品中诺如病毒的快速检测方法。方法:用荧光定量PCR和ELISA法对大连地区的贝类样品进行检测。结果:大连地区的贝类样品未检测出诺如病毒。结论:通过实验证明荧光定量PCR法和ELISA法都可用于快速检测诺如病毒,但ELISA法更适于检测诺如病毒含量低的样品。     

复方金银花冲剂的质量分析

采用薄层层析、薄层色谱法对复方金银花冲剂中的主药金银花、连翘进行了定性定量分析。检测方法较简便、专属性强，可作为该冲剂的质量控制指标。     

含大黄的中成药中蒽醌类化合物的多组分定性定量研究

本文采用反相－ＨＰＬＣ方法对含大黄的中成药之四种不同剂型（丸、片、汤和洗剂）共九个样品进行大黄蒽醌类化合物的多组分定性定量分析。结果表明，在本文所用的样品制备方法和色谱实验条件下，２０ｍｉｎ左右即能完成一次色谱分析，大黄中的五个蒽醌甙元均能获得满意的定性定量，方法简便易行，相对标准误和加样回收率均较好。