芹菜素诱导肺癌A549细胞凋亡及其机制研究

目的 研究芹菜素诱导肺癌A549细胞凋亡效应及其机制。方法 常规培养肺癌A549细胞,分别用10、20、40、80 μmol/L芹菜素作用于A549细胞;MTT法检测A549细胞增殖率;Western blotting检测聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）、Bcl-2的蛋白表达水平;RT-PCR检测bcl-2 mRNA的表达;Annexin V/PI双染法检测A549细胞凋亡率。结果 随着芹菜素浓度的增高,A549细胞的增殖抑制率明显增高,具有统计学意义（P＜0.05）;Western blotting显示PARP的剪切带逐渐增加,Bcl-2表达呈减少趋势;RT-PCR结果显示bcl-2 mRNA转录减少;0、10、20、40、80 μmol/L芹菜素对A549细胞凋亡率分别为（2.41±0.072）%、（10.56±0.054）%、（15.32±0.071）%、（28.98±0.012）%、（78.24±0.064）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 芹菜素通过抑制Bcl-2的表达有效地诱导肺癌A549细胞凋亡。     

芹菜素对雌性大鼠卵巢颗粒细胞凋亡影响

目的 探讨芹菜素(apigenin,Api)对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.方法 选情前期成年雌性SD大鼠20只,取卵巢颗粒细胞进行原代细菌培养,贴壁后随机分为4组(对照组、Api 10-4M组、Api 10-5M组、Api 10-6M组),加入处理因素.培养结束后,收集各组培养卵巢颗粒细胞,经苏木精-伊红染色和吖啶橙染色观察颗粒细胞形态,经MTT法及流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡率,观察Api对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.结果 MTT法检测对照组,Api 10-4M组、Api 10-5M组、Api 10-6M组A值分别为(0.87±0.059)、(0.29±0.057)(0.49±0.03)、(0.63±0.035);实验组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),提示实验组颗粒细胞数量减少,出现凋亡细胞;流式细胞仪检测对月强组、Api 10-4M组、Api 10-5M组、Api 10-6M组的颗粒细胞凋亡率分别为(3.63±0.37)%、(36.37±2.28)%、(34.67±1.96)%、(30.92±1.65)%,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),提示实验组颗粒细胞凋亡率明显增高.结论 Api能抑制卵巢颗粒细胞的增殖,并促进其凋亡.     

芹菜素对雌性大鼠下丘脑-腺垂体-卵巢轴调控作用

目的研究芹菜素(apigenin,Api)对雌性大鼠腺垂体、卵巢颗粒细胞分泌促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinzing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)及孕酮(progesterone,P)的影响。方法应用细胞培养技术,放射免疫测定法及下丘脑-腺垂体-卵巢三级培养细胞顺序灌注法。采用下列顺序灌注法,Api浓度分别为10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L,(1)H-AP-O;(2)H-AP(Api)-O;(3)H-AP-O(Api),分别测定腺垂体和卵巢颗粒细胞培养液中FSH、LH、H2及P的含量。结果实验组(3、5、7组)分别与对照组(1组)比较差异有统计学意义(P<0.01),Api(10-4mol/L～10-6mol/L)以浓度依赖方式使培养的雌性动情前期大鼠卵巢颗粒细胞E2及P的含量也呈减少,且随着浓度的增加,E2及P的含量也呈减少趋势;Api组(10-4mol/L～10-6mol/L)动情前期雌性大鼠腺垂体细胞LH、FSH的分泌量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Api...     

光叶决明中1个新的二聚苯丙素类化合物

目的对决明属植物光叶决明Cassia floribunda茎叶的化学成分进行研究。方法运用硅胶、MCI、RP-18、TLC、HPLC等多种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从光叶决明90%乙醇提取物中分离得到18个化合物,分别鉴定为决明顺反二聚苯丙素(1)、反式对羟基肉桂酸乙酯(2)、shonanin(3)、邻苯二甲酸二丁酯(4)、1,6,8-三羟基-3-甲基蒽醌(5)、2,5-二甲基-7-羟基-色原酮(6)、2-(2′-羟丙基)-5-甲基-7-羟基色酮(7)、4′,7-二羟基-5-甲氧基黄酮(8)、柯伊利素(9)、山柰酚(10)、芹菜素(11)、3-甲氧基槲皮素(12)、6-demethoxycapillarisin(13)、7,4′-二羟基黄酮(14)、木犀草素(15)、butin(16)、甘草素(17)和圣草酚(18)。结论化合物1为新的苯丙素类化合物;化合物2～18均为首次从该植物中分离得到,其中,化合物2～4、8、9、11、13、14、16～18为首次从决明属植物中分离得到。     

高效液相色谱波长切换法同时测定筋骨草中5种成分含量

目的建立同时测定筋骨草中哈巴苷、乙酰哈巴苷、芹菜素、木犀草素和杯苋甾酮含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为202 nm(哈巴苷、乙酰哈巴苷)和245 nm(杯苋甾酮、木犀草素、芹菜素),柱温为30℃,进样量为10μL。结果精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于4.7%;哈巴苷、乙酰哈巴苷、杯苋甾酮、木犀草素和芹菜素质量浓度分别在33.44~1 672.00μg/m L、18.248 0~912.40μg/m L、5.377 6~268.88μg/m L、1.728 0~86.40μg/m L、1.507 2~75.36μg/m L范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为99.06%,98.89%,98.97%,99.61%,97.15%,RSD分别为0.56%,0.41%,0.77%,1.23%,1.08%(n=6)。结论该方法高效、简便、稳定性、重复性好,可用于同时测定筋骨草中的5种成分。     

芹菜素对子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的　研究芹菜素对子宫内膜癌细胞HEC-1-B增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响及其作用机制。方法　取对数生长期的HEC-1-B细胞,加入0、20、40和80 μmol/L的芹菜素,采用CCK-8法检测培养24、48和72 h后细胞的光密度,计算增殖抑制率。流式细胞术检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力变化。Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）和磷酸化AKT（p-AKT）的表达水平。结果　20~80 μmol/L范围内,随着芹菜素干预浓度的升高,HEC-1-B细胞的增殖明显受到抑制,细胞凋亡率升高,同时促凋亡蛋白Bax表达增高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降。0、5、10和20 μmol/L范围内,随着芹菜素干预浓度的升高,HEC-1-B细胞侵袭和迁移能力下降。Western blot结果显示,40 μmol/L芹菜素能够下调PI3K/AKT通路蛋白p-PI3K和p-AKT的表达。结论　芹菜素能够抑制HEC-1-B细胞增殖、侵袭、迁移并促进其凋亡,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。     

芹菜素逆转肺癌A549/DDP细胞耐药及机制

目的：研究芹菜素对肺癌A549/DDP细胞的作用,探讨芹菜素逆转肺癌耐药的作用及机制。方法：体外培养肿瘤细胞,以不同浓度芹菜素作用为实验组,用MTT法检测A549/DDP细胞增殖和分析药物敏感性,用Rhodamine-123潴留实验检测A549/DDP细胞内药物外排情况,用Western blot法检测肿瘤细胞内P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp)和肺耐药蛋白(lung resistance-related protein,LRP)表达情况,用RT-PCR法检测肿瘤细胞内多药耐药基因（multidrug resistance gene l,MDR1）mRNA和LRP mRNA的转录情况。结果：与DDP组相比,20、40、80 μmol/L的芹菜素明显抑制了A549/DDP细胞生长增殖（P＜0.05）。DDP对A549/DDP细胞的IC50为(14.33±0.41) μg/mL,在芹菜素作用下其IC50降为(5.76±0.36) μg/mL,逆转倍数为2.48,两者相比有统计学差异（P＜0.05）。芹菜素作用下,A549/DDP细胞内的Rhodamine-123蓄积增加,细胞内P-gp表达减弱,MDR1 mRNA转录水平下降,对LRP表达及LRP mRNA转录无明显改变。结论：芹菜素对A549/DDP细胞生长有抑制作用;芹菜素还具有逆转A549/DDP细胞肿瘤耐药的功能,其机制与降低MDR1 mRNA转录和下调P-gp介导的药物外转功能有关。     

HPLC同时测定小蓟配方颗粒中蒙花苷和芹菜素的含量

目的 建立HPLC同时测定小蓟配方颗粒中蒙花苷和芹菜素含量的方法。方法 采用Diamonsil-C₁₈（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-1%冰醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速：1.0 ml·min^-1,检测波长：335 nm,柱温：30℃。结果 蒙花苷和芹菜素进样量分别在0.3~1.5 μg（r=0.999 4）和0.075~0.375 μg（r=0.999 7）内与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率分别为99.19%和99.12%,RSD分别为1.27%和1.26%。结论 该方法操作简便,重复性好,可用于小蓟配方颗粒中蒙花苷和芹菜素的含量测定。