不同产地裸体方格星虫脂肪酸类成分资源化学评价研究

目的 对裸体方格星虫样品中脂肪酸类成分进行比较研究。方法 采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对12个裸体方格星虫样品中的26种脂肪酸进行了含量测定,并进一步对各样品中的各成分的含量进行了主成分分析。结果 对裸体方格星虫样品的测定结果显示各样品26种脂肪酸类成分总含量范围为198.20?578.05 ?g/g,总含量最高的样品是海南三亚的裸体方格星虫体腔液样品（S12）;各产地样品中脂肪酸类成分总含量均呈现体腔液部位高于外壁 内脏部位。测定样品的26种脂肪酸中,不饱和脂肪酸总含量高于饱和脂肪酸总含量;多不饱和脂肪酸中,亚油酸和?-亚麻酸含量最高,分别占总含量的1.54%?5.65%和1.61%?4.94%;单不饱和脂肪酸中顺芥子酸含量最高,分别占各样品总含量的14.66%?46.41%;基于26种脂肪酸的含量测定结果对12个裸体方格星虫样品的PCA分析结果显示不同产地裸体方格星虫的外壁 内脏样品相互接近,体腔液样品差别较大。结论 裸体方格星虫中脂肪酸不仅种类多样、含量丰富,而且具有多种重要活性作用的不饱和脂肪酸比例合理。本研究中对脂肪酸类成分的研究结果将对进一步开发利用裸体方格星虫提供一定的理论基础。     

方格星虫粗提物对5/6肾切除大鼠肾小球病变的影响

目的观察方格星虫粗提物(SNP)对5/6肾切除大鼠肾小球病变的影响。方法 SD大鼠40只,随机分为假手术组和手术组,手术组行5/6肾切除术并于术后2周随机分为模型组、SNP低剂量组、SNP高剂量组。在给药前及给药4、8、12、16 w末观察大鼠24 h尿蛋白(24 hUPQ)及血肌酐(Scr)的动态变化,普通光镜观察肾小球病理变化,免疫组化法检测肾组织中纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)、Wilm肿瘤蛋白-1(WT-1)的表达。结果随着时间的延长,各组大鼠24 hUPQ、Scr均逐渐升高,但同一时间点,治疗组与模型组比较,差异无统计学意义;治疗组大鼠肾小球系膜增生程度、FN及-αSMA表达均较模型组下降;治疗组WT-1表达与模型组比较差异不显著。结论方格星虫粗提物可减轻5/6肾切除大鼠肾小球系膜增生程度、其机制可能与下调FN、-αSMA的表达有关。     

方格星虫多肽的结构分析及体外抗氧化活性

目的 以方格星虫为原料,酶解制备水溶性多肽并考察其抗氧化活性,探究其结构-活性关系。方法 利用5种蛋白酶酶解新鲜方格星虫,并结合超滤方法得到高分子量(>50kDa)、中分子量(5～50 kDa)和低分子量(＜5kDa)的酶解肽段;利用氨基酸自动分析仪测定方格星虫酶解肽的氨基酸组成。综合考察多肽对1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH.)自由基、羟基自由(.OH)、超氧阴离子自由基( O-2.)的清除能力以及还原力效果,评价方格星虫多肽抗氧化活性;利用高效液相色谱-串联质谱方法鉴定小分子肽的氨基酸组成和序列结构。结果 胰蛋白酶水解方格星虫4h得到的酶解液蛋白含量最高,并在酶解液中检测确定了17种氨基酸,其中精氨酸含量最高13.65%。高中低三组肽段中,低分子量肽段的抗氧化活性优于其他：对DPPH 自由基和羟自由基清除能力大小顺序为低分子量>高分子量>中分子量、对超氧阴离子清除能力大小顺序为低分子量>高分子量≈ 中分子量、还原能力强弱顺序为高分子量>低分子量 > 中分子量。经高效液相色谱-串联质谱联鉴定了GFAGDDAPR、GLGGLSPEK 、LDLAGR和VTKEIPR 4个肽段。结论 低分子量的方格星虫酶解多肽具有较好的抗氧化活性,有潜力用作生物医药或化妆品工业的原料。     

凯氏定氮法和考马斯亮蓝法测定方格 星虫多糖中蛋白质的含量

目的: 建立一种快速、简单、准确测定方格星虫多糖中蛋白质含量的方法。方法: 分别采用凯氏定氮法和考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,并进行稳定性、精密度、重复性和回收率测定。结果: 凯氏定氮法和考马斯亮蓝法测定方格星虫多糖中蛋白的含量分别为2.40%,2.22%,其回收率分别为98.69%,100.97%,2种方法测得蛋白质含量基本相同,无显著性差异(P>0.05)。结论: 综合考虑,凯氏定氮法简便、快速、准确,可用于方格星虫多糖中蛋白质的质量控制。     

方格星虫多糖中糖醛酸的含量测定

目的建立方格星虫多糖中糖醛酸的含量测定方法。方法采用咔唑-硫酸比色法,以半乳糖醛酸为对照品,在最大吸收波长525nm处测定吸光度值(OD)。结果半乳糖醛酸的线性范围为2.75～27.5μg/ml(R2=0.9995),方法重现性实验RSD为1.22%(n=6),平均回收率为103.5%,RSD为1.9%。三批方格星虫多糖中糖醛酸含量分别为23.68%,22.87%和25.08%。结论该方法简便、灵敏、重复性好,可以作为方格星虫多糖中糖醛酸的质量控制方法。     

Radioprotective effects of Sipunculus nudus L. polysaccharide combined with WR-2721, rhIL-11 and rhG-CSF on radiation-injured mice

This study investigated the radioprotective effect of Sipunculus nudus L. polysaccharide (SNP) in combination with WR-2721, rhIL-11 and rhG-CSF on irradiated mice. A total of 70 Imprinting Control Region (ICR) mice were divided into seven groups: the control group, the model group and five administration groups. All groups, except the control group, were exposed to a 5 Gy ⁶⁰Co γ-ray beam. Blood parameters [including white blood cell (WBC), red blood cell (RBC) and platelet counts and hemoglobin level] were assessed three days before irradiation, and the on the 3rd, 7th and 14th days after irradiation. Spleen, thymus and testicular indices, DNA contents of bone marrow cells, bone marrow nucleated cells, sperm counts, superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA), testosterone and estradiol levels in the serum were assessed on the 14th day after irradiation. The combined administration of SNP, WR-2721, rhIL-11 and rhG-CSF exerted synergistic recovery effects on peripheral blood WBC, RBC and platelet counts and hemoglobin levels in irradiated mice, and synergistic promotion effects on spleen, thymus, testicle, bone marrow nucleated cells and sperm counts in irradiated mice. The synergistic administration increased the serum SOD activities and serum testosterone content of irradiated mice, but synergy decreased the content of serum MDA and estradiol in irradiated mice. These results suggest that the combined administration of SNP, WR-2721, rhIL-11 and rhG-CSF should increase the efficacy of these drugs for acute radiation sickness, protect immunity, hematopoiesis and the reproductive organs of irradiated-damaged mice, and improve oxidation resistance in the body.     

方格星虫多糖对低剂量电离辐射、一氧化碳、苯和噪声复合损伤大鼠的保护作用观察

目的观察方格星虫多糖对低剂量电离辐射、一氧化碳、苯和噪声等有害环境因素复合损伤大鼠的保护作用。方法健康成年SD大鼠50只,随机分为正常对照组、模型对照组及方格星虫多糖低、中、高剂量组。给药组大鼠每天于γ射线照射前经口给予方格星虫多糖70、140、280mg/(kg.d),连续7d。模型对照组给予等体积0.9%NaCl。试验结束后处死动物,全自动血细胞计数仪检测外周血细胞计数,紫外分光光度法测定骨髓DNA含量,试剂盒检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并计算主要脏器(肝脏、脾脏、胸腺)指数。结果与模型对照组比较,方格星虫多糖处理后外周血红细胞、血小板计数及血细胞比容、血红蛋白水平、SOD活性均显著升高(P<0.05,P<0.01),白细胞有升高趋势,MDA含量明显下降(P<0.05),骨髓DNA含量显著升高(P<0.05),而肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数均无明显变化。结论方格星虫多糖对有害环境因素复合损伤大鼠具有升高白细胞、血小板,提高抗氧化能力,促进骨髓损伤修复等保护作用。     

海洋星虫多糖胶囊的稳定性研究

目的研究海洋星虫多糖胶囊的稳定性。方法按照《中国药典》2005年版二部附录原料药与药物制剂稳定性试验指导原则,以胶囊剂重点考察项目性状、鉴别、水分、崩解时限、微生物限度、含量测定为评价指标,进行加速试验和长期试验。结果三批样品经过6个月的加速试验和12个月的长期试验,各项指标均符合质量标准规定。结论海洋星虫多糖胶囊药物性质稳定。     

方格星虫延缓衰老作用研究

目的：研究方格星虫提取物的延缓衰老作用。方法：SD大鼠口服给药30d后，采用硫代巴比妥酸显色法(TBA法)测定受试大鼠血清丙二醛(MDA)含量，采用羟胺法测定血清SOD活性。采用果蝇生存试验测定方格星虫提取物对0regon K野生型黑腹果蝇生存时间的影响。结果：方格星虫提取物经口给予SD大鼠不同剂量的方格星虫提取物30d后，大鼠血清MDA含量显著降低，血清SOD活性显著增强。方格星虫提取物显著延长雌雄果蝇的平均寿命，显著延长雄果蝇的最高寿命。结论：方格星虫提取物具有明显的延缓衰老作用。     

星虫多糖抗疲劳作用实验研究

目的:观察纯化后的星虫多糖(Sipunculus nudus polysaccharide,SNP)的抗疲劳作用。方法:以不同剂量的SNP(50,100,200 mg·kg-1)对小鼠ig给予受试物7 d后测定各组的小鼠力竭游泳的持续时间,运动后血清尿素氮(BUN)、肌糖原、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性。结果:小鼠给药7d后,对照组负重游泳时间为(115±40)s,SNP中、高剂量组负重游泳时间分别为(206±93),(203±74)s,与对照组比较显著延长(P<0.01);力竭运动90 min后,对照组BUN含量为(8.72±0.46)mmol·L-1,SNP中、高剂量组分别为(7.55±0.70),(7.89±0.42)mmol·L-1,与对照组比较显著降低(P<0.01);对照组肌糖原含量为(0.41±0.04)mg·g-1,SNP中、高剂量组含量分别为(1.01±0.18),(1.06±0.22)mg·g-1,与对照组比较显著提高(P<0.01)。此外,SNP高剂量组肝组织中SOD,GSH-Px活性明显高于对照组(P<0.01)。结论:星虫多糖具有显著的抗疲劳作用,并有其最适剂量。