白花前胡的种植技术研究及应用

该文概述了白花前胡规范化种植所涉及的种质、栽培、采收等种植技术研究状况与实际应用情况,为制订白花前胡的繁育技术规程提供依据。     

宁前胡内生真菌的培养分离与鉴定

目的 对安徽道地药材白花前胡内生真菌进行培养分离与鉴定。方法 通过组织块法对宁前胡进行内生真菌的分离,采用形态学和分子生物学相结合的手段进行鉴定。结果 从宁前胡中共计分离得到41株内生真菌,分属于10属21种,分别为Fusarium、Penicillium、Aspergillus、Alternaria、Tricladium、Phoma、Collariella、Rhizoctonia、Colletotrichum、Trichoderma。分布最广的类群是镰孢霉属Fusarium sp.,其分离频率为29.27%;其次是青霉属Penicillium sp.和链格孢属Alternaria sp.,其分离频率均为19.51%,为其优势种属。结论 宁前胡中含有丰富的内生真菌资源,进一步开发利用宁前胡中内生真菌资源具有重要意义。     

白花前胡果实干燥前后挥发性成分对比研究

目的：研究白花前胡果实挥发油在干燥前后化学成分的变化。方法：采用水蒸气蒸馏法提取白花前胡新鲜和干燥果实的挥发油,以气相色谱-质谱联用仪测定挥发油化学组分。结果：白花前胡果实干燥前后,其挥发油的主要成分都为石竹烯类和1R-α-蒎烯。石竹烯类成分在干燥前后含量变化不大,1R-α-蒎烯在干燥后,含量降低,可见其干燥过程中有所损失。其他成分差异明显。结论：白花前胡果实可以趁鲜提油。白花前胡果实中石竹烯类含量超过了挥发油总量的55％,可考虑采收种子综合利用。     

基于GC-MS分析蜜炙对前胡中挥发性成分的影响

目的：分析比较前胡与蜜前胡的挥发性成分,为后续药理研究奠定基础,同时考察蜜炙对前胡挥发性成分的影响,为前胡临床应用提供科学依据。方法：采用水蒸气蒸馏法（SD）和顶空固相微萃取法（HS-SPME）结合气质联用技术（GC-MS）对前胡生品进行分析鉴定,用（HS-SPME）对蜜前胡挥发性成分进行分析鉴定,用面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果：SD法鉴定出50种,占挥发性成分的73.84%,SPME法鉴定出38种,占挥发性成分的93.62%,2种方法所得主要有效成分相差不多,鉴于顶空固相微萃取前处理方便快捷,故前处理方法采用顶空固相微萃取。SPME法从蜜前胡中鉴定出46种成分,分别占挥发性成分的83.61%。结论：前胡蜜炙后γ-柠檬烯、（1S）-（+）-3-蒈烯、莰烯的含量明显减少,1-石竹烯、α-石竹烯、α-水芹烯、萜品油烯、l-b-红没药烯的含量明显增多,前胡蜜炙后新增了17种成分,减少了9种成分。前胡蜜炙前后挥发性成分的组成和含量均发生变化。该研究为前胡蜜炙前后各成分的药理作用及其作用机制的进一步研究提供物质基础,为前胡的临床应用提供参考。     

信前胡的产地与道地性考证

目的：从历史角度对＂信前胡＂进行药名、基源与道地产地考证。方法：通过本草考证、现代资源调查、药材性状、有效成分与药效、生态环境、遗传基因、栽培和采收加工技术等方面对信前胡进行考证研究。结果：信前胡是产于古信州（今江西上饶）的道地药材。结论：信前胡在历史上形成了以江西上饶县五府山、玉山、婺源、广丰、德兴等产地为道地产区的分布规律。     

紫花前胡茎叶化学成分的研究

目的 :研究我国传统中药紫花前胡的化学成分 ,为阐明其有效成分提供科学依据。方法 :溶剂提取和硅胶柱色谱法进行分离 ,理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果 :从紫花前胡茎叶中分得 7个成分 ,鉴定为欧前胡素 ,石防风素 ,哥伦比亚内酯 ,β-谷甾醇 ,东莨菪内酯 ,(+) trans-decursidinol和胡萝卜苷。 结论 :7个化合物均系首次从该植物中分离得到。     

高效液相色谱法测定前胡属植物中紫花前胡苷的含量

目的：建立高效液相色谱法测定前胡药材中紫花前胡苷的含量。方法：Shim-Pack CLC-ODS柱,流动相乙腈-甲醇-水(20∶5∶75),紫花前胡苷为对照品,外标法峰面积定量,紫外检测（λ=334　nm）。结果：6个不同品种前胡中的紫花前胡苷含量为0.005％～3.090%。结论：紫花前胡苷不能作为评价前胡属植物的药用指标,但可以作为紫花前胡的质量控制标准。     

HPLC测定白花前胡蜜炙前后3种香豆素类成分的含量

 目的 对前胡蜜炙前后3种香豆素类成分进行比较研究。方法 HPLC同时测定3种香豆素类成分白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡E素的含量,Agilent TC-C₁₈ (2)柱,流动相为甲醇-水（3︰1）,检测波长320 nm,流速0.8 mL·min-1,柱温35 ℃。结果 3个成分的线性关系较好（r>0.999 6）,测定范围分别为0.204 4~2.044, 0.077 6~0.776,0.077 2~0.772 μg,平均回收率分别为101.66%,97.45%,97.79%。前胡不同饮片中3种香豆素类成分含量有差异。结论 所建立的方法可用于同时测定前胡不同饮片中3种香豆素的含量,为前胡不同饮片质量评价标准的制定提供了科学依据。     

白花前胡CAL基因的克隆和原核表达分析

目的 克隆得到白花前胡花发育关键基因CAULIFLOWER（CAL）并对其进行原核表达和基因表达分析。方法 根据白花前胡转录组数据中的基因序列信息，通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）从白花前胡中克隆CAL基因，命名为PpCAL1和PpCAL2。构建原核表达载体pET-32a-PpCAL1和pET-32a-PpCAL2，并转化至大肠埃希菌Transetta（DE3）进行诱导表达。运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析抽薹开花前后白花前胡不同组织的基因相对表达量。结果 PpCAL1和PpCAL2的开放阅读框（ORF）长度分别为645、738 bp，分别编码214、245个氨基酸。结构功能域分析表明，PpCAL1和PpCAL2蛋白都具有MADS_MEF2_like和K-box保守结构域。原核表达结果显示，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷可成功诱导目的蛋白表达。系统进化树分析显示，白花前胡PpCAL1与胡萝卜DcCAL聚为一支，白花前胡PpCAL2与橡胶树HbCAL聚为一支。基因表达结果显示，PpCAL1和PpCAL2在不同组织中均在开花后表达量上调。结论 克隆并分析白花前胡PpCAL1和PpCAL2基因，为进一步研究白花前胡开花基因提供参考。