Worldwide dissemination of acquired carbapenem-hydrolysing class D β-lactamases in Acinetobacter spp. other than Acinetobacter baumannii

The aim of this study was to identify acquired OXA-type carbapenemases in Acinetobacter spp. other than Acinetobacter baumannii. From a total of 453 carbapenem-susceptible and -resistant Acinetobacter isolates collected worldwide, 23 were positive for bla_OXA genes by multiplex PCR. These isolates were identified as Acinetobacter pittii (n = 18), Acinetobacter nosocomialis (n = 2), Acinetobacter junii (n = 1) and Acinetobacter genomic species 14TU/13BJ (n = 2). The bla_OXA genes and associated insertion sequence (IS) elements were sequenced by primer walking. In 11 of these isolates, sequencing of the PCR products revealed that they were false-positive for bla_OXA. The remaining 12 isolates, originating from Europe, Asia, South America, North America and South Africa, harboured OXA-23 (n = 4), OXA-58 (n = 5), OXA-40-like (n = 1) and OXA-143-like (n = 1); one A. pittii isolate harboured both OXA-23 and OXA-58. IS elements were associated with bla_OXA in 10 isolates. OXA multiplex PCR showed a high degree of false-positive results (47.8%), indicating that detection of bla_OXA in non-baumannii Acinetobacter spp. should be confirmed using additional methods.     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因检测

目的 对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行耐药性分析及碳青霉烯酶基因检测,为临床正确选择抗菌药物提供依据.方法 采用K-B法检测15株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物的耐药性,以WHONET5.5软件分析细菌耐药表型,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,以聚合酶链反应检测blaKPC、blaIMP、blaVIM、balNDM基因并进行测序.结果 2008年1月-2009年12月共分离到非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌15株,改良Hodge试验检出14株含碳青霉烯酶,检出率为93.3％;PCR结果显示14株携带blaKPC,未检出blaIMP、blaVIM、blaNDM基因,与改良Hodge试验一致.结论 blaKPC是肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物主要原因,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶具有很好的敏感性.     

产KPC酶肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的分子机制研究

摘要：目的 研究临床分离肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的分子耐药机制,为临床合理用药提供理论及实验依据。方 法 收集2020年1月-2020年12月皖南医学院弋矶山医院临床分离非重复肺炎克雷伯菌株923株,利用全自动微生物分析系统进 行菌种鉴定及药敏分析,并用16S rRNA PCR扩增产物测序验证菌种,K-B法复核碳青霉烯类药物耐药情况;胶体金法对耐碳青 霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia, CRKP)菌株进行碳青霉烯酶的表型检测,并用碳青霉烯酶PCR扩 增结果进行验证;同时利用全自动微生物分析系统对产KPC酶CRKP产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs) 进行检测,并用ESBLs耐药相关基因PCR扩增结果进行验证;多位点序列分型技术(MLST)对产KPC酶CRKP进行序列分型 (ST)。 结果 923株肺炎克雷伯菌中256株(27.74%)为CRKP,其中183株携带blaKPC,ST分型为ST11型和ST12型,产KPC酶CRKP 携带3种ESBLs基因blaTEM-1、blaSHV-11和blaCTX-M-1。结论 CRKP产碳青霉烯酶以KPC酶型为主,blaKPC可合并3种ESBLs的产生。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药特征及其耐药机制研究

目的分析耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药特征,并研究对亚胺培南的耐药机制。方法采用Micro-Walkaway-40进行细菌鉴定和药物敏感试验,应用PCR法对铜绿假单胞菌亚胺培南耐药相关基因（IMP、VIM、GIM、OXA）和膜微孔蛋白基因oprD2进行检测,琼脂稀释法检测氰氯苯腙（cccp）对耐亚胺培南铜绿假单胞菌MIC的影响。结果 65株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对舒普深、特治星、阿米卡星的耐药率分别为38.5%、43.1%和44.6%,对头孢他啶、马斯平和环丙沙星的耐药率分别为50.8%、53.8%和55.4%;65株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中,IMP阳性11株（16.9%）、VIM 4株（6.2%）,oprD2基因缺失5株（7.7%）,其余耐药基因未检出;CCCP检测阳性时,亚胺培南的MIC值下降,提示存在主动外排机制的菌株7株（10.8%）。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌多重耐药现象较为严重,其耐药机制主要与细菌产IMP型金属β-内酰胺酶、细胞主动外排机制以及膜微孔蛋白基因oprD2缺失有关。     

两种方法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌体外药敏结果的分析

目的比较两种方法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌体外药敏结果的差异。方法分别采用纸片扩散法和MIC测试条fMTS）法检测替加环素对23株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的体外敏感性。结果MTS法敏感率为100％;而纸片扩散法敏感率为95．7％,出现4．3％的中介菌株。若以MTS法为标准,纸片扩散法检测的次要误差率为4.3％,无重要误差和严重误差。结论纸片扩散法和MTS法检测替加环素对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的体外敏感性时,其结果存在差异。关键词：碳青霉烯酶;肺炎克雷伯菌;替加环素     

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制及治疗进展

近年来随着广谱抗生素的大量使用,多重耐药细菌、甚至是泛耐药及全耐药细菌不断产生.鲍曼不动杆菌是一种常见的条件致病菌,目前多重耐药鲍曼不动杆菌(multidrug-resistant acinetobacter baumannii,MDRAB)的院内感染已成为最为棘手的问题之一.MDRAB的耐药机制主要在于产生抗菌药物灭活酶、靶位或细胞功能改变、外膜屏障及药物主动外排泵作用.治疗MDRAB感染的药物包括舒巴坦制剂、碳青霉烯类、多黏菌素类、四环素类及其他药物.但是由于缺乏大规模的临床研究,目前对于MDRAB的治疗尚无统一的规范,儿科的临床经验更少.     

Nosocomial transmission of NDM-1-producing Escherichia coli within a non-endemic area in France

Two patients with no travel history and sharing the same room were colonized by the same strain of New Delhi metallo-β-lactamase 1 (NDM-1)-producing Escherichia coli within a geographical area not endemic for this highly multidrug-resistant bacterium. It was documented an absence of an epidemiological and bacteriological link with a third patient returning from India after surgery and found to be infected by an NDM-1-producing Citrobacter strain during the same period. Despite extensive investigation, the source of contamination of the two former patients was not elucidated. This case report illustrates the need of investigating rapidly the emergence of highly multidrug-resistant Enterobacteriaceae, to stop their dissemination in a nosocomial setting.     

对亚胺培南不敏感菌株的产碳青霉烯酶的情况分析

目的:探讨对亚胺培南不敏感的革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的分布与变迁情况,为临床合理诊治提供指导。方法:收集2005年5月-2009年8月间临床分离的革兰阴性杆菌,用K-B法筛选对亚胺培南不敏感的菌株;改良Hodge试验检测革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的情况;核酸扩增碳青霉烯酶相关基因NDM-1、KPC、VIM、IMP、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58。结果:铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌是碳青霉烯类药物不敏感的主要病原菌,54株亚胺培南不敏感的菌株中Hodge试验阳性5株,阳性率为9.3%。携带耐药基因包括IMP 2株,VIM 2株,OXA23 3株,OXA51 2株,OXA65 1株。其中有2株同时携带两种耐药基因。结论:我院亚胺培南不敏感分离株与产碳青霉烯酶IMP、VIM、OXA51、OXA23、OXA65耐药基因有关。     

耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因的研究

目的 分析39株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌的耐药性、碳青霉烯酶基因及插入序列、Ⅰ类整合子基因的分布情况.方法 收集医院2009年6月- 2010年6月分离的39株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌;微量稀释法检测对常用抗菌药物的敏感性;PCR扩增和序列测定分析碳青霉烯酶及其插入序列、Ⅰ类整合子基因型.结果 39株鲍氏不动杆菌分离自临床12个科室,对阿米卡星、多黏菌素及米诺环素的耐药性分别为5.1％、0、0,对其余抗菌药物的耐药性＞90.0％;39株blaOXA-51-like基因阳性,37株blaOXA-23 like基因阳性,经序列测定及BLAST比对,为blaOXA-66及blaOXA-23型酶;blaOXA-23位于插入序列下游34 bp,blaOXA-66位于插入序列下游8 bp;39株Ⅰ类整合子基因阳性;未检测到blaOXA-24-like、blaOXA-58-like型酶及blaIMP、blaVIM、blaSIM型金属酶.结论 blaOXA-23型及blaOXA-66型碳青霉烯酶是医院鲍氏不动杆菌耐亚胺培南的主要原因.