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《中国老年学杂志》2017,(7)
目的检测DU145、PC-3和LNCaP前列腺癌细胞中趋化因子CXC配体(L)12及其受体(R)4的表达,探讨重组人CXCL12对上述细胞增殖的影响及其机制。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究CXCL12/CXCR4在DU145、PC-3和LNCaP细胞的表达;CCK-8实验研究重组人CXCL12对DU145、PC-3和LNCaP细胞增殖的作用;Wettern印迹实验研究重组人CXCL12对DU145细胞外调节蛋白激酶(ERK)和磷酶化ERK(pERK)表达的影响。结果 DU145、PC-3和LNCaP细胞均表达CXCL12和CXCR4,重组人CXCL12可明显促进上述细胞的增殖,重组人CXCL12虽然不能改变DU145细胞ERK1/2表达,但可上调pERK1/2的表达。结论前列腺癌细胞表达CXCL12及其受体CXCR4,CXCL12/CXCR4可通过活化丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/ERK信号通路促进前列腺癌细胞的增殖。 相似文献
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<正>宫颈癌是世界上第四种最常见的女性恶性肿瘤,高危人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus, HR-HPV)的持续侵袭是宫颈癌的独立危险因素。HR-HPV感染会导致宫颈局部细胞免疫缺陷,免疫监视能力下降导致的免疫逃逸是宫颈癌发生的重要机制之一。局部宫颈癌术后联合放化疗患者的5年总生存率在75%~85%。然而,复发、持续性、转移性宫颈癌的5年生存率仅约为15%[1]。预后不良的主要原因是治疗选择有限。 相似文献
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目的探讨内源性配体13(Apelin-13)在改善自体动静脉内瘘血管狭窄中的机制。方法将该院收治的30例自体动静脉内瘘血管狭窄患者纳入观察组,30例自体动静脉内瘘非血管狭窄患者纳入对照组,检测所有研究对象血清中Apelin-13、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、一氧化氮(NO)水平。在细胞水平,采用Apelin-13干扰序列(shApelin组)和无义序列(Scramb组)转染人脐静脉内皮细胞(HUVECS);采用AngⅡ、Apelin-13刺激HUVECS,并通过免疫印迹试验检测细胞中磷酸化内皮型一氧化氮合酶(peNOS)和非磷酸化内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达情况。同时检测细胞培养上清液中NO水平。结果观察组血清Apelin-13水平明显低于对照组,差异有统计学意义(t=13.23,P0.05);观察组血清中AngⅡ水平高于对照组,差异有统计学意义(t=10.45,P0.05)。观察组NO水平低于对照组,差异有统计学意义(t=9.83,P0.05)。shApelin组的Apelin-13、peNOS表达量低于Scramb组(t=19.82、83.28,P0.05),但两组eNOS表达量差异无统计学意义(t=1.52,P0.05)。shApelin组NO水平明显高于Scramb组,差异有统计学意义(t=10.37,P0.05)。免疫印迹试验结果显示,与未进行AngⅡ刺激的HUVECS对比,AngⅡ刺激后HUVECS的peNOS表达量降低(t=1.02,P0.05),而eNOS表达量差异无统计学意义(t=0.60,P0.05)。未进行AngⅡ刺激的HUVECS与AngⅡ刺激后的HUVECS细胞中NO的水平比较,差异有统计学意义(t=5.58,P0.05);AngⅡ刺激后的HUVECS中peNOS表达量与AngⅡ、Apelin-13同时刺激的HUVECS中peNOS表达量比较,差异有统计学意义(t=16.04,P0.05),但eNOS表达量差异无统计学意义(t=1.71,P0.05)。AngⅡ及Apelin-13同时刺激所培养细胞的上清液中NO水平低于AngⅡ刺激的NO水平(t=5.97,P0.05)。结论 Apelin-13、AngⅡ通过共同刺激和介导peNOS/NO的信号通路发挥调控作用,从而改善血管狭窄情况。 相似文献
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目的 慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见,牙周膜干细胞(PDLSCs)的外泌体(Exo)对骨吸收的作用和影响尚不明确,本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法 分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs,通过流式细胞术检测表面标记物;通过差速离心分别提取2种细胞的Exo,即Exo-WT和Exo-CP,并通过Western blot、透射电子显微镜(TEM)、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征;通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分;通过酶联免疫吸附(ELISA)验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、白细胞介素(IL)-1α、转化生长因子β(TGF-β)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)表达水平;将10、100、1 000 μg·mL-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨分化相关指标表达情况;采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果 Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关;ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α,低表达TGF-β1、BMP-2(P<0.05);Exo-CP作用于RAW264.7,显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平,TRAP染色可见分化的破骨细胞,且呈现浓度依赖性,100、1 000 μg·mL-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL-1浓度组(P<0.05)。结论 慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起,Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α,本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。 相似文献
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目的:研究卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中CD8~+肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)密度及癌细胞程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达情况与临床意义。方法:收集2004年7月至2010年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院行肿瘤细胞减灭术的116例卵巢浆液性腺癌患者组织标本,免疫组化检测肿瘤组织CD8~+TILs密度及癌细胞PD-L1表达情况;Spearman相关性分析癌细胞PD-L1表达水平与癌巢及间质CD8~+TILs数目的关系;采用乘积极限法进行基于癌巢CD8~+TILs密度及肿瘤细胞PD-L1表达的单因素生存分析。结果:卵巢浆液性腺癌PD-L1高表达的比例为70.69%(82/116)。癌细胞PD-L1表达强度与癌巢内的CD8~+TILs数目呈显著负相关(P=0.024),而与间质内的CD8~+TILs数目无相关性(P=0.117)。癌巢CD8~+TILs高密度组患者的中位生存时间(64月)显著高于低密度组(43月),差异有统计学意义(P0.05);乘积极限法的亚组分析显示肿瘤微环境中癌细胞PD-L1低表达癌巢CD8~+TILs高密度组患者的预后较好。结论:卵巢浆液性腺癌肿瘤微环境中癌巢CD8~+TILs密度及癌细胞PD-L1表达水平与患者预后密切相关,重视肿瘤微环境的免疫分型有助于评估患者预后及筛选合适患者实施抗PD-1/PD-L1免疫治疗。 相似文献