神经系统中荧光蛋白组合表达转基因策略

对大脑神经元进行着色并非新鲜事，科学家早已利用转基因技术将荧光蛋白基因转移到神经元中进行表达。到目前为止，这种方法每次最多只能转移两种荧光蛋白基因，着色种类只有两种，但要详尽描绘复杂的神经元网络结构，两种颜色远远不够．需要开发新方法。来自哈佛大学的一个研究小组开发出新策略，利用多种不同颜色对神经元进行遗传标记，以提高突触回路的视觉辨析率。     

系统性红斑狼疮患者淋巴细胞亚群早期凋亡的初步研究

目的：检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中不同细胞亚群发生凋亡的情况，并初步分析其在SLE发病机制中的意义。方法：取28例SLE患者和性别年龄与之相匹配的20个正常对照者。采用淋巴细胞亚群标志、Annexin-V及碘化丙啶三色荧光标记、流式细胞术检测细胞的早期凋亡。结果：SLE患者体内CD3^ T细胞、CD4^ T细胞和CD8^ T细胞的凋亡百分率均显著高于正常对照组(P＜0．05)。同时，SLE患者T淋巴细胞的死亡百分率也高于正常人。经激素治疗一定时间后，这些细胞亚群的凋亡率会进一步升高(P＜0．01)，但CD4／CD8比值恢复至接近正常人。SLE患考体内CDl9^ B淋巴细胞的凋亡或死亡百分率和正常对照组相比均无明显差别，激素治疗对B细胞凋亡和死亡的影响亦不显著。结论：在SLE患者体内主要是T淋巴细胞凋亡增加，但SLE患者淋巴细胞数目减少不仅仅是因为细胞凋亡所致，死亡细胞数目明显升高也是其中一个重要原因。激素治疗可诱导SLE患者T淋巴细胞进一步发生凋亡，并使T细胞亚群比例有所改善。     

Stratus荧光酶免分析仪故障检修一例

1故障现象仪器按规定时间预热后,作标准品检测时,检测值与实际值相差甚远,不是过大就是过小,无法作样品检测。观察显示器的监控工作参数,“BLOCKTEMP”参数无规律忽高忽低。通过进一步观察发现,开机时间越长,温度愈不稳定。正常情况下,“BLOCKTEMP”为:40.0℃±0.2℃。2分析与检修根据故障现象判断为“BLOCKTEMP”检测电路出现不稳定的故障,导致仪器无法正常工作。由于厂家没有提供技术资料,图1温度检测、控制电路原理框图卸开仪器后,测绘出电路原理图。电路原理方框图见图1。图1中,虚线内是“BLOCKTEMP”检测电路,Rt是温度…     

应用荧光杂交定量PCR和ELISA法进行产前TORCH筛查比较及临床意义的研究

目的：比较荧光杂交定量PCR和ELISA法进行产前TORCH筛查的差异，探讨病原微生物拷贝数在临床诊治中的作用；方法：分别用荧光杂交定量PCR和ELISA IgM法筛查孕期血标本272例，其中包括妊娠早期102例，晚期170例；采集121例分娩孕妇及新生儿脐带血标本；222例不明原因流产标本，其中66例采集了新鲜自然流产脱膜和绒毛；结果：孕期筛查血CMV DNA和TOX DNA的阳性率分别为1．8％（5／272）和0．36％（1／272），其中妊娠早期CMV DNA的阳性率为2．9％（3／102），晚期为1．2％（2／170），不明原因流产，查出血清CMV感染22例，TOX4例，CMV DNA和TOX DNA的阳性率分别为9．9％（22／222）和1．8％（4／222）。脱膜和绒毛均感染3例，1例血清，脱膜感染但未采到绒毛标本。有2例是母血清中查到CMV，流产组织中未查到。查出血清，脱膜和绒毛均感染TOX1例，妊娠妇女外周血CMVDAN≥10^3有88％的发生流产；结论：荧光杂交定量PCR法不但具有较高的灵敏度和特异性而且可检测病毒负载量－拷贝数／ml，拷贝数越高发生流产的可能性愈高，应推荐作为妊娠初期筛查的首选方法。     

人晶体 γ-晶体蛋白的研究:Ⅳ.近紫外线对胚 γ_2-晶体蛋白的光氧化作用

对人胚胎晶体γ_2-晶体蛋白溶液用近紫外线(γmax 365nm)照射,不同时间取样分析。利用巯基(-SH)特异性试剂 DACM[N-(7-甲基氨基-4-甲基-3-邻羟苯烯基)-马来酰亚胺],经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳观察光照射后的γ_2-晶体蛋白及其聚合物的游离巯基,同时检测照射后的蛋白溶液的紫外吸收光谱、光散射强度、色氨酸荧光发射光谱,以及丙烯酰胺对色氨酸荧光的猝灭效应。结果显示:人胚胎γ_2-晶体蛋白经紫外线照射,使其游离-SH 减少,蛋白聚合和分解,蛋白溶液的光散射增强,其二聚体不含游离-SH,γ_2-晶体蛋白的色氨酸荧光减少,这些变化随照射时间的延长而更明显;而对丙烯酰胺对蛋白分子中的色氨酸荧光猝灭效应影响不大。说明人胚胎γ_2-晶体蛋白通过光氧化,损伤及含游离-SH 的氨基酸残基、色氨酸残基,光氧化促使蛋白聚合和分解.提出通过进一步定量分析,可能在较深层次揭示紫外光氧化损伤含-SH 氨基酸、色氨酸残基,进而影响整个蛋白质分子结构的差异。眼科学报 1993;9:85-89。     

DBH─PF分光光度法测定血清锌的研究

研究了在混合表面活性剂CTMAB和OP存在下，新试剂二溴羟基苯基荧光酮（DBH—PF）分光光度法测定血清中微量锌的最佳显色条件及应用。结果表明，在pH11．0～12．8的碱性介质中，CTMAB、OP及洒石酸钠的存在下，Zn2 与DBH－PF形成了1：3的紫色络合物，常温下可以稳定7h，λmax为602um，摩尔吸光团数k为5．851×104cm2／mol，血清锌在0～14μmol／L范围内服从Lambert－Beer定律，血清中大多数金属离子在一般情况下不干扰测定，可不加掩蔽剂直接测定血清锌。该法简便、特异、灵敏、准确、用血量少、无需沉淀蛋白、加热及特殊设备，是目前分光光度法测定血清锌的最灵敏方法之一，精密度为2．58％，平均回收率为102．7％，与AAS法比较结果无显著性差异，所以该法适于临床推广。     

大鼠Ⅰ型肺胶原蛋白与SiO_2作用前后的光谱研究

本实验用大鼠肺中分离纯化的胶原(I型)与标准SiO_2混合将作用前后的样本做了红外光谱和拉曼光谱扫描比较,目的是要探讨胶原与SiO_2之间是否有化学键形成。红外光谱的结果提示:标准SiO_2和纯胶原作用后出现一特征谱带表明有Si-R(C或N)及Si-O-振动,推测与分子间的羟基化有关。拉曼光谱分析表明有N-Si-O-及-C-C-骨架变形的振动。     

荧光光谱法测定丁胺卡那霉素含量

 荧光光法測定丁胺卡那霉素含量，操作简便灵敏，试剂价廉易得，可同时測定大量样品，线性范围0~l0μg/ml (r=0. 9997)；批内，批间 RSD分別为3. 52%和2. 94% 。測定波长Ex415nm,Em475nm,适用于微量样品中丁胺卡那霉素含量測定。     

荧光染料在视神经脊髓鞘形成期从轴突至少突胶质细胞的扩散

将真蓝(true blue)混悬液注入出生后7、14、28d大鼠眼球内,经过一定时间后,视神经内的轴突和少突胶质细胞被荧光标记。荧光强度在视神经眼球端强于视神经交叉端;出生后14～28d的幼鼠荧光标记明显强于出生后7d的幼鼠;不同年龄组的动物荧光标记普遍在注射荧光染料后的第5d显著增强。本研究表明,荧光染料可被视网膜的节细胞吸收,经轴突输送,然后,横向扩散到少突胶质细胞,扩散的通路可能是朗氏结旁区的轴胶连接。     

生姜对超氧阴离子及羟自由基的清除作用

生姜对次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子及紫外线照射H₂O₂体系产生的羟自由基均有显著清除作用。提示生姜对活性氧的清除可能是其重要的药理机制之一。