类风湿性关节炎患者抗环瓜氨酸肽抗体检测的临床分析

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以关节滑膜慢性炎症为主的致畸性自身免疫性疾病,在出现症状两年内,50%～90%的患者有关节受损的放射学改变[1].     

我国辅酶Q10前景看好

辅酶Q10，又叫癸烯醌、泛醌，为脂溶性酮类化合物，化学名称2，3-甲氧基-5-甲基-6-癸异戊烯基苯醌。1957年由Frederick从牛心线粒体中分离得到。辅酶Q10作为人体中惟一的辅酶Q类物质，其代谢异常与人体的许多疾病相关联。辅酶Q10是细胞自身产生的一种天然代谢激活剂，能激活细胞呼吸、加速产生腺三磷(ATP)。它也是细胞自身产生的天然抗氧剂，能抑制线粒体的过氧化，保护生物膜结构完整性，对免疫有特殊的增强作用。     

9.1C3单克隆抗体轻,重链可变区基因克隆及序列分析

９．１Ｃ３分子是一种参与ＮＫ、巨噬细胞及ＬＡＫ细胞杀伤过程的重要细胞表面分子，主要表达于外周血单个核细胞表面。本文运用分子生物学技术，从分泌９．１Ｃ３ＭＣＡｂ的杂交瘤细胞中提取总ＲＮＡ，经反转录、ＰＣＲ分另１１分离了９．１Ｃ３ＭｃＡｂ轻链可变区（ＶＬ）基因及重链可变区（ＶＨ）基因，并用全自动荧光ＤＮＡ序列分析仪对９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因序列进行了分析。结果表明：９．１Ｃ３ＶＨ基因为３５１ｂＰ，编码１１７ａａ残基，９．１３ＶＬ为３２４ｂＰ，编码１０８ａａ残基；从推导出的氨基酸序列分析证实９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ序列均符合小鼠ｌｇ可变区的氨基酸序列特征；根据Ｋａｂｂａｔ分类体系，９．１Ｃ３ＶＨ隶属Ｉｇ重链第Ⅱ（Ｃ）亚组，９．１Ｃ３ＶＬ隶属小鼠ＩｇＫ链第Ⅴ亚组。９．１Ｃ３ＶＨ、ＶＬ基因的克隆成功为其单链抗体的构建、表达奠定了良好的物质基础。     

分泌肾综合征出血病热毒单克隆抗独特型抗体的杂交瘤细胞系的建立

将HFRS病人Ab_1免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞融合,制备了HFRSV的McAb_2。初期融合试验中用ELISA间接法检测阳性克隆,阳性率为3.2～7.4％。其中5株杂交瘤经克隆化后阳性率达到100％。特异性鉴定表明,5种McAb_2只与HFRS病人Ab_1结合,不与正常人Ig结合。McAb_2所识别的独特型是人Ab_1与部分小鼠抗HFRSV的McAb上的交叉反应独特型。本文还应用McAb_2作为探针,对抗HFRSV的单克隆抗体的独特型进行了分析。     

消化道肿瘤自身抗体检测

目的探讨消化道肿瘤患者针对肿瘤细胞的自身抗体的存在。方法收集肠癌患者及胃癌患者术前血清96份和健康体检人群血清62份，分组后采用Western印迹分析法定性检测消化道肿瘤患者术前血清中的自身抗体。结果正常健康人群和正常肝细胞株96％（212／220）的反应条无显色带，而97％（60／62）的肠癌患者肠癌细胞株、89％（39／44）的胃癌患者胃癌细胞株反应条均出现多个阳性带。结论健康人群体内很少产生针对肿瘤细胞的自身抗体，而大部分消化道肿瘤患者体内产生针对肿瘤相关抗原的自身抗体，这为消化道肿瘤的病因，早期诊断，预后监测及分子靶向治疗等研究提供了一个很好的线索。     

抗β1-肾上腺素受体自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用

目的：观察抗β1-肾上腺素受体（β1-AR）自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用,并探讨其可能的信号转导通路,以阐明该抗体参与心衰发生发展的病理机制。方法：用β1-AR细胞外第二环合成肽段免疫抗β1-AR自身抗体阴性大鼠（9周）,定期检测大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度、心功能、心肌组织凋亡现象和caspase-3,8,9活性。结果：（1）免疫组大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度逐渐升高并维持于高水平[1∶（1280±0.07）];对照组始终在1∶10左右;（2）TUNEL和琼脂糖凝胶电泳显示免疫组大鼠在免疫3、4、5周心肌组织发生明显凋亡,caspase-3,8活性增高,免疫7、9周心功能明显下降,对照组未见异常。结论：抗β1-AR自身抗体可能通过激活死亡受体途径促进在体大鼠的心肌细胞发生凋亡,最终引起心功能下降。     

抗人角蛋白全IgG基因真核表达载体的构建及表达

目的：构建抗角蛋白抗体基因的真核表达载体，并在CHO(dhfr^-)细胞中表达。方法：从含抗角蛋白抗体基因的原核Fab表达载体中，扩增VH及VL基因。以回收的PCR产物为模板，用重叠PCR扩增带有前导序列的VH、VL基因。经XbaⅠ/BamHⅠ和XhoⅠ/HindⅢ酶切后，分别插入真核表达载体pWD中，构建重组载体pWDkH。经PCR和测序鉴定正确后，用lipofectAMINE2000转染CHO(dhfr^-)细胞。取培养上清检测抗人角蛋白全IgG的表达。结果：构建了抗人角蛋白基因的真核表达载体pWDkH，并在CHO(dhfr^-)细胞中表达：结论：在CHO(dhfr^-)细胞中成功地表达了具有抗原结合活性的抗人角蛋白IgG，为其临床应用奠定了基础。     

Graves病患者TRAb与抗TSHAb抗体关系的初步研究

根据自身免疫性甲状腺疾病发病机制的独特型－抗独特型免疫免疫学说，用兔抗人ＴＳＨＡｂ检测ＴＳＨ抗独特型抗体（ＴＳＨＡｂ２）。以正常人为对照，以其结合率＾－ｘ＋２ｓ为正常值上限，大于此值为阳性。６０例ＴＲＡｂ阳性病人，６５％病人ＴＳＨＡｂ２阳性，而４０例ＴＲＡｂ阳性病人中，只有５％病人ＴＳＨＡｂ２阳性。两组差异显著（Ｐ〈０．０５）。ＴＲＡｂ和ＴＳＨＡｂ２呈正相关（ｒ＝０．６４５，Ｐ〈０．０１）。同时用     

Expression of Cytochrome P450nor in Escherichia coli , Purification and Preparation of Polyclonal Antibodies

The term “cytochrome P450” was characterized of aunique 450 nm optical absorption peak of its carbon mon oxide bound form. Cytochrome P450s constitute a super gene family of heme containing proteins that are involvedin the metabolism of a variety o…     

甲亢患者TGA、TMA阳性率观察

延边地区女性甲亢患病率明显高于男性。多数研究表明，甲亢发病与自身免疫有关。为了了解延边地区女性与男性甲亢患者的甲状腺球蛋白抗体（TGA）和甲状腺微粒体抗体（TMA）自身抗体的阳性率，为甲亢高发原因及防治提供依据，我们对本地区女性与男性甲亢患者进行了血清TGA、TMA测定。