乙肝病毒外膜大蛋白检测在阿德福韦抗病毒治疗中的应用

目的 通过检测抗病毒治疗患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)和病毒载量(HBV-DNA),探讨阿德福韦抗病毒治疗过程中HBV-LP与HBV-DNA的关系,观察HBV-LP用于评估抗病毒治疗效果的应用价值.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对HBV-LP进行检测;采用荧光定量PCR方法对HBV-DNA进行检测.结果 抗病毒治疗有效组患者HBV-DNA和HBV-LP下降趋势一致;抗病毒治疗无效组患者HBV-DNA始终没有出现阴转,HBV-LP的含量维持在较高水平;抗病毒治疗效果反复组患者HBV-LP的含量维持较高水平或变化不明显,HBV-DNA则出现暂时阴转.结论 动态监测HBV-LP的含量可用于阿德福韦抗病毒治疗效果的评估.     

新疫苗可预防肺感染

假单胞铜绿菌素菌属是一种引起呼吸系统感染的细菌，它能通过形成肺纤维化威胁患的生命。因此开发疫苗预防这种细菌感染显得很重要。研究人员使用一个被修正的称为OprF的腺病毒引导疫苗表达这种细菌外膜的一个区域，这个区域先前已经确定为疫苗载体。接受疫苗免疫的老鼠能产生抗体，而抗体能保护老鼠免受致命剂量的细菌感染。并且老鼠能重复产生疫苗和不断地杀死假单胞铜绿菌素菌。     

高频超声在诊断腕管综合征中的应用

目的：探讨高频超声在腕管综合征诊断中的应用价值。方法：对16例19侧腕管综合征行超声检查，计算正中神经肿胀率(MNSR)和扁平率(MNFR。结果：13例15侧正中神经在进入腕管处增粗，腕管内正中神经回声模糊，而外膜回声增强，诊断符合率79％。结论：超声检查对腕管综合征的诊断及明确病因均有重要意义。     

艾滋病病毒外膜蛋白与干扰素融合基因表达产物的免疫学研究

为了将艾滋病病毒外膜蛋白(env)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠，观察小鼠的免疫功能状态和细胞免疫应答，将IFNα-2b基因片段插入到env基因的下游，经脂质体转染，筛选重组痘苗病毒，经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。用重组病毒vJ16env／IFNα-2b免疫小鼠，以生理盐水和野生型痘苗病毒作为对照，检测小鼠脾淋巴细胞对ConA、LPS及IgG的反应性；用流式细胞仪测定小鼠脾细胞CD4^+、CD8^+T细胞计数与CTL。结果表明，与对照组比较，实验组脾淋巴细胞对ConA、LPS及IgG的反应性显著增高(P&;lt;0．05)；CD4^T淋巴细胞计数和CTL活性也显著增高(P&;lt;0．05)；CD8^T淋巴细胞计数呈增高趋势，但未达到显著意义的程度。结论：重组病毒vJ16env／IFNα-2b能增强小鼠的免疫功能和诱导细胞免疫。     

不可分型流感嗜血杆菌的特性及抗原筛选研究进展

不可分型流感嗜血杆菌(nontaxable Haemophilus influenzae,NTHi)是一类没有荚膜的革兰阴性球杆菌,常寄居于人类上呼吸道,是重要的机会致病菌,能引起人类中耳炎、肺炎及反复发作的呼吸道感染等.目前还没有一种预防这种病原菌感染的疫苗,随着近几年抗生素的滥用,细菌的耐药性问题越发突出,这就使开发一种安全有效的疫苗显得尤为重要.此文对NTHi的致病性、菌株特点及其抗原筛选的研究进展作一概述.     

乙肝病毒大蛋白与前S1抗原在乙肝诊断中的相关性及临床意义

乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)存在于感染性Dane颗粒和亚病毒颗粒上,具有双重跨乙膜拓扑结构,并可反式激活细胞内HBV的复制,与HBV的感染、复制及其预后密切相关[1]。大蛋白上横跨部分前S1和前S2区的AA99-169形成环状Loop区,具有众多的免疫表位,对病毒粒子的形成具有重要     

不定型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的表达纯化及其在儿童血清中的抗体水平检测

目的建立不定型流感嗜血杆菌(NTHi)外膜蛋白P6原核表达系统并表达纯化P6,探索其在不同年龄儿童血清中的抗体水平。方法采用PCR扩增NTHi ATCC49247的P6基因pal,构建NTHi P6原核表达系统,采用亲和层析法纯化NTHi P6。血清P6抗体检测采用ELISA法,检测对象为2013年10~12月到杭州师范大学附属医院体检的儿童228例。组间抗体水平比较采用非参数检验。结果本研究所构建的原核表达系统能有效表达重组P6蛋白,该重组蛋白有可溶性形式存在,但包涵体较多。ELISA结果显示,1岁组P6抗体水平较低,中位数为9 904ELISA单位,1~3岁组则最高,中位数12 731ELISA单位,两者差异有统计学意义(Z=2.111,P=0.035);1~3岁组血清P6抗体水平显著高于4~6岁组(中位数10 237ELISA单位,Z=2.015,P=0.044),后者又显著高于7~14岁组(中位数7 207ELISA单位,Z=3.546,P0.01)。结论本研究构建的原核表达系统能表达可溶性重组P6,1~3岁儿童血清中P6抗体水平最高,可能与该年龄段NTHi感染率高有一定关系。     

临床分离多重耐药假单胞菌耐药机制的研究

为了解假单胞菌对亚胺培能（ＩＭＰ）、头孢他啶（ＣＴＺ）、头孢哌酮（ＣＰＺ）和氨曲南（ＡＺ）的耐药机制。以绿脓杆菌标准株ＰＡＯ１和对照株ＴＮＰＯＯ４为对照，应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ外膜蛋白图谱和β－内酰胺酶测定方法，研究了临床分离的两株多重耐药绿脓杆菌和一株ＩＭＰ耐药荧光假单胞菌。结果表明：两株绿脓杆菌分离株均缺失了外膜蛋白ＯｐｒＤ＿２和外膜蛋白Ｅ（ＯｐｒＥ），并出现了４４．７ＫＤ的未知蛋白带；两株菌均产生了较高水平的β－内酰胺酶，其酶活性分别为０．６８１Ｕ／ｍｇ和０．６ｌ０Ｕ／ｍｇ，经ＩＭＰ诱导，两株菌产酶量未见显著增加；其β－内酰胺酶对上述药物的相对水解率均小于１０％。提示该两株绿脓杆菌对上述药物的多重耐药机制可能是ＯｐｒＤ＿２、ＯｐｒＥ的缺失和大量β－内酰胺酶的共同作用结果；其中对ＩＭＰ耐药的主要原因可能是ＯｐｒＤ＿２丢失。另一株ＩＭＰ耐药荧光假单胞菌出现了ＯｐｒＤ＿２含量的减少。     

体外膜氧合疗法治疗肾综合征出血热合并急性呼吸衰竭

肾综合征出血热是以全身小血管损害为主要表现的地方性急性传染病，病情来势凶猛，病死率高，随着对该疾病认识的不断深入，病死率也在不断降低，然而，由该病所致的肺损害一直是难以攻克的难题，目前仍是该病致死的主要原因。肾综合征出血热急性肾功能衰竭和急性呼吸衰竭常并存，我们在人工肾血液透析治疗过程中加用体外膜氧合疗法（extra corporeal membrane oxygenation，ECMO）以辅助呼吸，     

Ifi204基因表达对大鼠血管外膜成纤维细胞凋亡和迁移的影响

目的探讨ifi204基因过表达与沉默对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAF)凋亡和迁移的影响。方法原代培养大鼠VAF,利用携带ifi204基因的慢病毒颗粒或空载体慢病毒颗粒感染VAF,分别作为实验组(ifi204 lv组)和阴性对照组(blank lv组)。用ifi204基因小干扰RNA瞬时干预VAF使其沉默(ifi204 siRNA组)、空白小干扰RNA作为阴性对照组(control siRNA组),未经处理的VAF作为空白对照组(negative组)。流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞划痕法和Transwell法测定细胞迁移情况,用real-time PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白表达。结果与blank lv组、control siRNA组、ifi204 siRNA组和negative组相比,ifi204 lv组的P204、P53 mRNA和蛋白表达及细胞凋亡率明显上调(P0.05),细胞迁移速度降低(P0.05)。转染ifi204 siRNA可抑制P204、P53的mRNA和蛋白表达(P0.05),提高细胞活力,抑制细胞凋亡(P0.05),加快细胞迁移速度(P0.05)。结论 ifi204基因表达对大鼠VAF细胞凋亡和迁移的影响可能与激活P53表达有关。