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991.
992.
993.
A. S. Monaghan D. L. Baines P. J. Kemp R. E. Olver 《Pflügers Archiv : European journal of physiology》1996,433(3):294-303
K+ currents in alveolar type II cells, isolated from fetal guinea-pig lung, were studied using the whole-cell patch-clamp technique.
Inwardly rectifying (IR) K+ currents were observed when cells were bathed in symmetrical KCl-rich solutions. When extracellular K+ was replaced by Na+, inward currents were greatly decreased and the zero-current potential moved from 0 mV to –69 mV, indicating high K+ selectivity. In recordings with an intracellular KCl-rich solution, containing 1.12 mM Mg2+ and 10–8 M free Ca2+, IR K+ currents slowly diminished with time. Addition of the irreversible G protein activator, guanosine 5’-O-(3-thiotriphosphate) (GTP [γ-S]), to the intracellular solution accelerated the rate of current run-down. In experiments
where the intracellular solution was Mg2+ free, current run-down was abolished. The rate of current run-down was found to increase with increasing free intracellular
[Mg2+]. Raising the intracellular free [Ca2+] to 10–6 M under Mg2+-free conditions had no effect on the K+ currents. Extracellular Ba2+ blocked the IR K+ currents in a concentration- and voltage-dependent manner. Tolbutamide, a blocker of ATP-sensitive K+ (KATP) channels, had no effect on the currents. The single channel underlying the whole-cell IR K+ currents displayed inward rectification and had a conductance of 31 pS in symmetrical KCl-rich solutions. We demonstate that
mRNA coding for IRK1 is expressed in this cell preparation. Possible functions for this channel are discussed.
Received: 28 June 1996 / Received after revision and accepted: 9 September 1996 相似文献
994.
目的建立一种以细菌染色体上1个已知拷贝管家基因作为基准、通过荧光定量PCR检测其他被检基因拷贝数的方法.方法利用荧光定量PCR检测El Tor型霍乱弧菌染色体上目的基因zot与基准基因thyA的Ct(threshold cycle)值差值,根据已知拷贝数菌株N16961的两基因Ct值之差来推算待测菌株中zot基因的拷贝数.结果利用thyA基因作参照,确定11株E1 Tor型霍乱弧菌中zot基因的拷贝数在1~5个之间,对较少拷贝数的检测与Southern blot确认的相同,对多拷贝数检测优于Southern blot的判定.结论本方法可以准确检测菌株染色体上的基因拷贝数. 相似文献
995.
目的 探讨Ⅰ型登革病毒感染后病毒核酸及其IgM抗体在患者体内的变化规律,为指导临床快速、准确地诊断登革热提供理论支持.方法 回顾性分析2014年7-11月收集的Ⅰ型登革病毒感染者临床资料和血清标本,应用实时荧光定量RT-PCR和ELISA法分别检测病毒核酸和IgM抗体,分析不同病程两者的变化规律.结果 共检出222例阳性患者,其中病毒核酸阳性137例,IgM抗体阳性146例,两者同时阳性61例.病程急性期(发病l~5d)病毒核酸阳性率为75% ~ 100%,IgM抗体阳性率在发病第1~2天较低,但第3~5天快速升高至50% ~ 70%;进入恢复期(发病6~10 d)病毒核酸阳性率即快速降低,8d后仅20%左右,但IgM抗体阳性率显著升高达95%~100%.急性期和恢复期病毒核酸与IgM抗体检测结果构成比差异有统计学意义(x2=63.41,P<0.05).结论 Ⅰ型登革病毒感染者急性期病毒核酸阳性率在75%以上.恢复期IgM抗体阳性率在95%以上.根据病程合理选择检测方法,可提高登革热的诊断效率. 相似文献
996.
目的研究芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及其作用机制。方法体外培养人皮肤成纤维细胞,MTT法测定芦荟凝胶作用后人皮肤成纤维细胞的增殖能力,用实时荧光定量PCR法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平,用免疫蛋白印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果 MTT检测结果表明,芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞具有促增殖作用,且呈现时间依赖性和剂量依赖性。芦荟凝胶作用于人皮肤成纤维细胞72h后,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论芦荟凝胶可通过促进人皮肤成纤维细胞增殖以及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达加速创面愈合。 相似文献
997.
998.
999.
目的:了解E-cadherin在舌癌中的表达及其临床意义.方法:采用实时定量PCR检测29例舌鳞癌患者的癌组织和正常组织中E-cadherin mRNA,分析E-cadherin基因表达与临床病理参数的相关性.结果:舌癌组织中E-cadherin mRNA表达水平2.23±1.16(E-cadherin/β-actin),低于正常组织组8.59±2.71,两组间差异有统计学意义(P<0.01),E-cadherin mRNA水平与临床病理参数之间无相关性(P>0.05).结论:E-cadherin的表达下降是舌癌发生过程中的重要事件,实时定量PCR检测E-cadherinmRNA的表达对舌癌早期诊断有重要参考价值. 相似文献
1000.
目的 建立阿尼昂尼昂病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法。方法 针对阿尼昂尼昂病毒nsP1基因设计特异性引物和探针,以珠海国际旅行卫生保健中心之前构建的MS2病毒样颗粒为标准品,采用一步法建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的检测下限、特异性、精密度、抗干扰能力、符合率进行评价。结果 建立的阿尼昂尼昂病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法线性良好(线性方程Y=-3.746X+46.174,R2=0.988),检测下限为103 copies/mL,低于之前文献报道的检测下限;能特异性地扩增阿尼昂尼昂病毒基因片段,而对其他相关病原体,包括同属于甲病毒属的基孔肯雅病毒、引起类似症状的登革病毒和马雅罗病毒、共用同一媒介宿主的疟原虫等无非特异性扩增;精密度良好,批内精密度测试时Ct值为32.92~35.40,变异系数CV 为2.10%;批间精密度测试时Ct值为31.89~35.49,变异系数CV为3.41%;在存在溶血、脂血等干扰因素时Ct值与正常样本的Ct值差值分别为0.37、0.71,表明其能有效对抗溶血、脂血等干扰因素的影响;盲样检测时能检出4例阳性和12例阴性,同预期结果完全一致,阴阳性符合率可达100%。结论 本研究建立的检测方法,灵敏度高、特异性好、精密度高、抗干扰能力强,可为阿尼昂尼昂病毒检测提供可行的方法。 相似文献