儿童RRTIsT细胞亚群和NK细胞的变化分析

目的了解3～6岁儿童反复呼吸道感染（RRTIs）T细胞亚群及自然杀伤细胞（NK）的变化,指导临床预防用药,避免过度以及不当治疗。方法严格按照入选标准和剔除标准收集3～6岁儿童160例,其中：病例组73例,对照组87例。采用病例对照研究。用流式细胞仪对病例组和对照组分别进行T细胞亚群、NK细胞的检测,并对有关数据进行统计分析。结果对T细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋）进行两独立样本的Wilcoxon秩和检验,结果表明：CD3＋（Z=-1．588,P=0．112）、CD4＋（Z=-0．541,P=0．588）、CD8＋（Z=-0．733,P=0．463）、CD4＋／CD8＋（Z=-0．315,P=0．753）病例组和对照组比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。对NK细胞（CD3-CD16＋CD56＋）进行t＋检验（t＇=2．779,P=0．006〈0．05;95％CI：0．674～4．003）,病例组和对照组比较差异有统计学意义。结论对RRTIs儿童检测T细胞亚群与NK细胞具有显著的临床指导意义,可避免过度使用免疫调节剂引起的用药不当。     

塞来昔布联合 NK 细胞对裸鼠人肝癌皮下移植瘤生长的影响

目的：观察塞来昔布联合NK细胞对裸鼠人肝癌细胞SMMC-7721皮下移植瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法选择裸鼠40只,制备人肝癌细胞SMMC-7721移植瘤模型,随机分为对照组、NK细胞组、塞来昔布组及联合干预组各10只。 NK细胞组瘤内注射NK细胞悬液0．6 mL,每7 d注射1次,共注射5次;塞来昔布组从接种后第3天起给予塞来昔布100 mg/kg灌胃,每天1次,连续35 d;联合干预组同时给予塞来昔布和NK细胞,给药剂量及途径与单用组相同;对照组灌胃和瘤内注射等量生理盐水。35 d后切取移植瘤组织计算体积,称取瘤质量,并计算抑瘤率;TUNEL法评价肿瘤细胞凋亡情况,免疫组化法检测肿瘤内VEGF、Bax、Bcl-2、caspase-3、Ki-67、NF-κB的阳性表达。结果联合干预组移植瘤体积、肿瘤质量均明显低于单用组（ P均＜0．05）,抑瘤率、凋亡指数明显高于单用组（ P均＜0．05）。联合干预组移植瘤中VEGF、Bcl-2、NF-κB、Ki-67表达明显低于单用组（ P均＜0．05）,Bax、caspase-3表达明显高于单用组（P均＜0．05）。结论塞来昔布联合NK细胞可明显抑制裸鼠人肝癌细胞SMMC-7721皮下移植瘤的生长;其作用机制可能是通过促进凋亡级联通路上Bax、caspase-3的表达,抑制VEGF、Bcl-2、NF-κB、Ki-67的表达而实现。     

关注非T淋巴细胞在移植免疫中的作用

<正>天然免疫细胞和获得性免疫细胞均在移植免疫中发挥重要的作用,其中T淋巴细胞毋庸置疑是介导移植免疫反应的"主力军"[1]。然而,大量研究表明许多非T淋巴细胞类细胞也能左右移植物的预后,影响移植免疫耐受的建立,它们在器官移植的各个时期均能单独或者通过与T淋巴细胞的相互作用来改变移植物的"命运"。对这部分细胞亚群进行深入研究将有助于更好地了解移植免疫调     

NK细胞在子宫动脉重塑中的作用

为探讨NK细胞和绒毛外滋养(extravillous trophoblast,EVT)细胞与子宫血管重塑间的关系,采用免疫组化连续切片和动物实验,检测NK细胞及EVT细胞在子宫动脉的浸润情况,并观察不同妊娠阶段子宫动脉的变化。结果显示,孕5～8周的人子宫血管鲜有重塑;孕9～13周的人子宫动脉显示出中等程度的重塑,血管周围有大量NK细胞和少许EVT细胞聚集;孕14～20周以及孕21～28周,子宫血管重塑明显,周围NK细胞较少而EVT细胞明显增多。采用腹腔注射抗asialo GM1血清去除小鼠体内NK细胞,导致小鼠子宫动脉重塑严重受阻,小鼠出现子痫前期(preeclampsia, PE)样症状。提示NK细胞可能通过与EVT细胞协作参与妊娠早期子宫血管重塑,子宫动脉重塑程度与孕周相关。     

Liaison between natural killer cells and dendritic cells in human gestation

A successful pregnancy relies on immunological adaptations that allow the fetus to grow and develop in the uterus, despite being recognized by maternal immune cells. Among several immunocompetent cell types present within the human maternal/fetal interface, DC-SIGN~ dendritic cells （DCs） and CD56＋ natural killer （NK） cells are of major importance for early pregnancy maintenance, not only generating maternal immunological tolerance but also regulating stromal cell differentiation. Previous reports show the presence of NK-DC cell conjugates in first trimester human decidua, suggesting that these cells may play a role in the modulation of the local immune response within the uterus. While effective immunity is necessary to protect the mother from harmful pathogens, some form of tolerance must be activated to avoid an immune response against fetal antigens. This review article discusses current evidence concerning the functions of DC and NK cells in pregnancy and their liaison in human decidua.     

枸杞多糖在白血病患者中的应用及对HL-60和NK细胞杀伤活性的影响

目的探讨枸杞多糖在白血病患者中的应用及对人前髓细胞HL-60表面靶细胞表面相应配体(MICA)蛋白表达水平和自然杀伤(NK)细胞杀伤活性的影响及机制。方法取白血病患者HL-60细胞,随机分为观察1组、观察2组及观察3组,分别放入浓度为6、8、10 mg/ml枸杞多糖共同培养,未经枸杞多糖作用的30例白血病患者HL-60细胞为对照组,采用流式细胞仪测定4组细胞表面MICA蛋白表达水平。将4组获得的溶液与NK细胞相互混合,20 h后采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测NK细胞对4组HL-60细胞的杀伤活性进行测定。结果观察1组MICA表达率显著低于观察2组、观察3组(P<0.05);观察1组、观察2组、观察3组MICA表达率高于对照组(P<0.05);随着靶细胞、效应细胞比的不断增加,4组NK细胞杀伤活性均出现上升趋势;观察1组、观察2组及观察3组NK细胞杀伤活性高于对照组(P<0.05);观察3组NK细胞杀伤活性,高于观察1组、观察2组(P<0.05)。结论白血病患者体内HL-60细胞在枸杞多糖的孵育下能提高细胞MICA表达率,且呈浓度正相关性。同时,枸杞多糖能提高机体内NK细胞的杀伤活性,能清除微小病灶。     

肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群的变化

肺癌是我国常见的恶性肿瘤,是严重危害人类生命健康的主要疾病之一。目前肺癌的治疗手段仍以手术为主,因而研究肺癌患者手术前后机体细胞免疫功能的变化有着重要的临床意义。目前有研究发现,恶性肿瘤的形成和发展与宿主的细胞免疫功能密切相关。恶性肿瘤患者常存在机体免疫平衡失调,且以细胞免疫功能为主,表现为外周血T淋巴细胞的抑     

生殖器疱疹患者超氧化物歧化酶活力及自然杀伤细胞表达的检测

目的 研究生殖器疱疹患者氧化应激状态与细胞免疫水平.方法 收集24例生殖器疱疹患者和24例正常对照者的血清,采用透射比浊法测定超氧化物歧化酶的活力,流式细胞仪检测外周血自然杀伤细胞的表达水平.结果 生殖器疱疹患者超氧化物歧化酶活力明显低于正常对照者(t=-4.14,P=0.0001),自然杀伤细胞的表达水平明显低于正常对照组(t=-2.67,P=0.0133),患者超氧化物歧化酶活力与自然杀伤细胞的表达水平无显著相关性(r=-0.02566,P= 0.9170).结论 生殖器疱疹患者存在氧化应激状态失衡,免疫功能低下.     

慢性乙型肝炎病毒感染患者自然杀伤细胞IFNγ的表达与病情的关系

目的探讨自然杀伤细胞IFNγ的表达与慢性乙型肝炎(CHB)患者病情变化的关系。方法采用流式细胞术胞内细胞因子染色法,检测慢性乙型肝炎患者外周血中自然杀伤细胞分泌IFNγ的水平。结果慢性乙型肝炎活动组NK细胞的水平为(4.08±2.75)%;显著高于慢性乙型肝炎稳定组(2.37±1.13)%及对照组(1.27±0.39)%;慢性乙型肝炎稳定组与对照组比较,NK细胞差异有统计学意义;治疗后,未缓解组NK细胞分泌IFNγ的水平为(4.89±2.66)%,显著高于缓解组(2.24±1.47)%。结论慢性乙型肝炎的炎症与自然杀伤细胞的IFNγ高表达存在一定的关系。     

NK细胞对人鼻咽癌细胞CNE2裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

 目的 研究同种异体NK细胞对人鼻咽癌细胞（CNE2）裸鼠皮下移植瘤的抑制作用。方法PCR-SSP法检测CNE2细胞HLA-A、B、Cw表型、NK细胞KIR表型（选择3例健康者为试验对象）,磁珠分离法分离NK细胞并进行体外培养扩增,LDH释放法测定NK细胞对CNE2细胞的体外杀伤活性。12只BALB/c裸鼠分为两组,每组6只,对照组裸鼠每只皮下接种1×106CNE2细胞,治疗组裸鼠每只皮下接种1×106CNE2细胞,同时每只经尾静脉注入3×107NK细胞,观察两组裸鼠成瘤时间、成瘤率、肿瘤体积变化、计算抑瘤率。结果 CNE2细胞表面HLA-A、B、Cw表型为A2,24;B18,35;Cw4,7,3例健康者均表达KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1、KIR3DL2。效靶比5∶1、10∶1、20∶1、30∶1时,NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性分别为（9.37±2.14）%、（27.14±1.82）%、（36.40±4.28）%and（54.67±2.80）%。对照组和NK细胞治疗组肿瘤出现时间分别为（10.00±2.68）d、（18.80±1.64）d,（P〈0.01）,成瘤率分别为100%（6/6）、83.33%（5/6）,对照组和NK细胞治疗组裸鼠的瘤重分别为（2.22±0.09）g、（1.42±0.09）g,（P〈0.01）,NK治疗组的抑瘤率为36.04%。肿瘤组织石蜡切片病理学鉴定为低分化鳞状上皮细胞癌,NK细胞治疗组可见角化肿瘤细胞,较多的淋巴细胞浸润和大量细胞坏死区。结论 NK细胞对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,有希望成为治疗鼻咽癌的新方法。