单因素法筛选恩拉霉素发酵培养基

目的 寻找合适的因素和水平,使响应面法优化恩拉霉素发酵培养基时得到较高效价.方法 通过单因素试验,使用干燥滤纸片法优化积累恩拉霉素的摇瓶培养基,即碳氮比、无机盐和生长因子.结果 得到X24培养基,即玉米粉7.50％、葡萄糖0.50％、黄豆粉3.00％、硫酸铵0.40％、玉米浆粉2.00％、硫酸亚铁0.01％、L-乳酸0.20％、碳酸钙0.50％、豆油0.05％、耐高温α-淀粉酶0.07％.该培养基测得最终效价为4 046 u/g,略高于市售恩拉霉素预混剂的效价.结论 此次筛选为下一步培养基的响应面优化打好基础,同时原料易得、配方简便,可满足实验室使用的需求.     

微生物检测中培养基的制备及注意事项

制备培养基是细菌培养中不可缺少的工作,培养基的质量是微生物检测工作的基础。培养基的好坏,培养细菌时选择培养基类型是否恰当,都直接关系到检测结果的准确性、可靠性。因此,培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作中的重要环节。培养基是用人工方法配制细菌生长所需要的营养物质[1]。培养基的种类繁多,在配制过程中,不注意方法,常会使配制过程变得非常繁琐,而且易导致细菌培养失败。本人根据多年实践经验,对培养基配制过程中的一些技巧及注意事项总结如下,以便微生物实验室不断完善和提高培养基的配制水平,为检测工作提供高质量的培养基,从而保证检测结果的科学有效。     

腹泻患者及培养基中人芽囊原虫的各期形态研究

目的研究光镜下各期人芽囊原虫(Blastocystishominis,B.h)形态,以进一步研究其生活史及致病性,并为临床检验提供形态依据。方法使用洛克氏液-鸡蛋-血清培养基,对腹泻患者粪便的B.h进行体外连续培养,经碘液染色及铁苏木素染色,在光镜下研究其各期形态、结构。结果通过形态学研究观察到空泡型、颗粒型、阿米巴型及包囊型以及各型之间的相互转化。结论B.h形态多样,临床多见空泡型和颗粒型。空泡型可成囊。     

李斯特氏菌的选择培养基和分离方法

李斯特氏菌病是由李斯特氏菌引起的一种严重影响人和动物健康的传染性疾病。其病原菌广泛分布于自然界。自发现以来已从人和40多种动物的粪便以及环境等多种标本中分离到了该菌。该菌的生存力较强,可在低温下生长,能抵抗25％的NaCl。并能在原虫体内生存和繁殖。野生和家养动物被认为是该     

两种培养基对病原性耶尔森氏菌检测的效果观察

目的 观察VYE和IN培养基检查病原性Yersinia(耶尔森氏菌)属菌的作用效果。方法 通过VYE和IN培养基培养后挑选可疑菌落进行生化鉴定实验，鉴别病原性Yersinis属菌。结果 VYE培养基检出率比IN培养基高，二并用于病原性Yersinia属菌很容易与非病原性Yersinia属菌区别。结论 VYE和IN两种培养基并用，方法简便易行，建议推广应用。     

阴道毛滴虫在两种培养基中的生长与形态观察

目的通过对改良肝浸汤培养液及RPM11640培养基内阴道毛滴虫生长情况的观察，选择适合教学和科研的培养基。方法用临床分离的阴道毛滴虫标本，分别接种至改良肝浸液及RPM11640两种培养基内进行培养，pH值为5．6～5．8，通过计数了解生长情况并观察阴道毛滴虫的形态。结果肝浸汤培养液中培养48h，阴道毛滴虫达到生长高峰，虫体呈现出多分裂相，虫体变大、呈圆形，内含4～12个细胞核，细胞膜外缘可见数丛鞭毛。RPM11640培养基中阴道毛滴虫72h达到生长高峰，虫体密度约为肝浸液高峰期的2／3，未见多分裂现象，虫体与生理盐水涂片中阴道毛滴虫形态、大小相近。结论改良的肝浸液培养基适于阴道毛滴虫的药物试验及其他实验项目的研究，RPM11640培养基更适用于教学、标本的制作及实验室保种工作。     

不同培养基和胰蛋白酶对Vero细胞培养及消化效果的比较

目的 比较不同公司生产的无血清培养基对病毒性疫苗生产用Vero细胞培养效果,及基因工程胰蛋白酶的细胞消化效果,以判断是否适用。方法 实验组用VirusPro Vero-A培养基进行Vero细胞的培养,用Trpzyme消化细胞。对照组用VP-SFM培养基进行细胞培养,用TrypLE Select消化细胞。两组Vero细胞以相同密度接种在T175培养瓶中,以相同的培养条件和传代方法在T175瓶和细胞工厂中各培养3代。培养期间观察细胞的上清液、形态以及汇合度,消化后检测细胞活率并计算细胞收获量。采用配对t检验比较两组消化液的pH值、总消化时长、37 ℃消化孵育时长、细胞活率以及细胞收获量。结果 两组细胞生长状态均良好。配对t检验显示,实验组消化液的pH值（6.99）、总消化时长（17.28 min）和37 ℃消化孵育时长（6.93 min）均值均大于对照组消化液的（分别为6.75、12.34 min、3.30 min）,细胞活率（94.79%）及细胞收获量（T175瓶：3.91×10⁷个;细胞工厂：1.90×10⁹个）均值均高于对照组的（分别为90.20%、3.33×10⁷个、1.26×10⁹个）,且差异有统计学意义（t值分别为9.17、3.46、2.98、2.31和4.38,P值均<0.05）。结论 实验组无血清培养基培养效果较好,基因工程胰蛋白酶细胞消化液温和、细胞损伤小,均适用于Vero细胞。     

难辨梭菌鉴定培养基临床应用评估

目的评估难辨梭菌鉴定培养基(CDIF)的应用价值。方法用方法学评估研究。对临床收集的255份粪便标本同步进行CDIF培养基和环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂培养基(CCFA)培养,并对CDIF培养基上的所有菌株及CCFA培养基上的典型菌株进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定。结果 255份粪便标本中,经CDIF培养24 h后出现典型菌株64株,经质谱鉴定为难辨梭菌58株;另有3株无色透明菌落的菌株被质谱鉴定为难辨梭菌。以质谱鉴定结果为参考,CDIF培养基对难辨梭菌鉴定的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为95.1%(58/61)、96.9%(188/194)、90.6%(58/64)和98.4%(188/191)。CCFA培养48 h后生长的典型菌株经质谱鉴定为难辨梭菌61株。CDIF培养基和CCFA培养基上经质谱鉴定为难辨梭菌的菌落中,分离单一菌种比例分别为80.3%(49/61)和77.0%(47/61);CDIF培养基上菌落生长密度高于CCFA培养基。结论 CDIF培养基具有快速准确、操作简便、成本较低的特点,为难辨梭菌感染的实验室诊断提供了新的选择。