贵阳地区儿童重症社区获得性肺炎肺泡灌洗液病原及药敏分析

目的分析贵阳地区儿童重症社区获得性肺炎支气管肺泡灌洗液（BALF）病原学分布及耐药特点。方法收集989例重症社区获得性肺炎患儿临床资料，将支气管肺泡灌液采用支气管镜取出进行细菌培养、病毒以及肺炎支原体(MP)检测。结果（1）989例重症社区获得性肺炎患儿病原检出阳性716例，阳性率72.40%，细菌、病毒、支原体检出率分别33.27% （329例）、22.45%（222例）、31.45%（311例）。（2）细菌感染中的肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌为最为常见的革兰阳性菌株(G+)；而肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌为最为常见的革兰阴性菌株(G-)。培养菌株对青霉素类、红霉素、第1、2、3代头孢类抗生素有较高的耐药性，对头孢吡肟、拉氧头孢、哌拉西林、左氧氟沙星有较高的敏感性，对亚胺培南、万古霉素、利奈唑烷均无耐药发生。（3）病毒感染检出222例，其中呼吸道合胞病毒131例，腺病毒检测49例，流感病毒6例（A型2例，B型4例），副流感病毒36例（1型3例、2型4例、3型29例），病毒检出率以0～12月龄组最高，RSV、ADV感染主要集中在冬春季节。（4）肺炎支原体检出阳性率31.45%（311例），肺炎支原体检出率以3～5岁组最高。结论贵阳地区重症肺炎中肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌为重要的细菌病原。重要病毒为腺病毒和呼吸道病毒为主，1～12月龄组的病毒感染检出率比较高。     

Reflection of neuroblastoma intratumor heterogeneity in the new OHC-NB1 disease model

Accurate modeling of intratumor heterogeneity presents a bottleneck against drug testing. Flexibility in a preclinical platform is also desirable to support assessment of different endpoints. We established the model system, OHC-NB1, from a bone marrow metastasis from a patient diagnosed with MYCN-amplified neuroblastoma and performed whole-exome sequencing on the source metastasis and the different models and passages during model development (monolayer cell line, 3D spheroid culture and subcutaneous xenograft tumors propagated in mice). OHC-NB1 harbors a MYCN amplification in double minutes, 1p deletion, 17q gain and diploid karyotype, which persisted in all models. A total of 80–540 single-nucleotide variants (SNVs) was detected in each sample, and comparisons between the source metastasis and models identified 34 of 80 somatic SNVs to be propagated in the models. Clonal reconstruction using the combined copy number and SNV data revealed marked clonal heterogeneity in the originating metastasis, with four clones being reflected in the model systems. The set of OHC-NB1 models represents 43% of somatic SNVs and 23% of the cellularity in the originating metastasis with varying clonal compositions, indicating that heterogeneity is partially preserved in our model system.     

NRP-1单克隆抗体对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的影响

 目的 探讨NRP-1单克隆抗体（NRP-1 MAb）的特异性，以及不同剂量的NRP-1 MAb治疗乳腺癌裸鼠移植瘤的疗效。方法 Western blot和共聚焦免疫荧光法检测NRP-1 MAb是否识别MCF7细胞上NRP-1蛋白。将MCF7细胞接种于BALB/c裸鼠皮下建立乳腺癌细胞移植瘤模型，并进行瘤组织传代。传代的肿瘤体积生长至300~500 mm3时，随机分为对照组、NRP-1 MAb低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组6只，给药7次。观察荷瘤裸鼠一般状况，测量瘤体大小及裸鼠体重。实验结束时剥离瘤体称重，提取组织蛋白，Western blot检测组织中VEGF蛋白和NRP-1蛋白的表达量。结果 NRP-1MAb成功识别MCF7细胞上的NRP-1蛋白；NRP-1 MAb能够有效抑制MCF7细胞裸鼠移植瘤的生长，低剂量组（1 mg/kg）抑瘤率为47.01%，中剂量组（5 mg/kg）抑瘤率为65.70%，高剂量组（10 mg/kg）抑瘤率为69.19%。。结论 NRP-1 MAb能够识别并有效结合MCF7细胞膜上的NRP-1蛋白，且可抑制MCF7细胞移植瘤的生长，NRP-1 MAb抑制移植瘤的增长可能与下调NRP-1和VEGF表达有关。     

程序性死亡蛋白-1抗体治疗晚期胃癌的临床研究新进展

目前化疗仍为晚期胃癌的标准治疗手段,而多数患者诊断时已接近晚期。近年新兴的免疫治疗手段程序性死亡蛋白-1(PD-1,programmed death l)抗体,通过阻断肿瘤细胞逃避自身免疫机制,重新激活自身免疫对肿瘤的杀伤作用,从而达到肿瘤的治疗作用。针对晚期胃癌的PD-1抗体治疗的临床研究已在国内外开展,大部分均有较好效果。本文对近年免疫治疗中的PD-1抗体在晚期胃癌的重要临床研究进展进行介绍。     

基于频数分析法的骨伤科中成药用药规律研究

目的：探讨骨伤科中成药的用药规律，为临床合理用药及新药开发提供参考。方法：以《中国药典》2015年版一部收载的骨伤科类中成药共149个为研究对象，运用频数分析的方法研究其主治病症、所用剂型、各类方剂高频药物、核心药物组成，分析骨伤科中成药用药规律。结果：常用骨伤科中成药中治疗骨关节痹症的最多，其次为跌打损伤和骨关节退行性疾病的中成药；剂型以胶囊剂、片剂、丸剂为主；以活血化瘀药、祛风湿药、补虚药为核心药物组合，各类方剂中三者比例偏重不同。结论：通过对研究结果进行分析，提出了新药研发的方向。     

Academic–Industrial Collaboration: Toward the Consilience of Two Solitudes

Current major advances in drug discovery can be traced back to pioneering contributions originating from academics over a century ago. Living in a symbiotic yet noninvasive coexistence, the academic community and the pharmaceutical industry have strived, each in their own way, to develop the modern medicines that benefit humankind today. The subject is presented from a historical and personal perspective.     

益气化瘀解毒方对MRP、GST-π和Topo Ⅱ基因在Sorafenib获得性耐药人肝癌QGY7702细胞表达的干预研究

目的探讨益气化瘀解毒方干预后对Sorafenib获得性耐药人肝癌QGY7702细胞(QGY7702/Sora)增殖及MRP、GST-π和Topo Ⅱ基因表达的影响。方法培养QGY7702/Sora细胞和QGY7702细胞,利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测Sorafenib对细胞的半数抑制率浓度(IC50值),计算耐药指数RI;观察益气化瘀解毒方对耐药细胞的增殖影响;采用荧光定量PCR检测药物干预前后2种细胞中MRP、GST-π和Topo Ⅱ基因表达水平。结果亲本细胞和耐药细胞Sorafenib的IC50值分别为(7.993±0.522)μmol/L和(19.651±1.216)μmol/L,RI约为2.5。益气化瘀解毒方可抑制耐药细胞的增殖活性。2种细胞的MRP、GST-π、Topo Ⅱ表达量无明显差异(P>0.05)。Sorafenib组可促进耐药细胞MRP 、GST-π基因的过表达(P<0.05),益气化瘀解毒方组可抑制GST-π基因的过表达(P<0.01),且联合Sorafenib可显著提高Topo Ⅱ基因的表达量(P<0.01)。结论 QGY7702/Sora细胞MRP、GST-π和Topo Ⅱ的表达水平与亲本细胞无显著差异。耐药细胞对Sorafenib敏感性降低与MRP、GST-π过表达相关,而益气化瘀解毒方拮抗Sorafenib耐药与抑制GST-π过表达相关。     

皮质发育障碍模型的建立及其致痫敏感性的研究

目的:建立皮质发育障碍模型,探讨皮质发育障碍模型的敏感性。方法:在SD大鼠孕17d腹腔注入1,3-二氯乙烯-亚硝基脲(BCNU)制作皮质发育障碍模型;Nissl染色观察P60d仔鼠病理变化;选取P60d雄性仔鼠,腹腔注射氯化锂-毛果芸香碱,分别比较两组大鼠癫发生的潜伏期、持续状态时间和死亡率。结果:同龄仔鼠脑组织湿重实验组比对照组显著减轻(P<0.01);Nissl染色显示皮质变薄、皮质层次紊乱、海马区域异位细胞异常聚集;有皮质发育障碍的仔鼠注射氯化锂-毛果芸香碱后,癫发生的潜伏期显著缩短(P<0.01),癫持续状态时间延长(P<0.01),死亡率显著升高(P<0.05)。结论:BCNU致皮质发育障碍模型具有癫易感性。     

病原菌结构及耐药性的变化趋势

目的分析解放军总医院304临床部10年来临床感染的病原菌结构及耐药趋势变迁，为临床抗感染治疗提供科学依据。方法统计分析1995-2004年住院患者各类标本分离细菌的鉴定及药敏试验结果。结果革兰阴性菌株占历年收集菌株总数的51．0％～70．2％，以铜绿假单胞菌、大肠杆菌、克雷伯菌属为主，但构成比有下降的趋势；革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌（金葡菌）的分离率最高，其构成比逐年升高，1999年以后成为构成比最高的病原菌，其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）占42．9％～74．5％。此外，不动杆菌属的构成比在1998年明显升高，并在其后维持在较高水平。药物敏感性检测显示MRsA对多种药物呈高度耐药，铜绿假单胞菌和不动杆菌属对各类抗生素的耐药率呈上升趋势。结论金葡菌构成比的增高和大肠杆菌等革兰阴性菌构成比的降低，导致了我院病原菌结构发生明显变化，同时主要病原菌的耐药水平普遍增强，临床医生应根据这一变化相应调整抗感染治疗策略，以取得最佳疗效。