四甲基偶氮唑盐法用于非小细胞肺癌药敏试验条件的筛选

目的筛选非小细胞肺癌药敏试验的条件。方法取25例非小细胞肺癌患者的瘤细胞,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法观察9种化疗药物,在不同浓度、不同时间对瘤细胞的敏感性。结果9种化疗药物对瘤细胞的敏感性,有随着药物浓度的增加、作用时间的延长而增高的趋势,但每个药物都有各自的特点。结论非小细胞肺癌细胞MTT法药敏试验的浓度应为临床用药量的计算值,药物作用时间应以48h为宜。     

HSP70高表达对K_(562)细胞热耐力的影响

用硫酸镉诱导细胞ＨＳＰ７０ 高表达,ＲＴ—ＰＣＲ 检测ＨＳＰ７０ｍ ＲＮＡ 水平并观察ＨＳＰ７０ 水平对细胞热耐力的影响。发现硫酸镉作用于细胞１ｈ 后,细胞的ＨＳＰ７０ 水平显著增高, ＨＳＰ７０ 水平高的细胞其热耐力明显强于ＨＳＰ７０ 水平低的细胞组;ＨＳＰ７０ 水平与细胞热耐力间正相关。提示化学因素诱导的ＨＳＰ７０ 表达增高可以保护热暴露细胞,提高细胞热耐力     

常用抗癌药物对肺癌的体外敏感性研究

目的 :研究常用抗癌药物对肺癌的体外敏感性。方法 :采用四氮甲唑蓝 (MTT)法检测45例人肺癌新鲜标本对15种临床常用化疗药物的敏感性。结果 :肺癌对卡铂、威猛、吡柔比星、顺铂、博来霉素、甲氨蝶呤、羟基喜树碱较敏感 ;不同个体对同一药物的敏感性不同。结论 :化疗药物的敏感性检测对临床选择化疗药物具有重要的参考价值 ,MTT法为临床肿瘤化疗的药物敏感性检测提供了简便、快速的实验方法。     

重组人肝细胞生长因子β链体外生物学活性的测定

目的　建立一种稳定灵敏的方法用于检测重组人肝细胞生长因子β链 (rhHGF β)对原代培养成年大鼠肝细胞的增生作用。方法　利用噻唑蓝 (MTT)比色方法在多种实验条件下对rhHGF β进行生物学活性检测。结果　对于体外原代培养成年大鼠肝细胞 ,rhHGF β可刺激肝细胞的增生 ,且有剂量依赖效应。 结论　确定了原代培养肝细胞检测rhHGF β生物活性的最佳条件方案     

重组人白细胞介素11生物学活性测定方法研究

目的建立重组人白细胞介素 11(rhIL 11)生物活性测定方法。方法运用单克隆方法筛选出rhIL 11敏感细胞株T 10 ,采用溴化四唑蓝比色法进行rhIL 11生物活性测定 ,采用四参数方程对测定结果进行计算。结果以世界卫生组织国际标准品作为参照品 ,与美国Genetics公司rhIL 11上市产品NeumegaTM进行测定比较 ,结果显示国内同类产品与其生物活性一致 ,RSD均小于 10 %。结论此方法可用于rhIL 11生物活性测定     

甘草次酸对血管平滑肌细胞c-fos mRNA表达及细胞增殖的影响

目的　研究甘草次酸 (GA)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)原癌基因c fosmRNA表达及细胞增殖的影响 ,探讨GA与血管紧张素Ⅱ (AⅡ )受体结合的可能机制。方法　原代培养大鼠血管平滑肌细胞 ,[3H]TdR参入DNA、MTT分析法、Northernblot。结果　①低浓度GA( 1× 10 -9mol·L-1)及高浓度GA( 1× 10 -5mol·L-1)均能导致c fosmRNA迅速表达 ;1× 10 -5mol·L-1Sar AⅡ能够阻断AⅡ、GA诱导的VSMCc fos表达 ;低浓度和高浓度GA都能促进AⅡ ( 1× 10 -5mol·L-1)诱导的VSMCc fos表达 ;②低浓度GA对细胞的增殖有促进作用 ;随着浓度的升高 ,促增殖作用减弱 ;高浓度GA抑制细胞的增殖。Sar AⅡ单独作用于VSMC ,不影响细胞增殖 ;Sar AⅡ能够阻断AⅡ对细胞增殖的促进作用 ;Sar AⅡ既抑制低浓度GA促细胞增殖作用 ,也消除高浓度GA抑制细胞增殖作用 ;低浓度GA与AⅡ联合作用 ,对细胞增殖的促进作用更加显著 ;高浓度GA与AⅡ联合作用于VSMC ,则可减轻高浓度GA对细胞增殖的抑制作用。结论　GA能激活c fos转录因子 ,从而产生对VSMC的增殖作用 ,因此 ,GA具有AT1受体的激动剂2 0 0 2 0 4 0 3收稿 ,2 0 0 2 0 7 2 3修回作者简介 :张凤云 ,女 ,33岁 ,硕士 ;贺师鹏 ,男 ,67岁 ,教授。研究方向 :酶和受体的拮抗剂样作用     

几种吡咯里西啶类生物碱对肝细胞毒性的探讨

目的：考察几种吡咯里西啶类生物碱体外实验中对肝细胞的毒性。方法：用MTF法检测了6种吡咯里西啶类生物碱clivorine，monocrotaline，isoline，LP-01(yamataimine)，LP-02(12-acetyl yamataimine)，LJ-09(platyphylline)对人正常肝细胞株L-02细胞活性的影响，对于其中有毒性的clivorine又用结晶紫染色的方法进一步确证其毒性。结果：Clivorine对肝细胞具有强烈的毒性作用，未发现其它几种吡咯里西啶生物碱对肝细胞的毒性。结论：Clivorine体外对肝细胞具毒性作用。     

榄香烯乳对肺腺癌A549细胞hnRNP A2/B1的mRNA及蛋白表达的影响

目的：观察榄香烯乳对人肺腺癌细胞株A549细胞hnRNP A2／B1 mRNA及蛋白表达的影响。方法：选用A549细胞株，应用MTT法检测细胞增殖，显微镜下观察细胞形态变化，逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测hnRNPA2／B1mRNA表达，蛋白印迹法检测hnRNP A2／B1蛋白表达。结果：榄香烯乳对A549细胞体外增殖有显著抑制作用，且呈时间和剂量依赖性，其IC50值为15μg／ml，hnRNPA2／B1mRNA及蛋白表达水平均有下降。结论：榄香烯乳可抑制肺腺癌A549细胞增殖，致其hnRNPA2／B1的mRNA和蛋白表达水平均有下降。     

MTT药敏试验在老年急性白血病化疗中的应用

目的 探讨老年急性白血病治疗个体化化疗方案。方法 从21例老年急性白血病患者的外周血或骨髓中分离出白血病细胞进行体外原代培养，用MTT法检测柔红霉素、高三尖杉酯碱、阿克拉霉素、米托蒽醌、阿糖胞苷、足叶乙苷、鬼臼噻吩甙、羟基喜树碱、甲氨喋呤等九种单药药敏试验，并参照药敏试验制定化疗方案，进行化疗。结果 21例患者中有一种或一种以上药物敏感者16例占76.2％，九种药物均耐药者5例占23.8％。16例接受药敏指导下化疗，6例完全缓解(CR)，CR率37.5％，4例部分缓解(PR)，PR率25％，有效率62.5％。总符合率81.3％，阳性符合率84.6％，阴性符合率66.％。结论 MTT药敏试验对于老年急性白血病选择个体化的化疗方案有指导意义。