灵菊七的急性毒性与降糖作用研究

目的观察灵菊七的降血糖作用及安全性。方法以不同剂量的灵菊七醇提、水提物给小鼠连续ig给药1/d×4,实验性糖尿病模型用肾上腺素、葡萄糖塑造;急毒实验以4.62g.ml-1灵菊七生药1ml分别给20只小鼠ig。观察14d,记录小鼠毒性反应情况。结果灵菊七醇提、水提物对葡萄糖、肾上腺素所致的小鼠高血糖均有明显的抑制作用。该药给小鼠口服ig,其最大耐受量大于230.6g.kg-1,相当于成人日用量的512倍。结论灵菊七具有降血糖作用,毒性极小,口服安全。     

基于DNA条形码技术的中药小蓟基原植物的分子鉴定

目的:对中药小蓟的基原植物进行分子鉴定,以确保药材质量及其临床疗效。方法:以核基因ITS2片段及叶绿体基因片段psbA-trnH作为DNA条形码,对研究材料进行PCR扩增并双向测序,所得序列经CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA4.0进行相关数据分析,并构建NJ(邻接)树。结果:所研究的刺儿菜复合体样本的ITS2序列间存在明显差异,psbA-trnH序列间也存在稳定差异,基于ITS2序列及psbA-trnH序列构建的邻接(NJ)树可以看出大刺儿菜与小刺儿菜不同样本均能聚为独立一支,表明中药小蓟的基原植物刺儿菜复合体确为两个独立的物种。结论:ITS2和psbA-trnH序列作为DNA条形码可以有效地区分和鉴别物种,在中药原植物物种分类与中药鉴定方面具有广阔的应用前景。     

Chemoprevention of colonic aberrant crypt foci by Gynura procumbens in rats

Ethnopharmacological relevance

Gynura procumbens is commonly used as a traditional medicinal plant in Malaysia for treatment of many diseases. To investigate the chemopreventive properties of Gynura procumbens on azoxymethane (AOM)-induced aberrant crypt foci (ACF) in rats.

Methods

Five groups of adult male rats were used in this experiment. Normal/control group; the rats were injected subcutaneously with 15 mg/kg of sterile normal saline once a week for two weeks, and orally administered with 10% Tween 20 (5 mL/kg). Carcinogen and treatment groups; the rats were injected subcutaneously each with 15 mg/kg body weight AOM once a week for 2 weeks and were continued to be fed for two months, respectively with 10% Tween 20, 500 and 250 mg/kg body weight plant extracts. Reference group; the rats were injected subcutaneously with 15 mg/kg body weight AOM once a week for 2 weeks, and injected intraperitoneally with fluorouracil 35 mg/kg body weight for five consecutive days.

Result

Total ACF detected in methylene blue stained whole mounts of rat colon were 21, 23and 130 in rats fed with 500, 250 mg/kg body weight treatment and carcinogen groups, respectively. Treatment with high and low doses of the plant extract led to83.6% and 82.2% decrease in the total crypts in the groups fed 500 mg/kg and 250 mg/kg Gynura procumbens respectively compared to carcinogen group. Immunohistochemical staining of ACF showed suppressed azoxymethane induced colonic cell proliferation and Bcl-2 expression. Glutathione-S-transfarase and superoxide dismutase activities were higher in treated rats compared to carcinogen groups.

Conclusion

Gynura procumbens reduced the incidence of AOM induced ACF. The findings showed that Gynura procumbens may have antiproliferative and antioxidative properties. Moreover, Gynura procumbens possesses the medicinal properties to prevent colon cancer.     

尼泊尔菊三七的离体快繁技术研究

目的依据尼泊尔菊三七野生资源开发利用情况,以尼泊尔菊三七的茎段为外植体,建立其离体快繁体系。方法通过正交设计法,添加不同浓度激素[6-苄氨基嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)]、无机元素和活性炭,建立包括丛生芽诱导、生根、壮苗以及移栽的离体快繁体系。结果用75%乙醇和0.1%升汞对外植体消毒的时间分别为20 s,6 min;尼泊尔菊三七离体快繁的最佳增殖培养条件为MS+萘乙酸0.5 mg/L+6-苄氨基嘌呤1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.0 g/L,pH=6.0;壮苗生根的最佳培养条件是1/2 MS+萘乙酸0.5 mg/L+6-苄氨基嘌呤1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+活性炭2.0 g/L+琼脂5.0 g/L,pH=6.0;移栽期间的最佳基质是腐殖土∶木炭土=3∶2。结论成功建立尼泊尔菊三七离体快繁体系,为将来大规模生产奠定了基础。     

土三七致肝小静脉闭塞病的临床分析与文献复习

目的:探讨土三七致成人肝小静脉闭塞病临床特点,为肝小静脉闭塞病早期诊断治疗提供依据.方法:分析我院收治的3例土三七致肝小静脉闭塞病患者临床特点,对肝小静脉闭塞病诊断治疗进行总结.结果:(1)3例患者外伤后短期服用新鲜土三七,用量较大.(2)服药后短期出现食欲不振、腹胀、腹痛、黄疸等临床表现.(3)肝功能检查ALT、AST、ALP、GGT、TBIL、DBIL不同程度升高,血清CA125升高,腹水或血清中PⅢP、Ⅳ-C、HA升高.(4)腹部CT提示肝脏密度不均匀,增强扫描静脉期造影剂充盈呈斑片状、地图状.(5)除外病毒性肝炎、肝硬化、结核、肿瘤等病因.(6) 2例患者肝脏穿刺活检,病理提示中央静脉周围肝窦高度扩张淤血、肝细胞坏死消失,中央静脉周嗣轻度纤维化,未见明确炎症.(7)2例患者口服糖皮质激素治疗效果明显.结论:(1)不当使用土三七可引起肝小静脉闭塞病.(2)询问病史一定要仔细,完善常规检查后对于以腹水、肝功能异常、肝脾肿大为主要临床表现的患者仍不能明确病因时,应及早进行肝脏穿刺活检.(3)对于急性期或亚急性期肝小静脉闭塞病患者.尽早应用糖皮质激素.     

3种药物诱导肝小静脉闭塞病小鼠模型的比较

肝小静脉闭塞病(hepatic veno-occlusive disease,HVOD)发病机制尚不明确,HVOD模型建立对研究疾病的发生机制极其重要.DeLeve等[1]用野百合碱给小鼠灌胃(160 mg/kg),建立急性静脉闭塞性疾病(VOD)模型,一定程度上避免了野百合碱肺毒性所产生的偏倚[2-3].高新生等[4]利用土三七生物碱成分予小鼠隔日灌胃,成功建立慢性VOD模型,但未对模型进行病理学评分.目前鲜见用土三七进一步改善造模方法的报道,本实验通过多种药物诱导HVOD发生,比较各种模型的优缺点,为HVOD研究提供稳定、可靠的动物模型.     

红凤菜黄酮类化学成分的研究

目的对菊科三七草属植物红凤菜（Gynura bicolor DC.）的黄酮类化学成分进行研究。方法采用硅胶、聚酰胺、SephadexLH-20柱层析等手段分离化合物,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果分离得到5个黄酮类化合物,分别为槲皮素（Ⅰ）、山柰酚（Ⅱ）、槲皮苷（Ⅲ）、异槲皮苷（Ⅳ）、芦丁（Ⅴ）。结论化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ为首次从该植物中分离得到。     

白子菜对HepG2细胞胰岛素抵抗作用的分子机制

目的:观察白子菜对胰岛素抵抗人肝癌Hep G2细胞的胰岛素受体(insulin receptor,InsR),葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter4,GLUT4)mRNA表达和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB),糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)蛋白表达的影响,探讨其干预胰岛素抵抗的分子机制。方法:用胰岛素诱导Hep G2细胞使其产生胰岛素抵抗,实验分为空白组,模型组,白子菜水提物(Gynura divaricata hot water extracts,GDE)高、低质量浓度(1.0,0.5 g·L-1)组,白子菜总黄酮(G.divaricata flavonoids,GDF)高、低质量浓度(0.2,0.1 g·L-1)组,白子菜总生物碱(G.divaricata alkaloid,GDA)高、低质量浓度(0.1,0.05 g·L-1)组,二甲双胍(1×10-3mol·L-1)组,葡萄糖氧化酶法检测Hep G2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,实时荧光定量聚合酶反应(Real-time PCR)检测Hep G2细胞InsR,GLUT4 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Hep G2细胞PKB,GSK-3β的蛋白表达。结果:与模型组比较,1.0,0.5 g·L-1GDE组上清液葡萄糖含量极显著降低(P0.01),0.2 g·L-1GDF组上清液葡萄糖含量显著降低(P0.05);GDE,GDF组InsR,GLUT4的mRNA表达显著增加(P0.05);GDE组PKB的蛋白表达显著增加(P0.05),GSK-3β的蛋白表达显著降低(P0.05),GDF组PKB的蛋白表达极显著增加(P0.01),GSK-3β的蛋白表达极显著降低(P0.01)。结论:白子菜可改善胰岛素抵抗Hep G2细胞对葡萄糖的摄取,其机制可能与上调胰岛素抵抗Hep G2细胞InsR,GLUT4 mRNA表达和PKB的蛋白表达及降低GSK-3β的蛋白表达相关。     

金鸡毛草水提物对糖尿病足模型大鼠的作用

目的:探讨金鸡毛草水提物对糖尿病足(DF)模型大鼠足部创伤的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法:80只SD大鼠,随机选取8只作为正常组,其余大鼠高脂高糖饲料联合腹腔小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病模型大鼠,再行下肢血管结扎及足部手术,建立DF大鼠模型。模型大鼠随机分为5组,分别为模型组,二甲双胍组(0.2 g·kg-1),金鸡毛草水提物高、中、低剂量(16,8,4 g·kg-1)组。分别于给药第1,4,7,14,21天对大鼠进行创面拍照观察溃疡愈合情况,治疗28 d后对缺血下肢进行免疫组织化学法观察大鼠缺血下肢肌肉组织血管新生情况,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1),C反应蛋白(CRP),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),内皮素-1(ET-1),血栓素A2(TXA2),硝酸还原法测定一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS);实时荧光定量-聚合酶链式反应(Realtime PCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)法测定缺血下肢肌肉组织中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠足部创面愈合延迟,金鸡毛草水提物治疗组创面愈合优于模型组;与正常组比较,模型组大鼠微血管新生情况、血清NO,NOS水平及缺血组织VEGF mRNA和蛋白表达均下降,金鸡毛草水提物高、中、低剂量组均明显升高血清NO,NOS水平及缺血组织VEGF mRNA和蛋白表达(P0.05,P0.01);与正常组比较,模型组ICAM-1,CRP,IL-6,IL-1β,TNF-α,ET-1,TXA2水平显著增高(P0.01),金鸡毛草水提物高、中、低剂量组均明显降低ICAM-1,CRP,IL-6,IL-1β,TNF-α,ET-1,TXA2水平(P0.05,P0.01)。结论:金鸡毛草水提物可促进DF大鼠足背创面愈合,其机制可能与其抑制炎症,调节血管内皮功能,提高下肢缺血组织VEGF表达,促进血管新生改善下肢血供有关。     

大蓟、小蓟中黄酮类成分含量测定及色谱分析

目的　对大蓟、小蓟中黄酮类成份的含量进行测定 ,并对其中的成分进行分离和鉴别。方法　采用紫外分光光度法对大蓟、小蓟中黄酮类成分进行含量测定 ,并采用反相高效色谱法对其中的成分进行分离和鉴别。结果　采用紫外分光光度法测定大蓟、小蓟中总黄酮含量时 ,芦丁对照品在 8 0 4 0～ 312 6 0 0 μg·ml-1范围内呈良好的线性关系 (r =0 9999) ,平均回收率分别为 10 0 5 3%、99 87% ;采用反相高效液相色谱法 ,各组分峰分离较好 ,特征峰明显。结论　分光光度法方法简便、准确、重现性好 ,结合反相高效液相色谱法可以对大蓟、小蓟这两味药材进行质量控制