几种肺癌细胞系中FHIT基因和蛋白表达的研究

目的研究不同人肺癌细胞系FHIT基因和蛋向的表达，为探讨外源FHIT基因对不同FHIT状态人肺癌细胞恶性表型的影响筛选受体细胞。方法提取B01D（人肺巨细胞癌细胞系）、LTEP-A2（人肺腺癌细胞系）、LTEP-Sm（人小细胞肺癌细胞系）和A549（人肺腺癌细胞系）细胞总RNA，定量后逆转录合成cDNA第一链，分别用5131、3D1和5U2、3D2两对引物进行巢式PCR扩增FHIT基因外显子1～10。1．5％琼脂糖凝胶电泳检测4种细胞株的FHIT基因表达。将扩增的PCR产物纯化后进行DNA测序。用FHIT单克隆抗体进行免疫组化染色检测4种细胞FHIT蛋白表达。结果801D和LTEP-Sm细胞有正常FHIT基因转录本，LTEP-A2细胞有一条正常FHIT基因转录本和一条异常转录本，正常转录本测序显示与FHIT cDNA同源，无缺失及重排。801D和LTEP-Sm细胞FHIT蛋向表达呈强阳性。A2细胞FHIT蛋白表达减弱。A549缺乏FHIT基因转录本和蛋白表达。结论4种细胞系代表3种FHIT基因状态，为进一步研究外源FHIT基因对不同FHIT状态人肺癌细胞恶性表型的影响提供了合适的受体细胞。     

Microsatellite instability in a population of sporadic colorectal cancers correlation between genetic and pathological profiles

BACKGROUND: Tumours with high-frequency microsatellite instability exhibit unique genotype and phenotype features, whereas the difference between low-frequency microsatellite instability and apparently stable tumours is far from being clear. AIMS: To identify distinctive genetic and pathological characteristics of low-frequency microsatellite instability tumours. METHODS: Microsatellite instability status of 57 sporadic colorectal cancers and its correlation with genetic, pathological and clinical features was analysed. RESULTS: High frequency microsatellite instability and low-frequency microsatellite instability and apparently stable cancers were different in terms of tumour localisation (p=0.015), frequency of APC mutations (p=0.012), occurrence of Crohn's-like/lymphoid reaction (p=0.0353) and morphological evidence of origin from an adenoma (p=0.0338). Specifically, in low-frequency microsatellite instability cancers, APC mutations were very frequent (76.9%, 10/13) and a Crohn's-like/lymphoid reaction was common (38.5%, 5/13). High-frequency microsatellite instability tumours were preferentially located in the right colon and exhibited a higher frequency of loss of heterozygosity at the FHIT locus compared with low-frequency microsatellite instability and apparently stable cases (p=0.0243). Dukes' stage (p=0.0021), tumour localisation (p=0.0410) and pattern of cancer growth (p=0.0374), were the only factors affecting patient survival. However, a borderline improvement was noted in overall survival in high-frequency microsatellite instability and low-frequency microsatellite instability cancer patients (p=0.062). CONCLUSIONS: These results indicate that low-frequency microsatellite instability tumours have different genetics and histological features and suggest that they are a distinct group of colorectal cancers.     

FHIT和P16蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的研究FHIT和P16基因蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其意义。方法使用组织芯片和免疫组织化学SP法检测FHIT和P16基因蛋白在60例非小细胞肺癌组织中的表达情况。结果非小细胞肺癌中FHIT和P16蛋白表达阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。FHIT的表达阳性率在肺鳞癌中为37．93％（11／29）,在肺腺癌中为70．96％（22／31）（P〈0．05）;P16的表达阳性率在肺鳞癌中为31．03％（9／29）,在肺腺癌中为70．96％（22／31）（P〈0．05）。FHIT蛋白表达与肺癌淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论尚不能认为非小细胞肺癌中FHIT和P16蛋白表达相互关联。FHIT和P16在肺鳞癌发生中起了重大作用。FHIT可作为预测非小细胞肺癌有无淋巴结转移的指标。     

FHIT基因过表达对人胃癌细胞系MKN-45增殖和粘附的影响

目的探讨FHIT基因过表达对人胃癌细胞系MKN-45增殖和粘附能力的影响。方法将载有人外源性FHIT基因的真核表达质粒pcDNA3.1-FHIT转染FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,分别用MTT法、平板克隆形成实验、黏附实验检测转染前后细胞增殖活性、克隆形成能力及粘附能力的变化。结果FHIT基因的过表达可降低MKN-45细胞的增殖和克隆形成能力(P<0.05),但是对MKN-45细胞与内皮细胞的粘附能力无明显影响。结论FHIT基因过表达可抑制人胃癌细胞系MKN-45的增殖和克隆形成,对于MKN-45细胞与内皮细胞的粘附能力无明显影响。     

FHIT在结直肠癌中的表达及其与PCNA的关系

目的探讨FHIT与PCNA在结直肠癌中的表达及其与生物学行为的关系,并分析两者的关系。方法应用免疫组化SP法检测FHIT、PCNA在54例结直肠癌及正常结直肠粘膜组织中的表达。结果①FHIT蛋白在结直肠癌中的阳性率为42.59%,在正常组织中的阳性率为88.89%,两者间的差异具有统计学意义（P〈0.01）,FHIT在癌组织的表达明显低于对照组;PCNA蛋白在结直肠癌中的阳性率为75.93%,在正常组织中的阳性率为18.52%,两者间的差异具有统计学意义（P〈0.01）,PCNA在癌组织的表达明显高于对照组;②FHIT在结直肠癌中的表达与淋巴结转移有关（P〈0.01）,FHIT及PCNA与性别、年龄等其他临床病理参数无关;③FHIT与PCNA在结直肠癌中的表达呈负相关（χ^2=6.5074,P〈0.05）。结论FHIT和PCNA的异常表达可能与结直肠癌的发生发展密切相关,两者在肿瘤的恶性进程中扮演重要角色。     

FHIT、survivin、PTEN在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌中FHIT、survivin和PTEN的表达情况及其与卵巢癌临床病理特征、预后的关系。方法运用免疫组化S-P法检测60例上皮性卵巢癌、52例正常卵巢组织中FHIT、survivin和PTEN蛋白表达情况。结果上皮性卵巢癌中FHIT、survivin和PTEN阳性表达率分别为51.7%、73.3%、53.3%,正常卵巢组织中分别为84.6%、15.4%、76.9%;随着卵巢癌临床分期增高、分化程度减低、有淋巴结转移survivin表达呈上升趋势,而FHIT、PTEN表达呈下降趋势;FHIT与sur-vivin呈负相关(r=-0.624,P<0.01),与PTEN呈正相关(r=0.719,P<0.01)。结论 FHIT、survivin和PTEN异常表达与上皮性卵巢癌的发生发展密切相关,3项指标的联合检测可作为上皮性卵巢癌早期诊断及预测预后具有较高临床参考价值的指标。     

抑癌基因FHIT和PTEN在肝细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨FHIT和PTEN基因在肝细胞癌（HCC）中的表达及其意义。方法：采用免疫组化Envision二步法检测FHIT蛋白及PTEN蛋白在44例HCC组织及10例正常肝组织中的表达。结果：44例肝细胞癌组织中FHIT和PTEN蛋白的阴性表达率分别为38.6%（17/44）和47.7%（21/44）,10例正常肝组织中FHIT和PTEN蛋白的阴性表达率均为0,两种抑癌基因在肝细胞癌组织与正常肝组织中的阴性表达率之间差异有统计学意义（P＜0.05）。在HCC中FHIT基因的阴性表达率与HCC的病理分级、TNM临床分期和肿瘤直径有关（P＜0.05）,与AFP水平、HBsAg（＋）和有无包膜无关（P＞0.05）。PTEN蛋白的阴性表达率与病理分级显著相关（P＜0.05）,与TNM分期、肿瘤直径、AFP水平、HBsAg（＋）和有无包膜无关（P＞0.05）。相关性分析发现,FHIT和PTEN在HCC中的阴性表达呈正相关（rs=0.427,P＜0.01）。分别比较FHIT和PTEN在HCC中蛋白阳性和阴性表达者的术后1、3年生存率,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：FHIT和PTEN蛋白的异常表达与HCC的发生、发展有关,两者可能存在协同作用。FHIT可能是判断HCC恶性程度、侵袭能力和不良预后的重要指标,PTEN可能是判断HCC恶性程度和不良预后的指标。     

非小细胞肺癌中FHIT蛋白的表达及其与Survivin和Ezrin蛋白表达的关系

目的：研究FHIT蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与Survivin和Ezrin蛋白表达的关系,探讨其在NSCLC病变中的作用及其临床意义。方法：应用组织芯片技术结合免疫组化法检测60例NSCLC组织、54例肺良性病变组织中FHIT、Survivin和Ezrin蛋白的表达。结果：FHIT蛋白在NSCLC中的阳性表达率为51.7%（31/60）,显著低于肺良性病变的87.0%（47/54）（P〈0.01）;FHIT的表达与性别、淋巴结转移及组织学类型相关（P〈0.05）,与患者的年龄、肿瘤大小、临床分期、肿瘤细胞的分化程度无关（P〉0.05）;NSCLC组织中FHIT表达与Survivin和Ezrin表达呈显著负相关（r=-0.636,P〈0.01;r=-0.714,P〈0.01）,而Survivin和Ezrin表达无相关关系（r=0.157,P〉0.05）。结论：NSCLC中FHIT失表达,Survivin和Ezrin高表达,FHIT、Survivin和Ezrin在NSCLC的发生、发展中相互作用,联合检测FHIT、Survivin和Ezrin的表达有助于判断肺癌的预后。