乙型肝炎治疗最新进展——Michael P．Manns，MD答Modscapo网记者问

问：HBeAg向抗一HBe的转换代表着慢性乙型肝炎向失活的乙型肝炎表面抗原携带状态的转化，其标志为正常的谷丙转氨酶和低或检测：不到的HBVDNA水平．这种转换对大多数患者来说意味着较好的远期转归，尽管发生了HBeAg血清学转换，部分患者可能继续保持或重新出现高的血清HBVDNA和活动性肝病。您能否简明地讨论一下HBeAg阳性和HBeAg阴性慢乙肝的主要临床差异以及对发病率和病死率：方面的不同影响？     

老年女性糖尿病并尿路感染80例分析

我院于2004．01～2005．01收治80例老年女性糖尿病合并尿路感染，现报道如下。资料与方法80例病人年龄60～75岁，糖尿病诊断及类型符合1997年美国糖尿病协会的诊断标准，全部病例均为2型糖尿病，病程3～30年，全部病例均常规留清洁中段尿，细菌定量分析≥100／ml，尿沉渣白细胞≥10个／HP。并结合临床做出诊断。其中膀胱炎55例。肾盂肾炎25例。     

CAD基因原核表达载体的构建及表达产物的活性鉴定

目的构建pCool—GST—ICAD／CAD的表达载体，并存大肠杆菌BL21（DE3）中表达具有生物学活性的CAD核酸酶？方法用PCR扩增CAD基因，将扩增产物克隆入pCool—GST—ICAD载体中构建出pCool—GST—ICAD／CAD表达载体。经酶切和电泳鉴定正确后，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达，表达产物经亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤等方法分离纯化。最后用SDS—PAGE和DNA降解实验进行鉴定。结果构建了pCool—GST—ICAD／CAD原核表达载体，重组载体转化后表达出毫克级水平的GST—ICAD／CAD蛋白复合体。经分离纯化后得到纯度很好的CAD—ICAD篮白复合体，在SDS—PAGE电泳上旱现清晰的两条蛋白带。经DNA降解实验证明纯化所得的CAD蛋白具有非特异性降解DNA的核酸酶作用。结论成功制备了具有生物学活性的CAD核酸酶，为进一步研究细胞凋亡的作用机制提供了有效的制剂。     

一种适用于聚合酶链反应的常见念珠菌基因组DNA提取方法的研究

目的介绍一种简单、快速的真菌DNA提取方法,提高真菌DNA提取效率,减少毒性和污染性,以适应临床研究需要。方法同时用溶细胞酶结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法,提取白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和净平滑念珠菌基因组DNA,用A260/A280的比值检测DNA的纯度并计算质量浓度,同时行聚合酶链反应(PCR)以评价其可靠性。结果溶细胞酶结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂成功提取所用真菌基因组DNA,其纯度及质量浓度能满足PCR反应的要求。结论用溶细胞酶结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂提取DNA,简单、快速、高效,可用于PCR反应。     

流式细胞分析技术在中医药防治肿瘤研究中的应用

流式细胞技术是综合单克隆抗体技术、激光技术和电子计算机技术等，利用流式细胞仪(flow Cytometer，FCM)为工具快速测量细胞的物理或化学性质，如大小、内部结构、DNA、蛋白质、抗原等，并可对其分类、收集的高新技术。该技术已成为现代细胞生物学、免疫学、肿瘤学、血液学等领域不可缺少的研究手段。近年来流式细胞术被广泛应用到中医药研究的各个领域，     

贲门腺癌细胞多药耐药性及化疗药物敏感试验的临床应用

选取1999年6月～2000年6月我院和江苏省人民医院胸外科收治的贲门癌患者26例，均经胃镜检查诊断为贲门腺癌后行根治性切除术，手术未能切除者不纳入观察组，切除标本采用免疫组织化学法进行分析。对贲门腺癌手术切除标本中多个耐药基因糖蛋白P-170、谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)和DNA拓扑异构酶-Ⅱ(TOPO-Ⅱ)的表达进行比较，并结合临床进行体外药物敏感试验后，给予患者个体化化疗。经3年的观察，现报道如下。     

DNA芯片技术的临床研究应用

DNA芯片技术具有快速、高效、大规模、高容量、高度并行性等特点。随着临床各学科的相关DNA芯片相继问世,为生命科学、医学、化学等领域的研究提供了一个强有力的工具。本文对近年来DNA芯片技术的研究应用进行了综述。     

浅谈喹诺酮类药的临床应用

喹诺酮类药物是一类人工合成的含4-喹诺酮基本结构，对细菌DNA螺旋酶(DNA gyrase)具有选择性抑制作用的抗菌药物。该类药物以其抗菌谱广，抗菌活性强，使用方便，疗效确切，毒副作用小等特点，无论在研究开发还是临床应用方面均倍受重视。     

PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究

目的通过对PCR-DNA技术的分析,探讨人类白细胞抗原(HLA)基因分型方法。方法采用PCR反向序列特异性寡核苷酸(polymerase chain reaction-reverse sequence specific oligonucleotide,PCR-RSSO)杂交技术,建立改良半量扩增体系全自动HLA-I、Ⅱ等位基因分型方法,进行了635份血液标本HLA-A、B、C、DR、DQ等位基因分型,其中166份DNA同时采用序列特异性引物技术(PCR-SSP)和手工全量扩增体系PCR-RSSO技术。对全自动半量PCR-RSSO、PCR-SSP、手工PCR-RSSO 3种方法做两两比较。结果全自动半量PCR-RSSO的分型成功率为98.4%(3 124/3 175),PCR-SSP为98.8%(656/664),手工PCR-RSSO为88.3%(733/830)。经χ2检验,全自动半量PCR-RSSO与PCR-SSP的分型成功率无统计学差异,与手工PCR-RSSO有显著差异(P<0.05)。结论PCR-RSSO可识别HLA-Ⅰ,Ⅱ共706个等位基因,覆盖WHO命名委员会2000年公布的936个等位基因的75.43%;对706个HLA等位基因的分型均为中~高分辨率,有分辨纯合子等位基因的能力;易长期保存书面的实验原始资料,即杂交条;具有成本低、劳动强度低、省时和DNA消耗量少等优点。PCR-RSSO适合于造血干细胞移植和建立造血干细胞及脐带血干细胞库的组织配型。