荧光分光光度法检测半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒在大鼠体内分布的研究

目的观察由半乳糖化白蛋白磁性纳米粒运载的阿霉素经舌静脉给药后在大鼠体内的的分布状况.方法全部大鼠随机分为四组,经舌静脉,按分组分别注射相应药物,剂量均为阿霉素2.5 mg/kg体重.取全血、心、肺、肝、脾、肾.全血制成血浆,器官组织制成匀浆,盐酸乙醇法提取阿霉素,用荧光光度计测量.结果静脉注射同等剂量、不同剂型的阿霉素药物后,阿霉素在器官中的蓄积程度从高到低:肝:D靶肝＞D非靶肝、C＞B＞A;心脏、肾、血浆:A＞B＞D、C;脾:B＞A、C、D;肺:B＞A＞C、D.磁性阿霉素白蛋白纳米粒注入体内后,在心、肺、肝、脾、肾中的药物浓度在15～30min达峰值,而半乳糖化后,阿霉素的药物峰值提前到5 min或之前.外加磁场和未加磁场的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒组的药物靶向指数和药物选择指数是均高于磁性白蛋白纳米粒.结论磁性阿霉素白蛋白纳米粒经半乳糖化后,可显著增强阿霉素对肝脏的靶向性,并显著降低心、肺、脾、肾、血浆肝外器官的组织阿霉素浓度.利用外加磁场,可提高阿霉素在肝脏特定部位蓄积的能力.因此,静脉注射半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒是可行的.     

Cloning and Subcloning of cDNA Coding for Group Ⅱ Allergen of Dermatophagoides Farinae

Objective: To clone, sequence and subclone the cDNA coding for group Ⅱ allergen of Dermatophagoidesfarinae(Der f2). Methods: The cDNA gene fragment of Der f2 was amplified by RT-PCR. After being purified, the gene fragment was cloned into a vector pMD-18T. The recombinant plasmid pMD-18T-Der f2 was transformed into E. coli JM109. Positive clones were screened and identified by PCR and digested with restriction endonuclease, and the sequence of inserted Der f2 cDNA was also analyzed. Then Der f2 was subcloned into the vector of pET-32a( ). Results: The Der f2 cDNA was specifically amplified from RNA by RTPCR. The recombinant plasmid pMD-18T-Der f2 and pET-32a( ),Der f2 was constructed and digested by SacⅠ and NotⅠ, and the size of gene fragment was 455bp and in accordance with the expected one. Conclusion: The pET-32a( )-Der f2 subclone was constructed successfully.     

眼底血管荧光造影术药物反应6例分析

目的 探讨荧光素钠静脉注射药物反应患者的临床表现及治疗。方法 对本组6例药物反应患者进行回顾分析总结。结果 本组6例患者经平卧休息，药物治疗，观察30min后，各种反应体征明显减轻。结论 用药之前应考虑有药物反应的可能，采取必要的防范措施，减少药物反应发生。     

Ti：Al2O3激光在结肠癌变早期诊断上的应用研究

本利用Ti：Al2O3可调谐激光器，经BBO品体倍频，获得了可调谐输出的巨脉冲激光；并利用370nm激光激发离体结肠癌组织和正常组织进行组织的自体荧光实验，并作了对比和分析，获得了对结肠癌变的早期诊断的很有价值的荧光光谱。     

荧光示踪法研究逆行岛状皮瓣静脉回流

目的探讨采用荧光示踪法研究逆行岛状皮瓣静脉回流的可行性，并初步观察静脉回流规律。方法20只新西兰大白兔，每只取耳静脉血0．ImL，分离RBC并用FITC标记。流式细胞仪检测已标记的RBC阳性率及荧光强度，倒置荧光显微镜观察其形态。取20只新西兰大白兔，在动物双侧后肢内侧分别建立4cm×3cm隐动、静脉逆行岛状皮瓣模型（n=10）和顺行岛状皮瓣模型（n=10），血管蒂长3cm。将一侧后肢随机设定为实验组，皮瓣制备后注射已标记的RBC悬液5pL；对侧为对照组，不注射示踪剂。实验组按顺行和逆行皮瓣分成两组，即顺行皮瓣组和逆行皮瓣组，每组10个；再根据注入示踪剂途径不同，分为动脉和静脉2个亚组，每亚组5个皮瓣。注射示踪剂5S后取下皮瓣立即冷冻，取连续的3张冰冻切片（5～7pm），其中2张行HE染色和GENMED染色，另]张不染色直接压片，荧光显微镜观察荧光分布。结果流式细胞仪分析FITC标记的RBC阳性率在99％以上，荧光强度均≥10。；倒置荧光显微镜下标记的RBC呈均匀分布的绿色荧光，荧光强度均匀、稳定。冰冻切片显示实验组皮瓣蒂部均出现荧光，对照组未见荧光。顺行岛状皮瓣组荧光主要分布在静脉腔、静脉壁、动脉内膜和外膜；逆行岛状皮瓣组荧光分布在动脉内膜、外膜和静脉壁。结论荧光示踪剂可用于静脉回流研究，顺行岛状皮瓣静脉主要通过静脉腔、静脉壁、动脉内膜和外膜回流；逆行岛状皮瓣静脉主要通过动脉内膜、外膜和静脉壁的“迷宫式途径”回流。     

瘢痕成纤维细胞中TGF-β受体与整合素相互作用的实验研究

目的:了解TGF-β受体和整合素在瘢痕增生和挛缩过程中的作用.方法:通过荧光定量PCR法(FQ-PCR)测定经TGF-β受体、整合素和粘着斑激酶(FAK)抗体阻断后培养的瘢痕成纤维细胞TGF-β受体以及整合素表达量的变化.结果:经不同抗体阻断后培养的瘢痕成纤维细胞其TGF-β RI和整合素β 1的基因拷贝数均较阴性对照组有不同程度的下降(P＜0.05).结论:TGF-β受体和整合素介导的信号传导途径间可能存在着正反馈的效应,共同促进瘢痕的增生和挛缩.FAK是两条信号传导途径的交汇点和作用的中心环节.     

加替沙星与阿奇霉素治疗非淋菌性尿道（宫颈）炎疗效对比观察

2004—01～2005—06我们分别应用口服加替沙星与口服阿奇霉素治疗非淋菌性尿道炎（宫颈）112例．并对其疗效及不良反应进行观察如下。1对象和方法 1．1对象 均为我院门诊患者及实验室诊断的患者，分别对喹诺酮类和大环内酯类药物无过敏史。剔除所有肝、肾等器质性疾病，无妊娠和哺乳期。无合并淋球菌、滴虫、念珠菌感染，2周内未用过任何抗生素者。发病前有婚外性生活史。或配偶有非淋菌病原体感染史。     

淋病的诊治及对抗生素的敏感性分析

进入20世纪80年代，我国早在60年代初就已消灭的性病开始蔓延，发病人数以淋病居多，以往青霉素是治疗淋病的有效药物，但近年青霉素耐药菌株的出现和流行给淋病的防治带来了困难。临床上由于延误治疗诊断也使病情加重。淋病诊断必须结合病史、临床症状以及实验室检查进行综合分析才能做出正确诊断，一些男性淋病患者仅有少量病原体，尤其是耐药多种抗生索的淋病双球菌，主要潜在后尿道皱襞及前列腺内等，这些病人以前尿道分泌物检查、培养等不易查出阳性结果，就是前列腺按摩液作淋球菌培养也难成功。而前列腺按摩液淋菌PCR扩增技术，通过体外扩增检测，靶基因成百倍地物异性扩增人们所需要的某段DNA片断，1小时即可将所需的DNA序列放大月百万倍，使患者得到正确诊断。     

如何提高脓汁中厌氧菌的检出率

厌氧菌需在无氧环境中才能生长，故在常规的检测中不易检出。而厌氧菌中的破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌又具有很强的致病性。因此，提高脓汁中厌氧菌的检出率在临床上非常重要。笔者在多年的医学微生物学实验教学中对厌氧菌的检测体会如下。     

实时定量逆转录PCR测定EB病毒DNA负荷的临床应用

EB病毒(EBV)是1964年由Epstein和Barr在对非洲Burkitt淋巴瘤来源的瘤细胞进行体外培养时发现的。全球估计EBV成人感染率高达90％以上。已有的证据证明EBV感染可引起传染性单核细胞增多症和器官移植及艾滋病感染等免疫功能降低后的淋巴增生性疾病(lymphoproliferative disease，LPD)。此外，还发现EBV与一些疾病，如淋巴瘤、鼻