运用低密度表达谱芯片检测原发胶质母细胞瘤中相关基因表达

我们应用选取目前胶质瘤相关基因调节通路中的95个基因制成的低密度表达谱芯片（MFC）通过高通量实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术对胶质母细胞瘤中的基因表达进行分析，以期进一步阐明胶质母细胞瘤的发病机制，并希望能找到一种更简单、有效的能高通量检测肿瘤组织基因表达的方法。     

雷帕霉素靶蛋白反义RNA真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达

目的构建雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的反义RNA真核表达载体，观察其对血管平滑肌细胞（VSMC）功能的影响。方法提取人VSMC总RNA，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）扩增mTOR基因cDNA序列，经pGEM-T载体克隆后双酶切，将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGP-C1，转染VSMC，Westernblot法检测反义表达载体对mTOR蛋白表达的影响，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果经RT-PCR获得664bp产物，T载体克隆后，酶切确定该片段为mTOR基因cDNA，进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-mTOR，测序证明序列正确后转染VSMC，证实其能够显著抑制mTOR蛋白产物表达，转染72h的mTOR蛋白产物表达抑制率达82％，S期细胞由15％降低为7％，凋亡细胞增至9％。VSMC增殖过程在Gx／Go期→S期受阻。结论成功构建mTOR基因的反义RNA真核表达载体。     

人类白细胞抗原-G蛋白在星形细胞肿瘤组织的表达

胶质瘤存在免疫耐受。而人类白细胞抗原-G(HLA-G)是一种非经典人类白细胞抗原,有研究表明HLA-G作为免疫耐受分子,在肿瘤免疫逃逸中可能具有重要作用。我们采用免疫组织化学、蛋白印迹实验观察HLA-G蛋白在星形细胞性肿瘤表达情况。     

高血压性脑出血血肿周围脑组织细胞间粘附分子-1的表达

目的探讨急性高血压性脑出血患者细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在血肿周围脑组织和正常脑组织中的表达及其意义。方法选择30例行开颅手术治疗的急性高血压性脑出血患者,采用免疫组化技术检测ICAM-1在血肿周围脑组织及正常脑组织中的表达。结果实验组血肿周围脑组织可见ICAM-1的表达水平上调,其表达水平明显高于正常脑组织的表达水平(P<0.01)。神经元和血管内皮细胞共同表达ICAM-1,且神经元表达较明显。结论ICAM-1在人类高血压性脑出血血肿周围脑组织的表达水平上调,其表达上调可能参与了血肿周围脑组织的白细胞浸润,最终引发炎性反应和继发性脑损伤。     

螺旋体传染病

1988-2003年雅安市钩端螺旋体病流行特征；新型钩端螺旋体的毒力调查；1998-2003年河南石油勘探局新疆探区人群莱姆病监测结果分析；我国4个钩端螺旋体血清群lipL21基因序列分析及其表达产物的鉴定；福建省新丙五价钩端螺旋体菌苗接种后反应与免疫效果的观察。     

061美国植物药协会澄清八角茴香茶的安全问题

2003年9月10日，FDA曾发布了一则“敬告消费者”的通告，表达了FDA对用有毒的日本八角茴香(亦称日本莽草Illicium anisatum L．)代替安全的中国八角茴香I．velum Hook．f．而引发的中毒事件的担心，这件事被媒体播报了好几天。然而遗憾的是很多消费者、     

手术创伤对小儿T淋巴细胞CD69、HLA-DR的影响及意义

手术创伤后患儿细胞免疫功能调节紊乱，传统的观点认为，创伤可致淋巴细胞特别是T细胞的功能受抑，从而使机体的抗感染能力减弱。但另一方面，创伤也可激活T淋巴细胞。本研究采用流式细胞仪技术动态测定42例行体外循环手术的先天性心脏病息儿及11例普胸手术患儿围术期外周血T淋巴细胞表面活化分子CD69、人类白细胞抗原DR位点(HLA-DR)表达率的变化。结果见表1。     

CAD基因原核表达载体的构建及表达产物的活性鉴定

目的构建pCool—GST—ICAD／CAD的表达载体，并存大肠杆菌BL21（DE3）中表达具有生物学活性的CAD核酸酶？方法用PCR扩增CAD基因，将扩增产物克隆入pCool—GST—ICAD载体中构建出pCool—GST—ICAD／CAD表达载体。经酶切和电泳鉴定正确后，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达，表达产物经亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤等方法分离纯化。最后用SDS—PAGE和DNA降解实验进行鉴定。结果构建了pCool—GST—ICAD／CAD原核表达载体，重组载体转化后表达出毫克级水平的GST—ICAD／CAD蛋白复合体。经分离纯化后得到纯度很好的CAD—ICAD篮白复合体，在SDS—PAGE电泳上旱现清晰的两条蛋白带。经DNA降解实验证明纯化所得的CAD蛋白具有非特异性降解DNA的核酸酶作用。结论成功制备了具有生物学活性的CAD核酸酶，为进一步研究细胞凋亡的作用机制提供了有效的制剂。     

多节族蛋白家族成员Bmi1和EZH2的过表达与肝癌细胞增殖和侵袭的生物学行为相关(英)

多节族蛋白家族成员Bmil和EZH2涉及到某些人类癌症的恶性转化和生物侵袭性。本文作者探讨了Bmil和EZH2表达在肝细胞癌（HCC）及其癌前病变不典型增生结节中的意义。用免疫组化方法检测27例HCC、14例不典型增生结节和14例混合性肝细胞癌和胆管癌（HC—CC）中Bmil和EZH2的表达。利用小分子干扰RNA（siRNA）观察培养HCC细胞（HuH7和HepG2）中Bmil和FZH2消减后的效应。结果发现，Bmil在胆管细胞中恒定表达，而在肝细胞中不表达；     

胃癌腹腔冲洗液多巴脱羧酶mRNA的检测

目的：通过检测胃癌腹腔冲洗液中DDCmRNA的表达，探讨多巴胶羟酶（DDC）与胃癌腹膜转移的关系，并为胃癌腹膜转移预测和亚临床转移的筛检提供新的方法．方法：用RNA提取和RT-PCR方法检测92例胃癌腹腔冲洗液中DDCmRNA的表达，同时做腹腔冲洗细胞学（PLC）检查；10例良性疾病的腹腔冲洗液作为阴性对照，结果：92例胃癌腹腔冲洗液中有57例检测到DDCmRNA的表达（62．0％），其表达阳性率与胃癌腹膜转移的PS因素密切相关（P〈0．05）；且胃癌腹腔冲洗液中DDCmRNA的表达水平还与胃癌浸润深度、浆膜类型、PLC检查结果以及是否存在肉眼腹膜转移有关，浸润深度深、浆膜受侵程度重、PLC检查结果阳性及存在肉眼腹膜转移病灶者的DDCmRNA表达相对值明显升高（P〈0．05）；而10例良性疾病腹腔冲洗液均未检测到DDCmRNA的表达．结论：胃癌腹腔液中DDCmRNA的表达与胃癌腹膜转移密切相关，通过RT—PCR来检测DDCmRNA适用于胃癌腹膜转移的预测和亚临床转移的筛检。