基础 脑脊液及胸腹水实验室诊断及进展（下）

四、脑脊液实验室研究进展 （一）蛋白电泳把不同的蛋白成分区分成不同的带或点，可用电泳、等电点聚焦（IEF）、等电点聚焦加平板电泳（双相电泳）等，现又发展了毛细管电泳及简化的电点聚焦方法，并取得与等电点聚焦相似的效果。     

腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜组织异常表达蛋白质的筛选与鉴定

目的 筛选及鉴定腹泻型肠易激综合征(D-IBS)患者与正常人结肠黏膜组织中的差异表达蛋白.方法 D-IBS患者及健康志愿者各4例,分别为D-IBS组和正常对照组.通过结肠镜取回盲部及乙状结肠黏膜进行活检,用含0.1% PMSF的冰盐水将标本洗净后立即置于液氮中保存.提取蛋白质,采用双向凝胶电泳法筛选差异表达蛋白,并采用质谱法对变化最明显的蛋白点进行鉴定.结果 利用双向凝胶电泳技术成功得到人结肠黏膜组织的蛋白质组图谱.正常对照组图谱平均得到蛋白点336个,组内图像平均匹配率92%,D-IBS组图谱平均得到蛋白点426个,组内图像平均匹配率95%.D-IBS组与正常对照组之间进行平均胶图谱的比较,两组间匹配率为74%.Volume值变化大于2倍以上的点共24个,其中21个点表达上调,3个点表达下调.表达上调最明显的2个蛋白点经鉴定分别为免疫球蛋白J链(Ig-j)和热休克蛋白27(HSP27),表达下调最明显的2个蛋白点则分别为血红蛋白β亚基和果糖二磷酸醛缩酶A.结论 采用双向凝胶电泳法可以成功得到人结肠黏膜组织蛋白质组表达图谱,D-IBS患者与正常人结肠黏膜组织蛋白质表达存在差异,已经鉴定出来的4个蛋白可能在D-IBS的发病机制中起一定作用.     

琼脂糖凝胶电泳法测定糖化血红蛋白及其临床应用

目的　采用琼脂糖凝胶电泳的方法测定糖化血红蛋白 (Hb Alc) ,了解 Hb Alc与空腹血糖的关系。方法　取正常人及糖尿病人 EDTA- K2抗凝全血 2 32例 ,制成血红蛋白溶液 ,使用法国 sebia公司 sebia HYDRASYS电泳仪及光密度计扫描仪 ,用琼脂糖凝胶进行电泳分离和光密度计扫描定量测定 Hb Alc;在全自动生化分析仪上用己糖激酶法测定空腹血糖。结果　对照组的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=5 .4 1± 0 .94 ,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=4 .92± 0 .87;糖尿病人的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=11.0 6± 4 .3,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=10 .86± 3.0 4 ,P<0 .0 1,血糖值与Hb Alc值有显著相关性 ,r=0 .985 ,回归方程 Y=1.10 15 x 1.815。结论　该方法标本用量少 ,分辨率高 ,重复性好 ,结果不受温度及胎儿血红蛋白的影响 ,Hb Alc可作为糖尿病控制的指标     

精浆蛋白电泳分析的临床意义

目的为了初步了解男性精浆中的蛋白电泳谱以及蛋白谱与男性生育能力的相关关系。方法通过应用SPIFE3000全自动电泳分析仪对20例对照组(生育组)与140例观察组(不育组)的精浆进行蛋白分离(琼脂糖区带电泳法),建立其精浆蛋白质的特征电泳图谱,并进行对比分析。结果精浆蛋白经酸蓝染色后,区带清晰,从阳极到阴极分为A、B、C、D、E 5条带,电泳各区带百分比含量结果经方差分析,发现不育组与生育组A、C、D、E百分比含量变化有统计学意义(P<0.01),且无精子症患者精浆的蛋白谱有特异的"双峰"特点。结论精浆蛋白区带电泳分析可作为不育症的辅助诊断指标,且将是对男性不育诊断手段的有力补充。     

血清蛋白电泳与尿蛋白电泳在儿科肾脏疾病中的联合应用

目的:探讨血清蛋白电泳与尿蛋白电泳在儿科肾脏疾病中联合应用的价值。方法:运用血清蛋白电泳、尿蛋白电泳对30例肾病综合征、30例急性肾小球肾炎、20例狼疮性肾炎患儿进行血清蛋白、尿蛋白检测。结果:血清蛋白电泳结果:肾病综合征患儿白蛋白比例显著降低,α2球蛋白比例显著升高,急性肾小球肾炎白蛋白比例轻度降低,α1、α2球蛋白比例轻度升高,狼疮性肾炎γ球蛋白、α2球蛋白比例增加。尿蛋白电泳结果:急性肾小球肾炎呈选择性肾小球性蛋白尿者20例多数病情恢复快;肾病综合征选择性肾小球性蛋白尿18例多数对激素治疗敏感;狼疮性肾炎选择性肾小球性蛋白尿9例激素治疗敏感、病情恢复快。结论:联合应用血清蛋白电泳和尿蛋白电泳对判断儿科肾脏疾病病情和预后、指导治疗具有参考价值。     

毛细管电泳测定肝癌肝硬化患者血清氨基酸的临床意义

目的　用毛细管电泳的方法测定肝癌肝硬化患者血清氨基酸变化,并探讨其临床意义。方法　用P/ACEMDQ毛细管电泳仪对2 0例正常人、2 0例肝癌患者及2 0例肝硬化患者的血浆游离氨基酸进行测定。结果　在9min内分离12种氨基酸,线性在2 0～10 0 0 μmol/L范围,回收率为77. 5 %～113 .3% ,批内精密度2 . 6 %～11. 4 % ,批间精密度5 . 8%～19. 7%。对结果进行统计学分析,发现肝硬化组酪氨酸、丝氨酸、色氨酸明显升高,丙氨酸明显下降;肝癌组酪氨酸、半胱氨酸、缬氨酸明显升高,脯氨酸明显下降。结论　毛细管电泳测定血浆游离氨基酸对肝癌肝硬化的诊断和治疗有指导意义。     

小鼠肺腺癌LA795细胞不同转移率克隆株的分离及其膜脂性质的研究

从LA795细胞系的15个克隆株中选出LA1,LAE,LAD,和LA5株,其细胞电泳率分别为:0.865,0.869,1.101,1.320。结果表明:瘤细胞电荷性质的变化同它在同基因动物体内的自发肺转移能力有明显的相关性,其转移率分别为0％(0/25),0%(0/25),16%(4/25)和32%(8/25)。对四个克隆株瘤细胞膜脂性质的测试显示,克隆株瘤细胞转移能力的变化与膜脂性质的变化也显示了明显的相关性。总结果提示,LA795瘤细胞克隆株转移潜能的变化与其细胞整体性质的变化有关。这一结果对进一步认识肿瘤转移的机制有重要意义。     

毛细管区带电泳法测定复方马来酸依那普利片中两组分含量

用毛细管区带电泳法同时测定复方马来酸依那普利片中两组分含量。以咖啡因为内标，２０ｍｍｏｌ／Ｌ硼砂—２０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠（４９∶５１，ｐＨ８６）为运行缓冲液，在７ｍｉｎ内完成分离。马来酸依那普利和氢氯噻嗪的线性范围分别为８０～６４０μｇ／ｍＬ（ｒ＝０９９９９）和５０～４００μｇ／ｍＬ（ｒ＝０９９９３）。平均回收率分别为１０１０％和１０１１％，ＲＳＤ分别为１０％和１７％，ｎ＝５。     

圆盘凝胶电泳法鉴别熊胆皮的研究

以聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法，对熊，猪，牛，羊胆皮的水溶性蛋白进行凝胶电泳，采用凝胶电泳扫描对其电泳谱带进行分析，结果各胆皮均显示不同的谱带，可鉴别熊胆皮的真伪。     

血清蛋白电泳图谱分型及临床意义

血清蛋白电泳是临床生化检查的重要项目之一,对于多种疾病的辅助诊断、病情判定及疗效观察都有一定意义。