精子头核固缩与精索静脉曲张

精索静脉曲张是指精索蔓状静脉丛因各种原因引起的血液回流不畅而形成的局部静脉扩张、弯曲、伸长等病理现象,严重影响精子的发生和精液的质量,从而导致男性不育。在临床工作中,我们发现,精索静脉曲张常导致精子的头核固缩。我们对近3年来发现的65例精索静脉曲张病人的精液进行了涂片观察,现将结果报告如下。1 材料与方法1.1 检测对象 ①正常生育组:随机收集女方正值孕期或产后3个月以内,年龄24～30岁的男子30名的精液。②精索静脉曲张组:65例经本院泌尿外科确诊为精索静脉曲张的病人,年龄26～32岁。③无精索静脉曲张男性不育组:47例,年龄26～34岁。     

缺血／再灌注期间细胞因子对细胞凋亡的影响

细胞凋亡(apoptosis)自1972年被Kerr首次提出后，一直是人们研究的热点。细胞凋亡指在一定的生理或病理条件下，一种由基因编码高度有序调控ATP依赖性的细胞自杀过程，是机体自胚胎起即已存在的一种细胞死亡方式，是维持细胞增生、死亡间平衡的重要方式。它以细胞DNA发生特异性的降解，形态上表现为核固缩、胞膜发泡和凋亡小体形成为特征，机体通过细胞凋亡消除自身损伤、衰老、突变的细胞，以维持组织平衡。近年来，随着细胞凋亡分子机制的研究进展，学者们发现有些细胞因子可以影响细胞凋亡。本文就缺血/再灌注(I/R)期间几种细胞因子对细胞凋亡的影响加以综述。     

Annexin V/PI流式细胞分析法和TUNEL法检测肝细胞凋亡的对比研究

目的 通过AnnexinV/PI流式细胞分析法和TUNEL法检测肝细胞凋亡,比较两种方法的优缺点. 方法 以体外培养人肝细胞株HL-7702为研究对象,分别设立TGF-β1组(加入TGF-β1至终浓度为20 ng/ml,作用72 h后收集细胞进行检测)和正常对照组(加入等量PBS),采用Annexin V/PI流式细胞分析法和TUNEL法检测肝细胞凋亡. 结果 Annexin V/PI流式细胞分析显示,TGF-β1组与正常对照组相比肝细胞的早期凋亡率和总凋亡率均显著增加[(10.55±4.71)%vs(5.98±2.97)%,P<0.01;(19.94±3.68)%vs(13.27±4.62)%,P<0.05].TUNEL法检测显示,细胞核中有棕黄色着染者为阳性细胞,细胞呈典型的凋亡形态学改变,即表现为变小、变圆、核固缩;而正常细胞的胞核不着染.经Iimage-Pro Plus图像分析软件处理,显示TGF-β1组与正常对照组相比肝细胞凋亡率显著增加[(30.25±6.43)%vs(4.75±0.96)%,P<0.01]. 结论 Annexin V/I流式细胞分析法特异性高,TUNEL法灵敏度高,两种方法相结合检测细胞凋亡更准确.     

全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的：探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞的增殖抑制及其分子机制。方法：MTT法检测全反式维甲酸作用于大鼠C6脑胶质瘤细胞后,观察其对细胞增殖抑制率的影响。流式细胞仪观察肿瘤细胞周期及凋亡率的变化。电镜观察C6细胞超微结构变化。Western blot法在不同时间点对凋亡相关基因caspase-3活性蛋白产物的表达进行了检测。结果：MTT结果表明ATRA对C6细胞的抑制作用具有时间和浓度依赖性。流式细胞仪检测证明与对照组相比,处理组C6细胞发生G1期阻滞;S、G2期细胞比例下降;细胞出现亚二倍峰,凋亡比例明显增加。电镜下全反式维甲酸作用72h后处理组C6细胞呈凋亡改变：如核固缩、染色质趋边凝聚。Western blot检测发现,处理组出现了caspase-3蛋白活性裂解片段。结论：全反式维甲酸抑制C6脑胶质瘤细胞生长,全反式维甲酸抑制脑胶质瘤的作用机理可能至少通过改变细胞周期分布、诱导凋亡来实现。     

二烯丙基三硫诱导人胃癌细胞凋亡的形态学研究

目的研究二烯丙基三硫(diallyl trisulfede，DATS)诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的作用。方法采用倒置显微镜、光学显微镜、荧光显微镜、透射电镜分别观察DATS诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的形态学改变。结果MGC-803细胞经DATS处理24h后，光镜可见癌细胞胞浆浓缩、核固缩等早期凋亡细胞显著增多，并有核呈碎片状的晚期凋亡现象；荧光显微镜可见细胞胞浆减少，核呈致密黄色或黄绿色荧光的早期凋亡细胞；电镜可见到不同时期凋亡细胞。结论DATS具有诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的作用。     

芹菜素对急性局灶性大鼠脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用

目的：探讨芹菜素对急性局灶性大鼠脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用。方法：采用改良线栓法建立局灶性脑缺血／再灌注模型，对大鼠进行神经行为学评分、脑组织TTC染色及电镜观察，测定脑含水量和EB含量。结果：模型组和芹菜素组出现不同程度的神经行为学评分异常；TTC染色示模型组出现白色梗死灶；电镜下4h模型组海马CA1区和缺血区皮层的胶质细胞内和毛细血管周围水肿明显，神经元出现核固缩，而芹菜素组病变明显减轻；芹菜素组脑含水量和EB含量较模型组各对应时点明显减少。结论：芹菜素对急性缺血／再灌注脑损伤有一定的保护作用。     

白细胞介素1受体拮抗剂对胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的诱导

目的 从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)对急性胰腺炎腺泡细胞的诱导.方法 用牛黄胆酸钠建立大鼠急性坏死性胰腺炎模型,IL-1Ra腹腔注射诱导胰腺腺泡细胞凋亡,并应用细胞凋亡原位标记检测(TUNEL)染色,检测胰腺组织腺泡细胞的凋亡情况.结果 HE染色见胰腺组织中典型的细胞核固缩及凋亡小体形成.IL-1Ra干预后1、2、6、12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于非治疗组相应时间点(P＜0.01).结论 IL-1Ra治疗急性胰腺炎的机制不仅限于对炎症介质的抑制,且能够通过诱导胰腺腺泡细胞的凋亡减轻胰腺炎的严重程度.     

TiO2纳米光催化剂薄膜对人工品状体表面修饰作用及其意义

目的 研究经光激发后纳米TiO2光催化剂薄膜对体外培养的牛晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)的杀伤效应.方法 采用溶胶-凝胶法在玻片表面制备TiO2光催化剂薄膜.体外培养牛LEC爬片生长于此薄膜上.设未经纳米TiO2光催化剂薄膜修饰的玻片为对照.UVA分组激发玻片0～50 min后,观察细胞形态,MTT比色法测定各组细胞存活率并比较.用HE染色、AO-EB染色观察牛LEC死亡现象.结果 经UVA激发的纳米TiO2光催化剂薄膜对牛LEC有明显杀伤作用,光镜下见实验组激发20 min以上细胞表面有大量泡状突起,大部分细胞收缩变圆;对照组细胞未见明显改变.实验组与对照组细胞存活率有统计学意义,且随激发时间延长,TiO2薄膜对牛LEC的杀伤效应更加显著.HE染色可见实验组激发20 min以上.细胞收缩变圆,细胞间隙增大,核固缩明显,未见核仁,部分胞膜破裂,细胞崩解为碎片;对照组细胞形态大致正常.AO-EB染色发现受激发40 min,实验组大量牛LEC坏死.结论 受激发的纳米TiO2光催化剂薄膜对牛LEC有明显杀伤作用.推断细胞死亡机制可能是TiO2受激发后产生超氧自由基等活性氧物质,在细胞膜表面产生氧化还原反应所致.