真菌病

20 0 4 0 779　唑类药物体外诱导白念珠菌耐药的初步研究/宋晓静(浙大一附院皮肤科)…∥临床皮肤科杂志.- 2 0 0 3,32 (10 ) .- 575～576将质控株及敏感白念珠菌在含不同抑菌浓度的氟康唑(FCZ)、酮康唑(K CZ)、伊曲康唑(ICZ)的液体培养基中进行人工传代诱导耐药。结果白念珠菌在高浓度的唑类药物培养基中能诱导耐药,且为交叉耐药,而在低浓度中经传2 0代仍不能诱导耐药,诱导后的耐药菌株在无药物培养基中传代可恢复敏感性。提示唑类药物能诱导耐药白念珠菌的产生,但与诱导药物的浓度有关,且为不稳定耐药。(汤亚娥)2 0 0 4 0 780　白念珠…     

竹叶柴胡化学成分的研究

目的：为了开发利用竹叶柴胡(Bupleurum marginatum Wall.ex DC.)天然资源，阐明其有效成分，对竹叶柴胡根进行了化学成分研究。方法：运用层析手段和波谱方法分离并鉴定化合物。结果：分离并鉴定13个化合物，它们的结构分别被鉴定为( )-anomalin(Ⅰ)，白花前胡丙素(( )-praeruptorin A)(Ⅱ)，(4)，( )3’-angeloyloxy-4’-keto-3’，4’-dihydroseselin(Ⅲ)，木糖醇(xyhtol)(Ⅳ)，柴胡色原酮A(saikoehromone A)(Ⅴ)，6”-O-乙酰基柴胡皂苷d(6”-O-acetylsaikosaponin d)(Ⅵ)，柴胡皂苷b4(saikosaponin b4)(Ⅶ)，柴胡皂苷a(saikosaponina)(Ⅷ)，柴胡皂苷d(saikosaponin d)(Ⅸ)，柴胡皂苷b2(saikosaponin b2)(Ⅹ)，柴胡皂苷c(saikosaponin c)(Ⅺ)，此外还有β-谷甾醇，β-胡萝卜甙。结论：化合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ，Ⅷ，Ⅹ均为首次从竹叶柴胡中分得，其中化合物Ⅱ和Ⅲ为首次从该属植物中分得。     

小鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及生物性状研究

目的：分离培养小鼠骨髓间充质干细胞，研究其体外培养的生物特性。方法：获取骨髓间充质干细胞进行培养，倒置相差显微镜观察细胞生长情况。绘制生长曲线，冷冻保存细胞复苏后的生长状况观察。免疫细胞化学法鉴定细胞表面抗原。在地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸的作用下，进行成骨诱导分化。结果：原代和传代培养的细胞体外培养细胞呈现梭形、多角形外观，具有较强的生长增殖能力，复苏细胞生长状况无明显改变；细胞CD44。CD54抗原有阳性表达，CD34呈阴性表达。分化细胞表现成骨细胞特性，合成碱性磷酸酶(ALP)能力增强，矿化结节逐渐出现。结论：建立稳定可靠的分离培养小鼠骨髓MSCs方法，分离出的MSCs具有干细胞的生物特性，可用于骨组织工程中的种子细胞。     

肝细胞生长因子与脑保护

最早是由Nakamura等从部分肝切除大鼠的血清中分离到一种能刺激原代培养的肝细胞生长和合成的肝源性因子,并将其命名为肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)[1],又名离散因子(scatter factor).     

小鼠原始生殖细胞源胚胎干细胞的分离培养和建系

目的 :对小鼠胚胎干细胞分离材料的获取及处理、胚胎干细胞分化抑制培养、细胞系的建立及保存所用技术进行探讨。方法 :取胎鼠生殖嵴及其周围组织 ,采用胎鼠的胚胎干细胞与其成纤维细胞共培养的方式进行。结果 :分离得到大量原始生殖细胞(PGCs)集落。多次克隆传代具有胚胎干 (ES)细胞的诸多特征 ,如有连续传代的能力 (有两组分别传至 3代和 4代 ) ,有典型鸟巢状结构 ,AKP染色阳性 ,体外分化实验具有形成类胚体的能力。结论 :从胎鼠生殖嵴中能够获得大量的ES细胞。采用的胚胎干细胞与其成纤维细胞共培养的方式进行胚胎干细胞的分离培养和建系是可行的     

中西医结合治疗继发性输卵管性不孕症的临床研究

目的：研究中西医结合治疗继发性输卵管不孕症的临床疗效。方法：将99例20岁～40岁(平均27．3岁)，病程1．5年～9年(平均3．24年)继发性输卵管不孕症的患者按输卵管通畅程度(双侧不通63例，单侧不通36例)，随机分为两组，即宫腔镜下通液治疗组及宫腔镜下通液加中药治疗组，中药采用桂枝茯苓丸合生化汤。并通过观察治疗后6个月妊娠率及输卵管通畅情况检测临床疗效。结果：两组在输卵管通畅率方面无显著统计学差异．但在6个月妊娠率方面，中药治疗组显示了显著的优势．且这种优势始于治疗后4个月，并持续至随访结束(P≤0．05)，值得强调的是中药治疗组在提高妊娠率的同时也减少了通液次数。结论：宫腔镜下输卵管通液分离，能减少普通通液术的盲目性，它可使粘连的输卵管分离，以达通畅。而中药治疗可改善输卵管功能，减少输卵管平滑肌痉挛，或组织碎屑阻塞发生率，还可促使排卵和激素分泌，防止因组织损伤而导致再次粘连，两者合用提高了继发性输卵管不孕症的临床疗效。     

应用激光显微分离技术在骨肉瘤组织原位筛选噬菌体肽库

目的将激光显微分离(laser capture microdissection, LCM) 技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选过程,建立一种可以直接在天然组织中筛选肽库的方法。方法将新鲜人骨肉瘤组织块在噬菌体肽库溶液振荡孵育后制成组织冰冻切片,免疫组化染色检测噬菌体在组织中的浸润扩散。改进常规LCM切片处理方法,以冻干法替代酒精/二甲苯法脱水,以期在LCM操作过程中提高切片上噬菌体的存活率。LCM法分离摄取骨肉瘤切片上的肿瘤靶细胞,转染回收这些细胞上特异结合的噬菌体。滴定法检测所筛选的噬菌体对特异性细胞的亲和力。结果利用LCM技术,可以由肿瘤冰冻切片上收集到足够的与特异性噬菌体短肽,应用于噬菌体表面呈现肽库筛选。经过3轮筛选后所获得的噬菌体与人骨肉瘤组织的特异性亲和力提高16倍。结论本研究首次将LCM技术应用于噬菌体表面呈现肽库的筛选,可以使我们直接在新鲜人肿瘤组织中筛选与特定细胞群甚至单个细胞亲合的短肽;同时又避免了天然组织中其他杂质细胞的污染,为研制细胞特异性导向载体提供了一个新的途径。     

大麦芽发酵物化学成分的鉴别分离及其抗缺氧效果研究

目的研究鉴别大麦芽发酵物的成分组成,分离其抗缺氧有效成分,为建立药物有效成分提取分离工艺及减少服药剂量提供科学依据.方法按药典方法测定发酵物的理化指标;发酵物分别用水和乙醇提取分离后,通过纸层析法和试管法,用特异显色剂进行化学成分鉴别;采用溶剂极性梯度、乙醇浓度梯度、酸性溶剂三种方法,分别对大麦芽发酵物搅拌回流提取两次,离心分离,回收溶剂,浓缩,低温干燥作试样;溶剂不溶物低温干燥后也作试样;选雄性健康小白鼠,按体重随机分组,每组20只.腹腔注射0.2ml药液,给药40min后,置125ml广口瓶中以橡皮塞密闭进行抗缺氧实验,观察记录动物死亡时间,同时设原发酵物和蒸馏水空白两个对照组.最后统计实验组与对照组的动物存活时间增加率,并对组间结果进行t检验.结果大麦芽发酵物含蛋白质18.99%,总糖17.50%,总酸度9.01%;纸层析法和试管法定性鉴别试样中蛋白质、糖类、有机酸、酚性物和油脂均呈阳性;不同溶剂提取物的动物密闭抗缺氧效果均非常显著高于水对照组(P＜0.01),但却明显低于原发酵物对照组.而不同溶剂不溶物的抗缺氧效果则显著优于原发酵物(P＜0.05).结论发酵物含蛋白质、肽类、氨基酸、单糖、还原糖、多糖类、有机酸、酚性物和油脂等成分.其抗缺氧有效成分可能是一类弱极性化学物质.     

空调隔尘网表面细菌污染情况调查

空调机内环境适宜微生物的繁殖 ,有报道从空调系统的冷却水中分离到引起急性肺炎的细菌及其他病原体。我们采集空调隔尘网样本进行细菌分离、培养和鉴定 ,现报告如下。一、材料与方法1 标本 :浸以无菌生理盐水的棉拭子涂抹空调隔尘网表面后置无菌试管 ,每部空调采样 5份。共采集 36 0部空调180 0份标本 ,包括 18所学校 92部空调、14家饭店 112部空调、2 2个娱乐场所 (包括宾馆、茶楼、歌舞厅和电影院、剧场 )70部空调、12家医院病房 86部空调。2 细菌培养与鉴定 :标本接种于普通营养琼脂 ,置 2 5℃温箱内培养 4 8h ,有菌落生长者判为阳性标…