Cdh1小干扰RNA载体的构建及鉴定

目的:构建Cdh1小干扰RNA载体,并将其转染至Hela细胞进行鉴定.方法:根据pENTRTM/H1/TO中间载体要求,设计Cdh1小干扰RNA载体的干扰序列及无干扰作用的对照序列,合成相应的DNA单链,退火后连接到pENTRTM/H1/TO线性载体,形成完整载体,进行测序鉴定.分别将测序鉴定成功的Cdh1小干扰RNA载体及对照载体采用脂质体法转染Hela细胞,转染后48 h提取细胞总RNA及细胞总蛋白,采用实时定量PCR和Western Blot检测Cdh1的表达.结果:经测序鉴定成功构建Cdh1小干扰RNA载体和对照载体,分别命名为pENTR/shCdh1和pENTR/shcontrol.与未转染及转染pENTR/shcontrol的Hela细胞相比,转染pENTR/shCdh1的Hela细胞Cdh1表达降低(P《0.05).结论:成功构建Cdh1小干扰RNA载体,并能下调Hela细胞Cdh1的表达.     

火焰原子吸收测定化妆品除臭剂中的可溶性锌盐

化妆品卫生标准规定锌是限用物质，水溶性锌盐的最大允许浓度为1％。因此，化妆品中可溶性锌盐必须测定。火焰原子收法测定锌具有高灵敏度．高选择性，线性范围宽，简单，快速的特点。我们选择该法测定化妆品去臭剂中可溶性锌盐取得良好的结果，该法适合日常样品或大批量样品。     

5%甘露醇注射液的细菌内毒素检测

笔者参照中国药典2000年版“细菌内毒素检查法”中干扰实验的基本原理及细菌内毒素检测方法，对5％甘露醇注射液的细菌内毒素检测方法进行了实验研究，现报告如下。     

妇科肿瘤化疗病人的家庭护理

抗癌药物能抑制肿瘤细胞的生长，但对机体正常细胞的代谢也起干扰作用。造血功能障碍是化疗过程中最常见的毒性反应，主要表现为白细胞及血小板的减少、出现出血、青块等，抑制免疫功能，使机体免疫力下降，容易引起感染发热等．因此尽量不要让患去拥挤的公共场所，避免感染其他疾病，同时要注意气候变化，及时添加衣服，防止感冒。     

缓慢的等频干扰性“房一交接”脱节1例

缓慢的等频干扰性“房一交接”脱节近几年来国内尚未见有报道，今报道1例如下。 患者男性，23岁，有先心病病史。17岁时曾做室间隔缺损修补术。既往心电图检查正常。此次因感心悸1月就诊。静息心电图如下（图1）。     

脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制真核表达载体构建及最佳短发夹样RNA分子筛选

目的构建并筛选大鼠胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达抑制短发夹样RNA（shRNA）真核表达载体。方法针对GFAP基因全编码序列设计并合成三对9bp茎环结构、19bp干扰序列特异性shRNA模板，体外定向克隆构建特异性重组质粒真核表达载体；通过体外大鼠脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制模型，脂质体介导RNA干扰分子转染，实时荧光定量RT—PCR及Wesem blot技术观察RNA干扰后原代星形胶质细胞GFAP表达抑制效果．筛选最佳GFAP表达干扰抑制真核表达载体。结果序列测定证实GFAP—shRNA重组质粒真核表达载体构建成功，三对shRNA模板在mRNA及蛋白表达水平抑制靶基因表达效率分别为81％、63％、56％。结论高效率的GFAP—shRNA真核表达载体在大鼠原代星形胶质细胞GFAP表达抑制模型中能高效抑制GFAP基因表达，为后续多靶点RNA干扰技术在脊髓损伤胶质瘢痕抑制基因治疗中的应用奠定了前期基础。     

双重性房室交接区逸搏心律伴房室干扰分离

双重性房室交接区逸搏心律伴房室干扰分离冯海新，柏丽莎，李莉患者女性，５１岁，临床诊断高血压、蜘网膜下腔出血。检查：血压２３．６／１６ｋＰａ（１７０／１２０ｍｍＨｇ），心尖及主动脉瓣区可闻及稍粗糙的Ⅲ／６级收缩期杂音，心界向左扩大，肺、肝脾（－）．直心...     

论干扰中医辨证思维的因素

中医的诊断,应以望、闻、问、切为手段,全面收集病史、症状、体征,进而应用八纲辨证、脏腑辨证等方法,进行分析、归纳,辨别病因、病位、病性,以及疾病发展的趋势,以掌握疾病的实质,最后作出准确的诊断和治疗.因此,凡是干扰辨证思维的因素,均有可能导致错误的判断,从而造成误诊误治.关于干扰中医辨证思维的因素,是中医学术,尤其是中医病因学,辨证学上常会遇到的问题,有必要进行认真的探讨.     

小牛血清去蛋白注射液细菌内毒素检测方法的研究

目的：建立小牛血清去蛋白注射液的细菌内毒素检查方法。方法：根据2000年版《中国药典》进行试验。结果：小牛血清去蛋白注射液在2mg/ml浓度下进行细菌内毒素检查干扰现象，获得了可靠的数据和结果。结论：本品所采用的细菌内毒素检查方法灵敏、可靠。     

RNA干扰抑制马桑内酯诱导的大鼠星形胶质细胞Mdr1基因的表达

目的观察RNA干扰对培养的大鼠星形胶质细胞逆转P-糖蛋白介导的多药耐药现象的影响。方法用短发夹RNA表达载体p-SIREN shuttle质粒转染马桑内酯诱导表达P-糖蛋白的星形胶质细胞，荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定Mdr1 mRNA的表达量，免疫细胞化学方法检测P-糖蛋白表达的变化，流式细胞术检测转染前后细胞罗丹明蓄积外排的变化。结果建立表达P-糖蛋白的星形胶质细胞模型，有效地将p-SIREN shuttle质粒转染该细胞模型。转染后实验组细胞Mdr1 mRNA水平被抑制达67．70％，P-糖蛋白表达明显低于对照组（P〈0．01），实验组P-糖蛋白作用底物罗丹明的细胞外泵出率（23．08％）明显低于对照组（78．35％，P〈0．01）。结论RNA干扰对马桑内酯诱导的星形胶质细胞Mdr1表达有明显抑制作用，并且在很大程度上逆转多药耐药蛋白的耐药作用。