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71.
目的探讨5种新出现的奴卡菌种16S~23S rDNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)DNA基因序列的多态性,筛查特异的奴卡菌种逆向线点杂交(reverse line blot,RLB)探针。方法对6例奴卡菌标本进行ITS基因扩增、克隆、测序,设计奴卡菌种特异探针及ITS间区rDNA基因特异的探针,进行以PCR为基础的RLB(PCR/RLB)杂交试验,不同的RLB型进行ITS基因测序分析,以鉴别不同的奴卡菌种及种内分型。结果发现2个Nocardia beijingensis菌株ITS间区有8个基因序列型,4个RLB型;N.thailandica有4个基因序列型及RLB型;N.blacklockiae有5个基因序列型,3个RLB型,其中N-bla RLBⅢ型与所有Nbla-ITS探针杂交没有信号;N.elegans有5个基因序列型,3个RLB型;N.vinacea有5个基因序列型,2个RLB型。结论通过PCR/RLB试验,准确的ITS基因测序认识了新出现的菌种,即N.beijingensis,N.blacklockiae,N.elegans,N.thailandica及N.vinacea。同时建立了可以大量筛查奴卡菌种的PCR/RLB方法,以进行快速临床诊断及流行病学研究。 相似文献
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梅毒螺旋体外膜蛋白在梅毒螺旋体生物学及致病性中都占有重要的地位.随着研究技术的发展,对外膜蛋白的研究取得了一定的进展.此文就目前研究较多的梅毒外膜蛋白--梅毒螺旋体重复蛋白家族、Tp0257(Cpd)、Tp0326(Tp92)、Tp0453、Tp0751和Tp0971的基因特点及功能,以及可能的应用进行综述. 相似文献
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目的 通过构建登革2型病毒(DEN-2)临床分离株(B株)E基因区1-476bp的原核表达载体,进行原核表达,为DEN-2 E蛋白功能的研究提供基础依据.方法 将DEN-2 B株E基因区部分序列克隆入原核表达载体pET28a(+),命名为pET28a(+)-Eb;经酶切、PCR及测序鉴定后转化BL21(DE3)菌株,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western blot)鉴定表达蛋白;对表达蛋白进行纯化,并滴定对C6/36细胞的细胞半数致死量(TCID50).结果 成功构建了pET28a(+)-Eb原核表达重组质粒;SDS-PAGE分析表明,E基因区部分序列获得高效表达,其相对分子量约为23 kDa,表达量约占菌体总蛋白的29%;Western blot表明,该目的 蛋白可与DEN-2鼠单克隆抗体结合.用Ni柱亲和层析法纯化原核表达蛋白,纯度达90%.DEN-2 B株E基因部分序列原核表达蛋白对C6/36细胞的TCID50为10-5.31.结论 pET28a(+)-Eb可在BL21(DE3)菌株中高效表达;DEN-2 B株E基因部分序列原核表达蛋白对C6/36细胞有明显的细胞毒作用. 相似文献
74.
《山东中医药大学学报》2009,(4)
<正>我国科研人员在国际上首次绘制了流感病毒两个重要基因的多样性全景图。通过这些全景图,人们可以准确定位任何一个流感病毒的毒株在流感病毒家族中的位置,从而为抗击这种病毒引起的人与多种动物疫病,包括当前人感染甲型H1N1流感病毒重大疫情,提供重要的 相似文献
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用PCR方法特异性扩增SERA基因片段,并将该基因片段克隆于M13噬菌体,用双脱氧链末端终止法进行测序,应用PCGENE软件对该基因序列进行了分析,结果显示该基因片段长度为453bp,A+T/G+C为2.6∶1,符合恶性疟原虫结构基因的特点。同源性分析显示该基因在不同虫株间高度保守,我国PFD-3/YN虫株SERA基因片段仅与B1、B2、B3(巴西)株及S16(塞内加尔)株在第667位氨基酸有不同,与FCR3(冈比亚)、FCBR(哥化比亚)、及S14、S15(塞内加尔)等其它虫株SERA基因序列完全一致。抗原表位预测分析显示该多肽N端和C端可能有抗原表位存在。 相似文献
77.
牙龈蛋白酶是牙龈卟啉菌的主要致病因子,因其对宿主蛋白的广泛活性受到了普遍关注本文就牙龈蛋白酶的生化特征、基因结构、蛋白分子结构与作用的研究现状作一综述。 相似文献
78.
79.
80.