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61.
目的 构建并表达β2微球蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白,并应用该蛋白建立一种全新的MHC-Ⅰ肽亲和力实验方法.方法 构建β2M-ZsGreen-6×His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化,将该融合蛋白与表位肽共同与,12细胞反应,通过流式细胞术检测T2细胞标记绿色荧光的情况鉴定表位.结果 构建了B2微球蛋白-绿色荧光蛋白真核表达质粒并表达、纯化得到融合蛋白,该蛋白可应用于亲和力实验,进行表位鉴定.结论 β2微球蛋白-绿色荧光融合蛋白应用于亲和力实验鉴定CTL表位方法可行,步骤简便,适用于大通量表位鉴定. 相似文献
62.
目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者自身抗Aβ抗体亲和力情况.方法 选择AD患者、正常中年人和正常老年人各20例,通过间接ELISA法结合硫氰酸盐洗脱检测各组血清抗Aβ抗体相对亲和力.结果 AD组血清抗Aβ抗体亲和力值为1.6(四分位数范围1.15~2.05),明显低于正常老年组[2.45(四分位数范围1.75~3.08)],差异有统计学意义(P=0.020);正常中年组[2.35(四分位数范围1.35~3.05)]和正常老年组间差异无统计学意义(P=0.220).根据对硫氰酸盐洗脱耐受情况将抗Aβ多克隆抗体组成分为低、中、高亲和力亚群,AD组低亲和力抗体为13%(四分位数范围5%~18%),明显高于正常老年组[5%(四分位数范围3%~10%)],差异有统计学意义(P=0.000);而AD组高亲和力抗体为15%(四分位数范围5%~24%),明显低于正常老年组[35%(四分位数范围26%~44%)],差异有统计学意义(P=0.006).结论 AD患者血清自身抗Aβ抗体亲和力低于正常,抗Aβ多克隆抗体组成成份发生变化,低亲和力抗体亚群比例明显升高,推测可能是B细胞不完全免疫耐受在其中发挥着重要作用. 相似文献
63.
杨敏英 《黔南民族医专学报》2009,22(1)
我国已开展了对新护士工作满意度的调查,发现工作年限短的护士工作满意度低于年限长的护士.目前的新护士是一个非常特殊的群体,他们出生在20世纪80年代后,拥有这一代人的心理特征,学历高而工作满意度低于其他护士[1]. 相似文献
64.
目的:评价目前临床使用的磁共振对比增强剂超顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)进行骨髓间充质干细胞(MSCs)标记的安全性、有效性.方法:从中华小型猪髂骨处抽取骨髓,体外培养扩增MSCs.将SPIO和MSCs共同孵育培养36 h.普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率;通过MTT比色实验评价SPIO对细胞生长能力的影响;台盼蓝染色检测标记后细胞的活性;使用Costar Transwell方法评价铁离子对细胞迁移能力的影响;用细胞分化诱导液培养标记后的细胞评价其向成脂肪细胞和成骨细胞的分化能力.结果:①MSCs经SPIO标记后普鲁士蓝染色阳性率在95%以上,电镜切片观察可见高密度铁颗粒位于细胞浆内.②MSCs经SPIO标记后,MTT比色实验发现随着培养液中SPIO浓度的增加细胞增殖能力没有明显改变;台盼蓝染色显示98%的细胞保持活性;仍可保持原有的细胞形态,可继续培养、传代;细胞迁移试验发现MSCs对SDF-1和VEGF诱导的迁移能力没有明显的减弱;细胞仍可向成脂肪细胞和成骨细胞分化.结论:SPIO可以安全、有效地标记MSCs. 相似文献
65.
66.
李平林 《中国食品药品监管》2009,(10):38-39
思想政治工作是一切工作的"生命线"。面对新体制、新任务、新发展的时代要求,食品药品监管系统的思想政治工作应不断创新工作理念,找准着力点,抓住关键点,选准切入点,突出闪光点,以增强思想政治工作的针对性和有效性,提高感召力、亲和力和凝聚力,为食品药品监管的改革和发展提供坚强有力的保障。 相似文献
67.
68.
建立斑点免疫结合法(DIA)测定抗体相对亲和力。用此法出定了登革病毒Ⅱ型非结构蛋白NS1四株单克隆抗体(McAbs)的相对亲和力,4株McAbs对NS1的亲和力各不相同。按50%最大结合浓度分析,抗体株6─1/C为0.05μg/ml.1─7/F为0.67μg/ml.5D为25.00μg/ml,3─11/C为57.00μg/ml。以上结果为应用这些单克隆抗体提供了依据。同时,说明用DIA法测定McAb相对亲和力的可行性。 相似文献
69.
70.
目的建立SELEX技术筛选rhTGF-βsRⅡ单链DNA亲和核酸库的方法,为后续分离rhTGF-βsRⅡ的单一核酸适体奠定基础。方法体外构建了一个长度为108nt、含60个随机核苷酸序列的ssDNA随机库。将靶蛋白rhTGF-βsRⅡ预先吸附到固相栽体Phenyl-Agarose上,再与ssDNA随机库温育,洗脱未结合核酸片段,回收与rhTGF-βsRⅡ结合的ssDNA。行PCR扩增时,采用5’端生物素化的下游引物,使PCR产物偶联上生物素。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化PCR产物。利用Immobilized Streptavidjrr-Agarose捕获dsDNA,0.15N的NaOH使双链变性,释放非生物素标记的ssDNA,回收后用于下一轮筛选。随着筛选的进行,严谨度不断增加。结果经过8轮筛选后,富集库对靶蛋白的亲和力从0.76%上升到17.18%。结论成功建立了SELEX技术筛选rhTGF-βsRⅡ亲和核酸库的方法。 相似文献