应用蛋白组方法筛选血浆中乙肝病毒PreS1结合蛋白

目的 筛选血浆中乙型肝炎病毒PreS1结合蛋白.方法 表达纯化了PreS1-谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GST)融合蛋白,利用该蛋白与血浆进行Pull-down实验,并设立GST与血浆Pull-down,GST、PreS1-GST与PBS Pull-down对照,Pull-down 产物进行双向电泳分离(2-DE),差异蛋白点通过质谱鉴定.结果 成功表达纯化出PreS1-GST融合蛋白,通过双向电泳分析发现一个PreS1特异结合蛋白,经质谱鉴定为含锚蛋白重复序列的蛋白57(ANKRD57).结论 锚蛋白重复序列的主要功能是介导蛋白质与蛋白质之间的相互作用,ANKRD57与PreS1特异结合后的生理功能值得深入研究.     

应用差异凝胶电泳及质谱技术筛选肺癌患者血浆差异蛋白

目的 建立健康者、肺部炎症患者和肺癌患者的血浆蛋白表达谱,寻找与肺癌早期发生相关的差异蛋白.方法 应用差异凝胶电泳(DIGE)和基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对健康者、肺部炎症患者和I期肺癌患者血浆进行蛋白质组学比较研究,寻找肺癌相关差异蛋白.结果 应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱;Decyder 6.5软件分析获得差异大于2倍的蛋白质点共有72个;质谱鉴定去冗余后确定了12种蛋白质,其中7种与肿瘤相关,分别为酰基辅酶A合成酶家族成员3、抗血小板膜糖蛋白I b特异性抗体、γ-纤维蛋白原、4型血清淀粉样蛋白A、补体因子H、钙结合微丝蛋白、载脂蛋白I.结论 应用DIGE及MALDI-TOF-MS分离并初步鉴定了12种蛋白质,筛选出7种在肺癌患者血浆中高表达的肿瘤相关蛋白.     

大鼠重症急性胰腺炎胰腺蛋白组学的初步研究

目的观察牛磺胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎（SAP）大鼠的胰腺组织在不同时间点蛋白组学的变化。方法 36只SD大鼠分为假手术组、SAP组,分别于24 h、48 h、72 h 3个时间点处死大鼠,每时间点6只。动物经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱发SAP,对照组以生理盐水代替5%牛黄胆酸钠行假手术。通过双向电泳分离、硝酸银染色和图谱分析模型组与对照组蛋白点的差异。结果牛磺胆酸钠诱导出SAP典型组织病理学改变,伴随有胰外肺、肾、胃肠器官的损伤。通过图像分析软件分析胰腺组织蛋白组学变化：24 h时SAP组与假手术组有46个差异点,其中9个点蛋白上调,37个点下调;48 h时SAP组与假手术组有97个差异点,其中43个点蛋白上调,54个点下调;72 h时间点SAP组与假手术组有80个差异点,其中10个点蛋白上调,70个点下调。结论牛磺胆酸钠诱导的大鼠SAP模型胰腺组织在不同时间点蛋白组学的变化存在差异。     

针刺治疗脑梗死大鼠血清的蛋白组学研究

目的：研究针刺治疗对脑梗死大鼠血清蛋白的影响。方法： 雄性SD大鼠20只,线栓法建立脑梗死模型,其中对照组10只,针刺组10只。针刺后1周,取血清,二维电泳分离蛋白,PDQ软件寻找差异表达的蛋白,用MALD I TOF /TOF串联质谱仪分析蛋白质,所得的质谱图通过GPS 软件在MASCOT数据库中检索并鉴定蛋白质。结果： 针刺后血清中有13种蛋白的表达下调,2种蛋白表达上调。选取3种蛋白进行鉴定,针刺后表达下调的蛋白是血清淀粉样蛋白P,表达上调的是丝氨酸蛋白酶抑制剂和白蛋白。结论 针刺可能通过提高丝氨酸蛋白酶抑制剂的表达和肝合成蛋白的功能对脑缺血起保护作用。     

代谢组学技术及其在中枢神经系统疾病中的研究进展

代谢组学是继基因组学和蛋白质组学之后新近发展起来的一门学科,是系统生物学的组成部分。本文对代谢组学的概念与蛋白组学的区别做了简要介绍,综述了当前代谢组学研究中的数据采集、数据分析中采用的技术及代谢组学在中枢神经系统肿瘤、创伤及其他疾病中的应用,并对代谢组学在中枢神经系统疾病中的应用作了展望。     

2009年成瘾研究进展(英文)

在美国,每年有超过40万的人死于吸烟、暴饮暴食、物质滥用以及意外事故和自杀。此外,合并有精神疾病的成瘾者(双重诊断)相当普遍。约29%患有精神疾病的人和一半左右患严重精神疾病(如精神分裂症)的人有成瘾史。因此,成瘾相关的预防、研究及治疗依然是精神病学领域关注的重点。我们将回顾2008 -2009年在药物滥用、食物和其他成瘾方面的研究。在药物试验、药物的选择、成瘾易感性、干预的预后以及复吸的可能性方面存在明显的个体差异。在过去的几十年中,在成瘾的认定、预防和治疗方面取得的成绩是有目共睹的。例如,虽然直到DSM-ⅡI修订版出台才将可卡因列为有滥用潜力的物质,但这一发现拓展了以往局限于对成瘾躯体戒断症状的研究、治疗的范围。最近在动物模型方面已有所突破,目前正在进行有关成瘾大鼠的研究。此外,神经生物学、影像学、蛋白质组学、纳米技术、药理学以及行为科学研究方面的进展也对成瘾领域的研究产生影响。本文综述了我们在成瘾研究中的部分工作以及其他成瘾研究方面取得的进展。     

胰腺癌血清蛋白组学的研究

目的 采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测血清蛋白指纹图,通过差异蛋白组学筛选胰腺癌特有的蛋白标记物,为研究胰腺癌的病理过程和实验诊断奠定基础.方法 用Ciphergen公司生产的PBSII/c型蛋白质指纹图谱仪和ProtienChip CM10(弱阳离子交换表面)蛋白芯片采集23例胰腺癌、25例正常对照组和19例胰腺对照组血清蛋白质谱图,采用Biomaker Wizard 3.1版分析软件筛选差异蛋白.结果 发现胰腺癌患者与正常对照、胰腺对照的血清蛋白质指纹图谱有44个差异表达的蛋白质(P<0.05),其中m/z 2732敏感性为91.30%(21/23),特异性为68.18%(30/44),受试者工作特征曲线下面积(AUC)=0.76;m/z 9111敏感性为52.17%(12/23),特异性为81.82%(36/44),AUC=0.57.结论 利用SEL-DI-TOF-MS技术和CM10芯片能发现胰腺癌患者血清中的特征蛋白,对胰腺癌的早期诊断具有重要意义.     

尿蛋白组学研究在肾脏病领域应用的新进展

早在20世纪90年代就有研究者开始了肾脏病尿蛋白组学的研究。应用双向电泳结合质谱技术寻找诊断疾病和判断预后的特异性标志物,分析疾病的分子机制以及找到药物作用的新靶点是蛋白组学研究的目标。本文就近几年尿蛋白组学技术在临床常见肾脏病,如肾病综合征、IgA肾病、狼疮性肾炎、糖尿病肾病等领域的研究及应用予以综述。     

低剂量二(噁)英慢性暴露对雄性大鼠血清蛋白表达的影响

目的 探讨低剂量二(噁)英慢性暴露对雄性大鼠血清蛋白表达的影响,进一步加深对二(噁)英毒性机制的理解.方法 将32只6周龄雄性SD大鼠随机分为高、中、低2,3,7,8.四氯二苯并二(噁)英(TCDD)剂量组(染毒剂量分别为875、350和140 ng/kg)和对照组(仅给玉米油),每周一次,灌胃染毒29周.染毒结束后,采用双向凝胶电泳-质谱分析-生物信息学检索的经典技术路线,对二(噁)英暴露后血清蛋白表达谱进行分析;同时进行肝脏组织形态学检查.结果 与对照组相比,二(噁)英导致大鼠肝脏明显的脂肪变性和坏死;二(噁)英暴露后触珠蛋白表达下调,载脂蛋白E表达上调,胎球蛋白类蛋白仅在高剂量组表达.结论 二(噁)英暴露对大鼠血清蛋白表达产生了一定的影响,所鉴定的差异蛋白可作为潜在的毒性标志物,有助于二(噁)英毒性机制的理解.     

小鼠胼胝体的蛋白组学研究(英文)

目的:探讨胼胝体内主要蛋白的构成。方法:通过二维电泳技术分离小鼠胼胝体的蛋白,用PDQuest软件对蛋白点进行分析,用串联飞行质谱仪对蛋白进行鉴定,并用Western Blot和免疫组织化学对鉴定的蛋白进行分析。结果:二维凝胶电泳显示在小鼠胼胝体有679个蛋白点。选取47个高丰度蛋白点进行质谱鉴定,鉴定为44种蛋白,它们分别为结构、代谢、信号转导、转运和应激蛋白。WesternBlot和免疫组织化学方法进一步证实了蛋白在胼胝体的表达和分布。结论:该结果为胼胝体主要蛋白的构成提供了资料。