异硫氰酸酯法固定化醇脱氢酶乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ

本文探索了一条较为简便、实用的制备异硫氰酸酯活性载体的新方法,研究了用异硫氰酸酯共价法固定化醇脱氨酶、乳酸脱氢酶和辅酶Ⅰ的条件,并对三者进行了共固定化。按本实验方法得到的固定化醇脱氢酶和乳酸脱氢酶的活力回收可达8.9%和11.9%,得到的固定化三元全酶系统的辅酶再生能力为相应游离酶系统的4倍。     

A therapeutic anti-CD4 monoclonal antibody inhibits T cell receptor signal transduction in mouse autoimmune cardiomyopathy

Background T cell immune abnormalities in patients with dilated cardiomyopathy (DCM) has been intensively studied over the past 10 years. Our previous study has suggested that immunization of mice with the peptides derived from human adenine nucleotide translocator (ANT) result in the production of autoantibodies against the ANT and histopathological changes similar to those in human DCM. The ANT peptides can induce autoimmune cardiomyopathy like DCM in Balb/c mice. In this study we aimed to focus on the molecular mechanism of T cells in the autoimmune cardiomyopathy mouse model by detecting the expression of the two T cell signaling molecules.Methods The ANT peptides were used to cause autoimmune cardiomyopathy in Balb/c mice. Anti-L3T4 or rat anti-mouse IgG was administered to the mice (n=6 in each group) simultaneously immunized with ANT. ELISA analysis was used to detect autoantibodies against the ANT peptides and the percentages of interferon-γ and interleukin-4 producing cells among splenic CD4(+) lymphocytes was determined by using flow cytometry analysis. The expression of CD45 in spleen T cells was determined by immunohistochemistry and the mRNAs of T cell signaling molecules were detected by real-time PCR.Results Treatment of ANT immunized Balb/c mice with anti-CD4 mAb caused a reduction in the gene expression of P56lck and Zap-70 and a lower level of CD45 expression by spleen T cells. Also, a reverse of the Th1/Th2 ratio that results in the reduced production of antibodies against ANT was found in the anti-CD4 monoclonal antibodies (mAb) group. Whereas irrelevant antibody (rat anti-mouse IgG) did not suppress T cell signaling molecules nor inhibit CD45 expression, and control-antibody mice did not show any significant differences compared with the DCM group.Conclusion The results show that anti-CD4 mAb is a powerful inhibitor of the early initiating events of T cell receptor (TCR) signal transduction in mouse autoimmune dilated cardiomyopathy.     

甲基丙烯酸环氧丙酯诱导16HBE细胞恶性转化相关m6A修饰异常mRNA的分析

目的： 检测甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）诱导16HBE细胞恶性转化相关mRNA的m⁶A甲基化修饰水平,筛选出m⁶A修饰的mRNA并进行功能注释。方法： GMA（8 μg/mL）重复染毒16HBE细胞后,收集GMA染毒组和DMSO对照组的第30代细胞,采用高通量人类表观转录组芯片检测16HBE细胞恶性转化相关mRNA的m⁶A修饰水平,应用Visual Studio Code软件进行m⁶A修饰mRNA的筛选,并利用Omicshare工具对这些mRNA进行GO富集分析和KEGG通路分析。结果： 与对照组细胞比较,GMA诱导的恶性转化16HBE细胞中m⁶A修饰水平异常的mRNA共有454个,其中高甲基化水平mRNA 334个,低甲基化水平mRNA 120个;表达水平异常的mRNA共有434个,其中高表达mRNA 236个,低表达mRNA 198个。m⁶A修饰的mRNA有45个,GO富集分析结果显示上述mRNA主要富集于SNAP受体活性、SNARE结合、SNARE复合体等生物学过程,KEGG通路分析主要富集于囊泡运输中的SNARE相互作用、非同源末端连接、苯丙氨酸代谢等通路。结论： m⁶A修饰mRNA可能在GMA诱导16HBE恶性转化过程发挥重要作用。     

阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎36例分析

目的：应用阿德福韦酯（贺维力）治疗慢性乙型肝炎36例临床疗效观察。方法：每3个月检测HBV DNA水平及肝功能，乙肝三对等指标。结果：治疗12个月HBVDNA小于10^3 copies／ml，肝功接近正常者14例，达58．9%。结论：治疗慢性乙型肝炎，阿德福韦酯是安全方便且有效的药物。     

鸟分支杆菌pncB基因的克隆及测序分析

目的 研究鸟分支杆菌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的代谢。方法 筛 选鸟分支杆菌基因组文库和亚克隆。结果 得到了鸟分支杆菌的编码烟酸磷酸核糖转移糖的基因pncB的全序列。结论 用筛选基因组文库的方法寻找新基因的方法是可行的。     

肾茶水提取物对大鼠腺嘌呤肾功能衰竭模型的肾功能影响

目的探讨肾茶水提取物对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠的肾脏保护作用及其可能的机制。 方法 采用腺嘌呤灌胃法建立大鼠CRF模型,同时用肾茶灌胃治疗。治疗第17 d测定尿液尿酸含量; 4周后,采血测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)含量,并测定菊粉清除率代表肾小球滤过功能。取大鼠肾脏进行H-E染色病理组织学观察和肾组织免疫组织化学染色检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。 结果 与模型对照组比较,肾茶治疗组肾脏病理改变轻,尿液尿酸含量增加,血清Cr、BUN、MDA含量降低,菊粉清除率升高,bFGF表达减少(均为P<0.05)。 结论 肾茶对CRF大鼠的肾脏有保护作用,其主要作用机制可能与肾茶增加尿液尿酸排泄、抗氧化作用和抑制肾小管及肾间质bFGF表达有关。     

高糖对人脐静脉内皮细胞NADPH 氧化酶表达和活性氧生成的影响

目的：探讨高糖对内皮细胞活性氧生成和NADPH氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase, NOX)表达的影响。方法：本实验以人脐静脉内皮细胞为研究对象,分为正常对照组、20 mmol/L甘露醇处理4 h高渗 对照组、20 mmol/L葡萄糖处理2 h组、20 mmol/L葡萄糖处理4 h组、20 mmol/L葡萄糖处理6 h组和NOX特异性抑制剂二 苯基碘(diphenylene iodonium,DPI)5 μmol/L预处理0.5 h再加入20 mmol/L葡萄糖处理组(DPI预处理组)。用流式细胞仪 检测各组细胞内活性氧的浓度;反转录聚合酶链反应及Western印迹法分别检测各组细胞内NOX各亚基mRNA和蛋白 的表达变化。结果：1) 与正常对照组相比,20 mmol/L葡萄糖处理2,4 和6 h组活性氧增高(均P<0.05),而DPI 组活性 氧生成与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);2) 与正常对照组相比,20 mmol/L葡萄糖处理4 h组NOX4 mRNA 和蛋白的表达明显增加(均P<0.05),NADPH 氧化酶亚基NOX2,P67phox,P22phox和Rac表达差异均无统计学意义(均 P>0.05);3)与正常对照组相比,DPI预处理组NOX4,NOX2,P67phox,P22phox和Rac表达差异均无统计学意义(均 P>0.05)。结论：高糖可能通过上调NOX4表达以增加活性氧生成而发挥氧化应激作用。     

三元全酶系统的共固定化和辅酶再生

本文研究了用对-氨基苯砜乙基(ABSE)-交联琼脂糖做载体,通过戊二醛共价交联,对醇脱氨酶、乳酸脱氢酶、辅酶Ⅰ进行了位置对位置的共固定化。按本实验方法得到的固定化三元全酶系统的辅酶再生能力为相应游离酶系统的5倍。本文还对该三元全酶系统的固定化机理和辅酶再生性能做了一定的讨论。     

复方鳖甲软肝片防治大鼠腺嘌呤性慢性肾衰竭作用的实验研究

目的:观察复方鳖甲软肝片对大鼠腺嘌呤性慢性肾衰竭的防治作用.方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、尿毒清组、复方鳖甲软肝片小、中、大剂量组.尿毒清组、复方鳖甲软肝片小、中、大剂量组,以200 mg/kg的腺嘌呤及尿毒清组、复方鳖甲软肝片不同剂量灌胃,共4周,在第2周和第4周时留取24 h尿液、称重,第4周处死大鼠,取血、留取肾组织.测定尿、血Ca2 、P3-及Scr、BUN,用SPSS 11.0进行统计学处理.结果:复方鳖甲软肝片组与模型组比较,慢性肾衰竭大鼠的尿、血Ca2 、P3-及Scr、BUN有不同程度的改善.结论:复方鳖甲软肝片对腺嘌呤性大鼠慢性肾衰竭有一定的防治作用.     

硫酸腺嘌呤预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

观察大鼠心肌缺血预处理及硫酸腺嘌呤预处理心肌细胞色素氧化酶（ＣＣＯ）的活性变化，并探讨其心肌保护机理，用３，３’－二氨基联苯胺（ＤＡＢ）的Ｓｅｌｉｇｍａｎ法检测ＣＣＯ，依Ｒｉｄｉｔ值行显性检验，实验表明，心肌缺血再灌注组ＣＣＯ损伤性反应明显，经典缺血预处理组，硫酸腺嘌呤预处理组ＣＣＯ损伤性反应较之明显减轻（Ｐ〈０．０５）。结果提示：经典缺血预处理，硫到腺嘌呤预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作