原位PCR技术

原位ＰＣＲ是一种通过在单细胞或组织切片上对特异的核酸序列进行原位扩增，检测定位的新技术，本文对其基本的原理、发展简史、基本步骤及应用当中的注意事项进行了综述。     

牛碘酸转运体的cDNA在大鼠脑内的分布

为了观察牛磺酸转运体的ｃＤＮＡ的大鼠脑内的分布，用＾３５Ｓ标记的ＴＡＵＴＤＮＡ探针，对大鼠全脑连续切片进行原位分子杂交，阳性反应广泛分布于脑灰质的不同区域，例如嗅球、梨状皮质，大脑皮质 、齿状回、海马和颗粒层细胞为阴性，而周围的胶质细胞为阳性，脑干的某些核，在灰质的神经元和社会胶质细胞观察到反应颗粒。     

十二指肠腺增生性病变18例临床病理分析

目的探讨十二指肠腺增生性病变的临床病理学特点、免疫表型、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析18例十二指肠腺增生性病变的临床资料、病理学特征、免疫表型,并复习相关文献。结果患者发病年龄35～71岁,男、女性各9例。18例患者中十二指肠腺增生、十二指肠腺错构瘤各9例,两者的形态及病变大小无明显差异。十二指肠腺错构瘤的镜下表现比十二指肠腺增生多样,且其腺体可伴上皮内瘤变,免疫组化标记p53、Ki-67及Muc5AC可以辅助诊断。大部分十二指肠腺增生性病变的表面黏膜均有Muc5AC不同程度的表达,提示表面黏膜有不同程度的胃小凹化生,部分表面黏膜还可见糜烂及溃疡形成。结论十二指肠腺增生性病变临床罕见,包括十二指肠腺增生和十二指肠腺错构瘤,两者主要通过镜下形态特点进行鉴别。采用免疫组化检测可鉴别十二指肠腺的上皮内瘤变或原位癌变与硬化性改变;表面黏膜的胃小凹化生、糜烂及溃疡形成提示病变可能的发生、发展机制。     

原位PCR技术检测石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒DNA

应用原位聚合酶链反应（ＩＳＰＣＲ）技术检测了２５例尸检畸形胎儿石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ及原位杂交（ＩＳＨ）进行了比较。ＩＳＰＣＲ、ＰＣＲ及ＩＳＨ检测阳性率分别为４４％，３６％及２０％。与ＩＳＨ相比较，ＩＳＰＣＲ不仅检出阳性率高，而且信号强度增强。研究结果提示，ＩＳ－ＰＣＲ是诊断ＨＣＭＶ感染的快速、敏感、特异的实用方法。     

大鼠肝再生过程中碱性磷酸酶活性变化及其超微细胞化学研究

目的 研究2／3肝切除后大鼠肝再生过程中碱性磷酸酶(AKP)活性的变化及其细胞定位。方法 利用比色法对AKP活性进行定量分析；用酶的原位复性电泳技术分析再生肝中AKP的种类和活性变化；用电镜细胞化学方法研究酶定位。结果 在肝部分切除后的肝再生期间，AKP出现两个活性高峰(16h和19h)，在每个活性高峰后，AKP均有显著下降；获得3种肝型AKP同工酶(140、160和180kD)，其中180kD的AKP只在肝再生过程中出现；随着肝再生的进展，AKP活性出现在细胞的不同部位。结论 AKP在肝再生过程中起重要作用，可能参与细胞代谢、物质转运、DNA合成和细胞分化。     

谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核内GFP阳性神经元的分布及与小白蛋白的共存

目的观察谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白（GAD67-GFP）基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核（Vc）浅层内，表达GFP的GABA能神经元的分布及其与小白蛋白（PV）的共存。方法分别运用原位分子杂交与免疫组织化学相结合；GFP与神经元标记物——神经元核蛋白（NeuN）或PV免疫荧光染色相结合的双重标记方法，在光学显微镜和激光共聚焦显微镜下进行观察。结果1．Vc浅层内90％以上的GFP阳性神经元同时表达GAD67 mRNA，而几乎所有表达GAD67 mRNA的阳性神经元都呈GFP阳性；2．GFP阳性神经元主要分布于Ｖc的Ⅰ－Ⅱ层内，细胞较小，尤其在Ⅱ层内可见大量密集分布的GFP阳性细胞和突起。GFP阳性神经元分别占Ⅰ、Ⅱ层内NeuN阳性神经元总数的19．4％和24．3％；3．GFP／PV双标神经元主要分布于Ｖc的Ⅰ－Ⅱ层，这些双标神经元大约占PV阳性神经元的62．4％，占GFP阳性神经元的12．8％。结论在Ｖc表达GFP的GABA能神经元主要密集分布于与外周伤害性信息传递关系密切的板层内，且大部分PV样阳性神经元属于GABA能神经元。     

升主动脉瘤明胶酶活性变化的实验研究

目的 探讨明胶酶在升主动脉瘤形成过程中的活性变化及意义. 方法 将35只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组.采用升主动脉缩窄鼠制备升主动脉瘤模型.于术后3～5个月取升主动脉,应用明胶酶谱分析及薄膜原位酶谱法检测动脉瘤明胶酶的活性改变. 结果 正常动脉壁外膜无或极少有明胶酶活性;动脉瘤壁的中膜与外膜明胶酶活性明显增强. 结论 明胶酶活性升高可能在升主动脉瘤形成过程中起重要作用.     

不同影像技术对胰腺癌模型兔原位种植建模效果的评价与比较

目的:比较CT、MRI及超声平扫检查对胰腺癌模型兔建模效果的评价价值。方法:建立胰腺癌模型兔10只,对每只模型兔采用CT、MRI、超声平扫等影像检查,比较不同影像技术对模型兔肿瘤病灶的检出率;并对肿瘤采用磁共振波谱(MRS)分析肿瘤代谢情况。结果:建模成功3周末,死亡5只,存活5只;3种检查方式均能发现胰腺区的肿瘤病变和腹腔积液,检出率均能够达到100%。在对肿大淋巴结和血管包绕的检出中,MRI与CT的检出率相当,均优于超声平扫;在对远处转移的检出中,MRI要优于另外两种方式,但三种影像检查方法的病灶肿大淋巴结、血管包绕及远处转移等检出率比较,差异均无统计学意义(χ²=3.619,χ²=3.000,χ²=6.857;P>0.05)。MRS分析能够清晰显示胆碱(Ch)、肌酐(Cr)和N-乙酰天门冬氨酸(NAA)峰。结论:对动物肿瘤模型采用CT、MRI和超声平扫检查,可以获得较为满意的检测效果,但是在行动物实验过程中,需要根据实际的肿瘤种植位置和肿瘤转移位置采用合适的影像检查方法。     

准分子激光角膜切削术和角膜原位磨镶术前、后眼压比较及其意义

目的：了解准分子激光角膜切削术（PRK）和角膜原位磨镶术（LASZK）前、后眼压的变化及其意义。方法：对男性63例,120只眼;女性43例,82只眼,PRK和LASZK组各101只眼采用非接触或眼压计对术前和术后半年病人测量眼压来进行比较及统计学分析。结果：术后两组眼压下降发生率差异不显著（t检验,P＞0．05）。两组于术前、后眼压均数差异均显著（t检验,P＜0．01）。结论：PRK和LASZK术后从眼压读数方面来说均有降眼压作用,发生率无差别,但术后非接触式眼压值并不能完全反映实际眼内压,眼压测量值下降是一种表面现象,因此对术后眼压的变化应综合考虑多方面的因素。     

低能量原位碎石治疗输尿管结石

1997年 7月至 1998年 11月 ,我们应用国产 CS-2 0 0 0型碎石机行原位体外冲击波碎石术 (ESWL)治疗输尿管结石 2 6 7例 ,总有效率 96 .6 % ,无严重并发症。报告如下。1　临床资料1.1　一般资料 :男 2 15例 ,女 52例。年龄 :12～ 70岁 ,平均 34.2岁。左侧输尿管结石 119例 (上段 4 9例 ,中段 5例 ,下段 6 5例 ) ;右侧输尿管结石 148例 (上段 52例 ,中段 8例 ,下段 88例 )。本组 4 3例为左右侧同时存在结石 ;2 7例为同侧多发结石。结石大小 :0 .5cm× 0 .5cm～ 1.8cm× 1.2 cm。病程 :首发症状 1月内行碎石治疗者 2 30例 ,其中 6 8例为绞痛…