Gadd45β和Gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用

目的 探索Gadd45β和Gadd45γ在亚砷酸钠所致的MIHA细胞周期改变中的作用,为砷中毒的人群防治提供依据。方法 收集贵州省兴仁县雨樟镇交乐病区砷中毒人群以及格沙屯正常人群分别作为砷中毒组和对照组,实时荧光定量PCR检测各组人群Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平。同时,分别以不同剂量亚砷酸钠、不同时间处理MIHA细胞,流式细胞术测定细胞周期改变情况,实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平和蛋白表达情况。在上述实验基础上,针对Gadd45β和Gadd45γ基因分别设计的siRNA作用于染砷的MIHA细胞,反向验证Gadd45β和Gadd45γ基因在砷致细胞周期改变过程中的影响。统计学分析采用独立样本t检验比较两组间差异,采用单因素方差比较多组间差异。结果 人群实验研究发现,与对照组相比,砷中毒患者Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA表达水平升高（t = 2.576,P = 0.011;t = 2.312,P = 0.022）;MIHA细胞中,随亚砷酸钠染毒剂量、染毒时间增加,细胞G2/M期比例明显升高（F剂量 = 340.136,P＜0.001;F时间 = 49.194,P＜0.001）;在相对较低亚砷酸钠浓度（低于20 μmol/L）、一定时间内（低于48 h）Gadd45β和Gadd45γ基因mRNA和蛋白表达水平随染砷剂量、染砷时间升高而升高,超过该浓度范围和作用时间后,出现表达下降的现象（Gadd45β:F剂量-蛋白 = 37.568,P＜0.001;F剂量- mRNA = 9.771,P＜0.001;F时间-蛋白 = 61.144,P＜0.001;F时间- mRNA = 46.366,P = 0.001;Gadd45γ:F剂量-蛋白 = 12.989,P = 0.001;F剂量- mRNA = 23.613,P＜0.001;F时间-蛋白 = 27.425,P＜0.001;F时间- mRNA = 37.969,P＜0.001）。转染siRNA分别下调Gadd45β和Gadd45γ的表达后,细胞周期都出现G2/M期比例下调（t = 3.053,P = 0.038;t = 14.47,P＜0.001）。结论 砷致Gadd45β和Gadd45γ基因表达水平升高在其诱导MIHA细胞出现G2/M期阻滞过程中发挥重要作用。     

嗜黏蛋白阿克曼菌脂多糖对小鼠巨噬细胞的影响

目的 提取、鉴定嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila, AKK）的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）,初步探讨AKK的LPS对小鼠巨噬细胞的影响。 方法 试剂盒法提取AKK的LPS并纯化,ELISA法定量;BCA法、紫外分光光度法、SDS - PAGE和银染鉴定提取的LPS的纯度和结构;鲎试剂法检测LPS活性。体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,分为正常对照组、大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli） LPS组和AKK LPS组。经LPS作用后,CCK - 8法检测细胞活性;RT - qPCR测定NF - κB、IL - 1β、IL - 6、TNF - α的mRNA表达水平。 结果 纯化的细菌LPS平均产率为7.14%,蛋白、核酸含量分别为0.005 6‰和2.12%;银染结果显示AKK的LPS条带分布与E.coli的LPS不同;鲎试剂测定其活性为7.10×107 EU/ml;部分干预浓度下,AKK LPS干预组细胞存活率低于E.coli LPS组;刺激6 h、12 h、24 h后,与正常对照组相比,AKK LPS干预组细胞内NF - κB的mRNA表达水平在干预6 h后显著上调,差异具有统计学意义（Z = - 3.606,P = 0.001）;两种LPS干预组的IL - 1β、TNF - α、IL - 6 的mRNA表达水平在各时间点均高于对照组。 结论 提取的AKK的LPS纯度较高,生物活性良好; AKK 的LPS干预小鼠巨噬细胞,上调相关炎症因子IL - 1β、IL - 6、TNF - α及早期核转录因子NF - κB的转录表达。     

TGF-β1、Smads在子宫内膜异位症中的表达和意义

目的通过比较卵巢子宫内膜异位囊肿(巧克力囊肿)患者异位囊壁、子宫在位内膜和其他卵巢良性肿瘤患者子宫内膜的组织学特点及分子生物学特征,探究TGF-β1、Smads在子宫内膜异位症(EMs)患者的表达和意义。方法募集行腹腔镜或宫腹腔镜联合术的巧克力囊肿患者,取其卵巢异位症囊壁组织作为卵巢异位症囊壁组,留取其子宫内膜组织作为子宫在位内膜组;同期行宫腹腔镜联合术的其它卵巢良性肿瘤患者,取其子宫内膜组织作为子宫内膜对照组。采用Masson染色、免疫组织化学法分别检测三种组织中纤维化形成和TGF-β1、Smads的表达情况。结果(1)Masson染色显示,卵巢异位症囊壁组可见大量的纤维化沉积,子宫在位内膜组、子宫内膜对照组均未见明显纤维化蓝染。(2)卵巢异位症囊壁组TGF-β1、p-Smad2/3表达水平分别为(0.039±0.024)和(0.035±0.014)均高于子宫内膜对照组(0.018±0.012和0.023±0.004),差异有统计学意义(P<0.05);子宫在位内膜组p-Smad2/3表达水平(0.034±0.011)高于子宫内膜对照组(0.023±0.004)(P<0.05);卵巢异位症囊壁组Smad7的表达水平(0.006±0.003)低于子宫在位内膜组(0.019±0.011)和子宫内膜对照组(0.041±0.023),差异有统计学意义(P<0.01);子宫在位内膜组Smad7的表达含量较子宫内膜对照组低(P<0.01)。结论TGF-β1、p-Smad2/3在子宫内膜异位症中存在高表达,可能通过促进纤维母细胞增生、胶原蛋白的沉积导致异位病灶纤维化的形成,而Smad7作为抑制因子,在EMs中表达降低,对Smads介导的TGF-β1致纤维化的抑制作用减弱,也促使了子宫内膜异位症纤维化的进展。     

腺梗豨莶萜二醇酸降压及对血液流变学影响的研究

目的 :研究腺梗豨莶萜二醇酸降压及对血液流变学影响。方法 :采用血流动力学方法 ,观察腺梗莶萜二醇酸对家兔的降压作用、心率减慢作用及其对全血及血浆粘度的影响。结果 :腺梗莶萜二醇酸十二指肠给药能使家兔 ABP、L VSP、± dp/ dtmax、HR、DBP都呈下降趋势 ,降压速度与剂量呈正性相关 ,并使家兔全血粘度 (低切、中切、高切 )下降。结论 :腺梗莶萜二醇酸是腺梗莶降压的有效成分 ,使全血粘度降低 ,具有抑制血栓形成的作用。     

Early and late diagnoses of 17β-Hydroxysteroid dehydrogenase type-3 deficiency in two unrelated patients

17β-hydroxysteroid dehydrogenase type 3 deficiency is a rare cause of 46 XY disorders of sexual development. Mutations in the HSD17B3 gene result in reduced activity of the 17β-HSD3 enzyme, decreasing the conversion of androstenedione to testosterone. In this report, two cases, admitted with different clinical findings in the neonatal and adolescent periods and were decided to be raised in different genders are presented. The first case who had complete female external genitalia presented on the third postnatal day with the complaint of swelling in the groin. He was decided to be raised as a male and was treated successfully with parenteral testosterone in order to increase phallus size before surgical correction of the external genitalia. The second case was an adolescent girl who presented due to pubertal virilisation and primary amenorrhoea and chose female gender. Molecular genetic analyses of the HSD17B3 gene revealed two different previously reported homozygous variants. We emphasise that patients with 17β-hydroxysteroid dehydrogenase type 3 deficiency can present with heterogeneous clinical findings in different age groups. Early diagnosis is important to prevent future gender confusion and related problems.     

半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1抑制剂VX-765对急性胰腺炎的保护作用及其机制

目的探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-1抑制剂VX-765对急性胰腺炎的保护作用及其分子机制。方法将60只SD大鼠(2019年8月购自河南省实验动物中心)按照随机数字表法分为假手术组、模型组和VX-765组,模型组和VX-765组经手术注射5%牛黄胆酸钠制备急性胰腺炎模型,对照组只进行手术不注射5%牛黄胆酸钠。建模24 h后对照组和模型组大鼠经腹腔注射生理盐水,VX-765组大鼠经腹腔注射50 mg/kg VX-765,治疗48 h后,观察3组大鼠存活率,采用自动生化仪检测血清淀粉酶活性;采用苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺病理学变化;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析3组大鼠外周血白细胞介素(IL)-1β和IL-18 mRNA和蛋白表达水平,计量资料比较采用单因素方差分析。结果VX-765组大鼠血清淀粉酶活性[(1530.40±280.45)U/L]低于模型组血清淀粉酶活性[(2910.43±429.12)U/L],差异有统计学意义(t=4.891,P<0.05)。VX-765组大鼠病理学评分(4.09±0.17)分低于模型组大鼠病理学评分(9.56±2.61)分,差异有统计学意义(t=3.018,P<0.05)。VX-765组大鼠胰腺组织中IL-1β和IL-18 mRNA表达水平(1.96±0.14、1.47±0.17)低于模型组大鼠胰腺组织中IL-1β和IL-18 mRNA表达水平[(3.18±0.21)、(2.67±0.17)],差异有统计学意义(t=2.999、2.104,P<0.05)。VX-765组大鼠外周血清IL-1β和IL-18水平[(159.43±7.09)、(99.50±5.09)ng/L]低于模型组大鼠外周血清IL-1β和IL-18水平[(310.48±25.55)、(190.65±10.43)ng/L],差异有统计学意义(t=2.801、2.466,P<0.05)。结论VX-765通过抑制Caspase-1活性,降低IL-1β和IL-18等炎性因子水平,进而缓解急性胰腺炎。     

Berberine plays a cardioprotective role by inhibiting macrophage Wnt5a/β-catenin pathway in the myocardium of mice after myocardial infarction

Myocardial infarction (MI) is one of the diseases with high fatality rate. Berberine (BBR) is a monomer compound with various biological functions. And some studies have confirmed that BBR plays an important role in alleviating cardiomyocyte injury after MI. However, the specific mechanism is unclear. In this study, we induced a model of MI by ligation of the left anterior descending coronary artery and we surprisingly found that BBR significantly improved ventricular remodeling, with a minor inflammatory and oxidative stress injury, and stronger angiogenesis. Moreover, BBR inhibited the secretion of Wnt5a/β-catenin pathway in macrophages after MI, thus promoting the differentiation of macrophages into M2 type. In summary, BBR effectively improved cardiac function of mice after MI, and the potential protective mechanism was associated with the regulation of inflammatory responses and the inhibition of macrophage Wnt5a/β-catenin pathway in the infarcted heart tissues. Importantly, these findings supported BBR as an effective cardioprotective drug after MI.     

当归通痹汤联合中药热敷治疗膝关节骨性关节炎的疗效及对IL-1β、MMP-3和TNF-α水平的影响

目的:探讨当归通痹汤联合中药热敷治疗膝关节骨性关节炎的疗效及对白细胞介素(IL)-1β、基质金属酶(MMP)-3和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响。方法:选取我院收治的膝关节骨性关节炎患者140例,随机分为两组各70例。对照组给予中药热敷治疗,治疗组在对照组基础上给予当归通痹汤,对比两组治疗后的临床疗效、VAS评分、WOMAC指数和ADL评分,以及IL-1β、MMP-3和TNF-α水平。结果:治疗后,治疗组的总有效率为94.29%,高于对照组的81.43%,差异有统计学意义(P<0.05);两组ADL评分明显升高,WOMAC指数、VAS评分明显降低(P<0.05);且治疗组比对照组明显改善(P<0.05);两组患者治疗后的IL-1β、MMP-3和TNF-α水平均显著低于治疗前(P<0.05);且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:膝关节骨性关节炎患者采用当归通痹汤联合中药热敷治疗,具有较好的临床疗效,能够改善患者膝关节功能,值得在临床上推广应用。