唑来膦酸对骨肉瘤细胞生物学行为的影响

目的研究唑来膦酸对骨肉瘤LM8细胞株黏附、迁移、侵袭和基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）的影响。方法不同浓度的唑来膦酸处理LM8细胞,用CCK-8法检测细胞毒作用和LM8细胞的黏附力;细胞划痕试验检测LM8细胞的迁移力;transwell小室模型测定LM8细胞对细胞外基质（ECM）的侵袭力;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测培养上清液中基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）的含量。结果经过6．25μmol／L、12．5μmol／L、25μmol／L的唑来膦酸处理后,LM8细胞的黏附、迁移和侵袭力均明显下调,培养上清液中的基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）的含量也明显下降。结论唑来膦酸可抑制骨肉瘤LM8细胞的体外黏附、迁移和侵袭力,并同时明显降低LM8细胞分泌基质金属蛋白酶。     

移植骨肉瘤磁共振弥散加权成像特点及价值

目的探讨大鼠骨肉瘤磁共振弥散加权成像(DWI)特点及其判断骨肉瘤坏死区的价值。方法将UMR-106细胞接种于SD大鼠背部皮下成瘤,对肿瘤行MRI常规扫描及DWI成像并做病理对照。结果活肿瘤细胞区血管横断面积百分比与ADC值无相关性。增强扫描确定肿瘤坏死区的敏感性为86.7%(13/15),特异性为38.5%(15/39),准确性为51.9%(28/54)。ADC值确定肿瘤坏死区的敏感性为93.3%(14/15),特异性为94.9%(37/39),准确性为94.4%(51/54)。结论b值较大时,组织微灌注对大鼠骨肉瘤ADC值影响很小。DWI较传统MRI序列及增强扫描能更早期分辨骨肉瘤坏死区。     

骨肉瘤的三维彩色血管能量成像研究

目的 探讨三维彩色血管能量成像(3D-CPA)对骨肉瘤的诊断价值.方法 应用3D-CPA检测骨肉瘤43例,评定血管分型(3D-CPA Ⅰ-Ⅲ型),并测量相应的血管参数:血管形成指数(VI)、血流指数(FI)、血管形成-血流指数(VFI).结果 43例骨肉瘤均为3D-CPA Ⅲ型.瘤内外血管空间结构形态直观,滋养血管来源明确.骨肉瘤定量测量的血管参数为VI=25.84±6.87,FI=34.18±2.93,VFI=9.02±4.04.结论 3D-CPA可清晰,立体、完整显示骨肉瘤的滋养血管及瘤内的血管分支,并可半定量、定量分析,为骨肉瘤的诊断提供了一种新方法.     

磷酸酶基因PTEN对骨肉瘤细胞凋亡机制研究

目的 探讨肿瘤抑制基因PTEN对人骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡的影响及其分子作用机制。 方法 将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP),转染MG-63细胞系,流式细胞仪分析转染效率及细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测PTEN mRNA水平变化,Western blot法检测PTEN蛋白表达,试剂盒检测caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性。 结果 以感染复数为100,转染MG-63细胞2天后腺病毒感染效率即达93.2%±4.7%。转染PTEN基因5天后,细胞凋亡率为29.8%,细胞形态出现明显凋亡改变。分子学检测结果显示转染PTEN基因后,PTEN mRNA及蛋白表达明显升高;caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性明显增加。 结论 PTEN基因可能通过提高caspase-3、caspase-7、caspase-9活性,诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡。     

骨肉瘤cDNA文库的构建和筛选

目的 研究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在骨肉瘤发生、发展中的作用,构建SAOS-2细胞cDNA文库,寻找与BMP-2相关作用蛋白.方法 从骨肉瘤细胞系SAOS-2中提取总RNA,进而分离poly(A) RNA,用poly(A) RNA进行反转录并以SMARTⅢTM和CDSⅢoligo(dT)为引物进行PCR扩增,得到两端具有同源臂的PCR片段,以此同源臂为基础在酵母中实现同源重组.通过文库片段,线形化的pGADT7-Rec和诱饵质粒pGBKT7/HA-BMP-2共转化酵母AH109菌株在文库构建的同时进行与BMP-2相互作用蛋白的筛选;或先将文库片段,线形化的pGADT7-Rec转化AH109,再利用AH109和Y187两种酵母菌株的接合生殖进行筛选.最后用Far-Western blotting法进一步从体外论证BMP-2相互作用蛋白.结果 构建了具有基因多样性和库容量足够大的骨肉瘤cDNA文库,双链cDNA片段的长度大小范围为250～5000 bp.共转化的效率为4.3×105,重组效率为1.9×106,筛选的克隆数为4.3×105.接合法筛选时的接合效率为32%,筛选的克隆数为1.0×106.筛选到四个与BMP-2相互作用的阳性克隆.结论 此文库的多样性和库容量均符合筛选需求.可用于骨肉瘤相关基因的进一步筛选.     

铁死亡对骨肉瘤作用机制的研究进展

骨肉瘤是幼儿和青年中最常见的骨恶性肿瘤疾病, 其通常有很强的侵袭性, 常规的治疗无法达到预期的效果, 因此研究肿瘤细胞死亡机制并探索更有效的治疗方法具有重要意义。铁死亡作为一种新型细胞死亡形式, 已经发现有三种主要调控通路, 并与肿瘤细胞分子机制、基因等息息相关, 这对铁死亡在骨肉瘤治疗中的应用提供了理论依据。本文对近年来关于铁死亡与骨肉瘤在调控分子、基因等相互作用的研究, 以及铁死亡在骨肉瘤治疗中的应用进行综述。     

可移植性鼠骨肉瘤肿瘤模型的建立

目的建立快速简便的有细胞免疫力的鼠骨肉瘤肿瘤模型。方法取含10×106个对数生长期的UMR106骨肉瘤细胞的混悬液0.5ml,注射至SD大鼠前侧腋窝皮下,或取含5×106个对数生长期的LM8骨肉瘤细胞的混悬液0.3ml,注射至C3h雄性小鼠前侧腋窝皮下。密切观察其生长情况。2～3周时切除肿块,常规病理活检。结果SD大鼠在7～10天时可见明显肿块,3周时可形成1.5cm×1.5cm大小的肿块,肿瘤生成率50%;C3h雄性小鼠在第5天时可见明显肿块,2周时可形成1.0cm×1.0cm大小的肿块,肿瘤生成率100%。肿块经病理检查均证实为骨肉瘤组织。结论种植骨肉瘤细胞LM8于C3h雄性小鼠,可以快速、简便、非常可靠地建立有细胞免疫力的鼠骨肉瘤肿瘤模型。     

骨肉瘤组织中环氧合酶-2和基质金属蛋白酶-2的表达及其意义

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在骨肉瘤中表达的临床意义.方法采用免疫组织化学方法(S-P法)检测31例骨肉瘤组织标本中COX-2和MMP-2蛋白的表达.结果骨肉瘤组织中COX-2和MMP-2蛋白的阳性率分别为61.30%和54.80%,显著高于对照组骨软骨瘤组织(P＜0.05).COX-2的表达与骨肉瘤组织分级、肺转移有关(P=0.033,P=0.008).MMP-2的表达与肺转移有关(P=0.019),而与组织分级关系不大(P=0.821).COX-2的表达与MMP-2的表达密切相关(r=0.007,P=0.008).二者的表达与患者的性别、年龄无关.结论在骨肉瘤中,COX-2、MNP-2参与肿瘤发生发展过程,并且它们之间具有协同作用.     

富含巨细胞的骨肉瘤放射鄄病理讨论

病例男,13岁,江苏人。左侧膝部疼痛5个月。左膝关节正侧位片显示左胫骨近侧干骺端破坏性病变(图1)。在当地医院行病灶刮除和异体骨植入术,病理诊断为巨细胞瘤。术后疼痛加剧,并出现软组组织肿胀。3个月后再摄左膝关节正侧位片示左胫骨上端病变的范围更大、骨质破坏和骨皮质中断更明显,并出现软组织肿块(图2),转我院诊治。病理学观察病变由大量巨细胞和单个核细胞构成(图3)。巨细胞的形态似破骨细胞;单个核细胞较肥硕,似上皮样,核大小不一,染色深,高度异型,分裂相多(图4～6)。局部肿瘤细胞间有嗜伊红的不规则骨样基质形成,部分区域为典型毛细…