EBV－DNA酶全基因扩增克隆和鉴定

根据Ｂｅａｒ的ＥＢ病毒（ＥＢＶ）基因全序列，设计包括ＥＢＶ特异性ＤＮＡ酶全基因的一对引物，在引物上设计有一个ＳａｌⅠ切点，以便于克隆。选用蛋白酶Ｋ裂解的Ｒａｊｉ细胞ＤＮＡ为模板，扩增出一条１４６０ｂｐ的特异条带，纯比后经ＴａｑⅠ酶切形成１１９８ｂｐ和２６２ｂｐ的两个片段，证实该扩增片段即为ＥＢＶ特异性ＤＮＡ酶的全基因片段。以ＪＭ１０３为宿主菌，以高效表达质粒ＰＢＶ２２１为载体，按常规方法作酶切、连接、转化，最后在含氨中青霉素的培养基上挑取单菌落扩大培养，用快速法少量制备质粒ＤＮＡ。根据质粒电泳结果粗筛，再行ＢａｍＨⅠ酶切初步鉴定，确定质粒大小为５１１７（１４５１＋３６６６）ｂｐ的菌落为阳性克隆。先后用ＢａｍＨⅠ和ＴａｑⅠ消化阳性重组体，以形成１２００ｂｐ和３９１７ｂｐ两片段的确定为正向连接重组体。本实验首次将ＥＢＶ－ＤＮＡ酶全基因片段克隆到高效表达载体ｐＢＶ２２１上获得成功     

炎症性肠病与肝伴发病关系的探讨

炎症性肠病时常可伴发肝病，本文对１０例炎症性肠病伴肝损害进行了回顾性研究，发现其发生率为１１．５％，较国外报道低，但高于国内以往的报道。常见的肝损害类型为脂肪肝、慢性肝炎。炎症性肠病伴肝病的发生率与肠道受累的范围有关，而与病程无关。本文还对炎症性肠病的一些免疫学指标进行了分析，认为体液免疫指标不能反映肠病时肝伴发病的发生情况。     

克隆特含漱液治疗常见牙周组织疾病100例

克隆特含漱液是由新乡医学院口腔教研室和新乡保健用品厂联合开发的新药，主要用于治疗和预防牙龈炎、牙周炎和冠周炎等常见牙周组织疾病。河南省卫生厅曾委托河南省人民医院、河南医科大第一、第二附属医院进行临床验证。现将有关资料总结报告如下。回资料和方法1．l病例选择所有病例均为1994～1995年门诊初次就诊，无其它系统疾病，身体健康，近期内未用过抗生素的牙龈炎、单纯性牙周炎及冠周炎患者。并按照统一的标准＊对检查、诊断、记录及指导患者用药。1．2药品来源临床验证组用药为新乡保健用品厂提供的克隆特含漱液，批号叨0301；对…     

血小板生成素的研究进展

巨核细胞、血小板系统是骨髓造血系统的重要组成部分。来自骨髓造血干细胞的巨核系相细胞经增殖分化为成熟的巨核细胞，并生成血小板。对于这一过程调控的研究已经进行了数十年。1961年，人们发现血小板减少的动物体液有巨核细胞刺激活性，提出了巨核细胞发育和血小板的生成是由两个不同的细胞因子在不同的阶段调节的假设；巨核细胞刺激因子（Meg-CSF）刺激巨核细胞的增殖与分化，血小板生成素TPO）则刺激巨核细胞的成熟和血小板的生成。基于这样一种认识，许多研究者都致力于从不同的生物来源中分离、纯化这两种因子，并已有一些部分分…     

人睫状神经营养因子基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

人睫状神经营养因子（ＣｉｌｉａｒＮｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃＦａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）是一种能促进包括交感神经、副交感神经及感觉神经元在内的各种外周神经元和中枢神经元生长及分化的神经生长营养因子，它能特异地促进有丝分裂后的神经元的分化，并具有支持神经元存活的营养作用，因而它有可能成为治疗帕金森氏病、早老性痴呆和肌萎缩性侧索硬化等神经性疾病的有效药物［１］。本文通过反转录ＰＣＲ获得ＣＮＴＦ的ｃＤＮＡ基因，并构建了重组表达质粒，在大肠杆菌中获得了高效表达，为临床应用奠定了基础。１　材料和方法１．１　菌株和…     

80年代我国A群脑膜炎菌的监测及克隆型分析

８０年代病原监测的结果表明．我国引起流脑的主要优势菌依然为Ａ群脑膜炎菌，Ｂ群菌的感染由于Ａ群病例的下降而相对上升。Ａ群菌的脂多糖分型以Ｌ１０为主，其次为Ｌ１１型。Ｂ群菌应用单克隆抗体外膜蛋白分型结果为４、１５及２ａ型．亚型为Ｐ、１．２、Ｐ１、９、Ｐ、１．１５，等。用８０年代在国内首次建立的多位点酶电泳法对我国１９５５～１９８７年各省市的１８３株Ａ株群菌可分成２４个ＥＴ型。发现每次流脑流行期内有一个优势Ｃｌｏｎｅ。６０年代为ｃｌｏｎｅⅢ，７０年代为ｃｌｏｎｅＶ．８０年代又为ｃｌｏｎｅⅢ。我国资料与国际上ｃｌｏｎｅ型及流行病学资料一起分析时，阐明了１９６０年及１９８０年所发生的二次流脑世界性大流行的流行路线及其扩散模式，根据８０年代的流行扩散规律．作者提出了相应的以菌苗预防为主的控制世界性流脑流行的对策。     

双克隆性γ球蛋白病八例分析

双克隆性γ球蛋白病八例分析阎有功，解兵我们采用免疫电泳（ＩＥＰ）及免疫固定电泳（ＩＦＥ）在近１０年间（１９８１～１９９１年）进行血清及尿液Ｍ蛋白的研究中发现双克隆性γ球蛋白病８例，现对其实验室及临床特征予以简述。病例和方法１病例：为１９８１～１９９１...     

徐荣祥公布五年前器官克隆研究承诺结果新闻发布会正式召开

今天上午，徐荣祥在他的研究办公总部向记者公布了他五年前宣布的器官克隆与肿瘤细胞系转变研究承诺兑现报告书，报告书分六个部分，即：五年前公布的科学研究概念解释；组织器官克隆研究的路线；临床器官原位克隆结果；实验性组织器官原位克隆的结果；肿瘤细胞系转变研究的结果。共70页（详见本期杂志165～218页）。     

rhTPO在大肠杆菌中的表达、纯化及生物活性分析

目的：探讨人促血小板生成素(human thromlbopoietin，hTPO)在大肠杆菌中表达、分离纯化及生物学活性初步鉴定。方法：利用RT-PCR法从人胎肝细胞中扩增目的基因片段，将其定向插入pQE30表达质粒T5启动子下游的多克隆区，转化大肠杆菌M15，得到pQE30-TPO的工程菌，诱导目的蛋白表达、纯化。将表达产物给血小板减少模型小鼠尾静脉注射，观察注射后不同时间血小板量的改变。结果：经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside IPTG)诱导培养，该工程菌可以产生单一特异性的高表达蛋白条带。将纯化后的表达蛋白注射小鼠，结果显示对实验性小鼠血小板减少症具有一定的治疗作用。结论：在大肠杆菌中成功地高效表达了重组hTPO，该产物具有促血小板生成的活性。