羊膜培养液抑制角膜新生血管的实验研究

目的　研究羊膜培养液对小鼠角膜新生血管的抑制作用及机制。方法　应用cornealmicropocket方法 ,将含 10 0ng碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和 12 %hydronpolymer的缓释颗粒植入角膜层间 ,制备小鼠角膜新生血管模型。实验分对照组、羊膜组和去上皮羊膜组 ,每组 10只眼 ,收集各组培养液于模型制作当日起 ,每日滴眼 4次至术后 7d摄片观测角膜新生血管长入情况并处死动物。对脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)进行体外培养 ,并应用Boyden小房技术和荧光结合(CyQUANT)实验分别检测羊膜培养液对HUVEC细胞迁移和细胞增殖的影响。利用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组培养液中金属蛋白酶抑制剂 1(TIMP1)和 2 (TIMP2 )的含量。结果　羊膜培养液明显抑制由bFGF诱发的小鼠角膜新生血管的形成 ,对照组、羊膜组和去上皮羊膜组角膜新生血管面积分别是 (2 4 8± 0 76 )mm2 、(0 6 4± 0 5 2 )mm2 和 (1 96± 0 6 5 )mm2 。羊膜培养液明显抑制血管内皮细胞的迁移和增殖 ,而对照组和去上皮羊膜组对HUVEC细胞迁移无作用。羊膜培养液中TIMP2水平明显增高 ,而TIMP1的含量无变化。结论　羊膜培养液中TIMP1的含量未增加。而羊膜上皮产生或释放大量的TIMP2 ,抑制血管内皮细胞的迁移和增殖 ,其可能是羊膜培养液抑制角膜新生血管的     

丹参酮ⅡA对血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的：研究丹参酮ⅡA（TanⅡA）对H2O2所致人脐静脉内皮细胞（ECV-304）损伤的保护作用。方法：MTT法检测细胞活力,比色法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶（SOD）活性及细胞内丙二醛（MDA）含量,RT-PCR方法测定细胞内皮素1（ET-1）、过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPAR-γ）mRNA的表达。结果：丹参酮ⅡA可剂量依赖性地抑制H2O2所致的细胞活力降低,减少MDA生成,提高SOD活性,并可抑制ET-1mRNA的表达,升高PPAR-γmRNA的表达。结论：丹参酮ⅡA对H2O2所致ECV-304损伤具有明显的保护作用。     

川芎嗪注射液对腹膜透析腹腔巨噬细胞功能的影响

目的：探讨商业性腹膜透析液(CDS)及加不同浓度的川芎嗪注射液后对巨噬细胞功能的影响。方法：将培养的小鼠腹腔巨噬细胞(Me)分别置于含50％CDS(含糖2．5％)的条件培养液及加入不同浓度(2／μg／ml、10／μg／ml、100／μg／m1)的川芎嗪注射液后的50％CDS条件培养液中培养24h。观察巨噬细胞的一氧化氮(NitricOxide，NO)产量和MTT(四甲基偶氮唑盐)还原能力。结果：50％CDS组的M①产生NO量及MTT还原能力均明显低于对照组；在培养液中加入川芎嗪注射液后，对M①的抑制作用明显减轻，尤其是对Me产生NO的作用。结论：川芎嗪可减轻腹膜透析液对巨噬细胞功能的抑制，对保护和改善腹腔巨噬细胞的腹膜防御机能有重要作用。     

马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对大鼠脑内谷氨酸及其受体GluR2表达的影响

目的 揭示马桑内酯(CL)激活的星形胶质细胞(Ast)条件培养液(ACM)对大鼠脑内谷氨酸(Glu)及其受体GluR2表达的影响.方法 取成年健康雄性SD大鼠48只,采用随机数字表法分为对照组(16只)和CL组(32只),对照组侧脑室注射未加任何刺激物的ACM 10μL,CL组侧脑室注射CL激活的ACM 10μL;按注射后取材时间不同又分为2h、4h、8h和12h四个亚组,对照组每亚组4只,CL组每亚组8只.观察两组大鼠的行为表现,用免疫组化、免疫荧光检测脑内Glu和GluR2表达的变化,Western blot检测脑内GluR2含量的变化.结果 CL组大鼠有痫样发作,而对照组无痫样发作;免疫组化和免疫荧光检测结果显示,CL组皮质和海马区Glu表达较对照组显著增强,4h时差异有统计学意义(P<0.05),而CL组皮质和海马区GluR2的表达较对照组弱,4h时差异有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,CL组4个时间点的GluR2表达均较对照组含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CL激活的ACM能显著增强脑内神经元Glu的表达,降低GIuR2的表达,进而诱发癫痫.     

猪胆汁提取物对人阴道毛滴虫杀伤作用的体外实验研究(摘要)

1982年我们在总结临床试用猪胆汁阴道杀精避孕药膜的工作中,发现猪胆汁及提取物不仅能杀灭精子,而且有碎解阴道毛滴虫的作用,为了进一步验证,我们进行了体外试验,用相差显微镜进行活体观察,现将结果报告如下。材料与方法虫株由本院寄生虫学教研室提供的615号人阴道毛滴虫虫株,以肝浸汤培养液传代保种。     

抗体预处理降低胰岛移植物免疫原性的研究

目的：探索通过体外预处理降低胰岛移植物的免疫原性，仅需小剂量短期应用免疫抑制剂提高胰岛移植的临床应用范围和移植成功率的方法。方法：分离并纯化成人胰岛细胞，用含20％胎牛血清的CMRL1066培养液37℃培养2d作为对照组；抗体组（培养1d后加MHC-Ⅱ单抗和补体培养1d）作为实验组。猪胰腺取自1～3d的新生猪，剪碎后加胶原酶P消化，Ficoll密度梯度分离纯化。洗涤后加RPMI 1640培养液37℃培养2d作为对照组；     

精子培养营养液的研制与应用效果分析

目的根据精子在人体内的生存环境和营养要求，通过不同成分和不同用量的营养液配方实验优选，研制了一种精子培养液，精液经过培养，看原来活动不良的精子活动力是否改善，活动率是否提高，来判断男性不育的病因是精浆问题，还是精子本身的问题；     

异丙酚对缺氧复氧鼠脑神经元NOS活性和HSP70家族表达的影响

目的：通过观察不同浓度异丙酚对原代培养胎鼠大脑神经元缺氧复氧过程的影响，探讨异丙酚的部分脑保护机制。方法：培养12天的胎鼠大脑神经元，随机分为四组：Ⅰ组正常对照组；Ⅱ组缺氧复氧组；Ⅲ组14μmol／L异丙酚组；Ⅳ组56μmol／L异丙酚组。Ⅲ组和Ⅳ组于缺氧前分别换入含有14μmol/L和56μmol／L异丙酚的培养液，随后缺氧30min。四组于缺氧后1h、2h、4h、6h和24h用分光光度法分别比较各组神经元NOS(一氧化氮合成酶)活性，同时四组于缺氧后1h、3h、6h、8h、24h、48h和72h分别用原位杂交法和免疫组化法观察Hsp70(热休克蛋白70)mRNA、Hsc70(热休克同源蛋白70)mRNA及Hsp70的表达。结果：①本研究的缺氧复氧过程可使神经元NOS活性增强，并可诱导Hsp70 mRNA、Hsc70mRNA和Hsp70表达，且表达高峰分别为24h、24h和48h；②在14μmol／L和56μmol／L异丙酚组，缺氧复氧鼠脑神经元NOS活性在复氧后4h内降低；③14μmol／L和56μmol／L异丙酚组的缺氧复氧鼠脑神经元Hsp70mRNA和Hsc70mRNA的表达高峰分别提前至8h和6h，而只有56μmol／L异丙酚组的缺氧复氧鼠脑神经元Hsp70的表达高峰才提前至24h。结论：异丙酚可抑制缺氧复氧引发的神经元NOS活性增强，同时异丙酚可从转录和翻译两个水平上促进鼠脑神经元热休克蛋白70家族的表达。     

胶质细胞培养液对视网膜色素上皮细胞生长的影响

目的 观察体外培养的视网膜色素上皮细胞条件培养液对视网膜神经胶质细胞生长的影响。方法 用不同稀释度的视网膜条件培养液培养视网膜神经胶质细胞，细胞计数法观察细胞数量的变化；MTT法测定对细胞增生活性（吸光度A值）的影响；流式细胞仪观察细胞周期的变化。结果 随着视网膜条件培养液浓度的增加，视网膜胶质细胞的数量明显增加，吸光度A值升高，进入S期的细胞明显增加，显示体外培养视网膜色素上皮细胞促进视网膜神经胶质细胞增生。结论 视网膜色素上皮细胞和视网膜神经胶质细胞细胞间的相互作用对于PVR等的产生和发展是非常重要的。     

冻干无血清培养基检测人染色体试剂盒的研究

研制一种与传统培养液效果相当，不含小牛血清的外周血淋巴细胞培养液，并制成冻干试剂盒，用于染色体检测。通过批内和批间试验与传统培养液比较，采用“转化淋巴细胞百分率”和“分裂指数”两项指标评估二者的应用效果，结果显示二者间差异均无显著性意义，淋转率变异系数实验组均小于对照组，提示试剂盒具有可靠性和稳定性。由于试剂盒成本低，培养时间仍为７２小时，效果稳定，可完全替代传统培养液用地外周血染色体制备，尤适于