补阳还五汤通过miR-148a-3p抑制大鼠星形胶质细胞凋亡而减轻脑缺血再灌注损伤

目的：探究补阳还五汤是否通过激活微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)靶向调控胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）而抑制大鼠氧糖剥夺/复氧复糖（OGD/R）星形胶质细胞凋亡。方法：取对数生长期的大鼠星形胶质细胞系CTX TNA2,随机分为5组：空白对照组（CON组）、模型组（OGD/R组）、补阳还五汤含药血清（BYHWDS）组、miR-148a-3p抑制物组（inhibitor组）和BYHWDS+inhibitor组,每组每种检测重复3次。除CON组外,其余各组氧糖剥夺6 h后复氧复糖24 h,并于复氧复糖的同时给予相应药物处理（但转染于造模前操作）。采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTS法检测各组细胞活力变化;qRT-PCR检测miR-148a-3p、GFAP mRNA和caspase-3 mRNA的表达水平;Western blot检测GFAP、Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3、caspase-9和cleaved caspase-9蛋白水平;annexin V-FITC/PI染色检测CTX TNA2细胞的凋亡情况;免疫荧光双...     

荞麦黄酮通过下调HMGB1抑制高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤的研究北大核心CSCD

目的：探讨荞麦黄酮对高糖（HG）诱导的人视网膜微血管内皮细胞（HRMECs）损伤的影响及可能机制。方法：体外培养HRMECs,分为不同剂量（0、0.125、0.25、0.5、1、1.25、1.5、1.75、2 mg/ml）荞麦黄酮组,CCK-8法检测细胞抑制率。另将HRMECs分为正常对照（NC）组、HG组、HG+低荞麦黄酮组、HG+中荞麦黄酮组、HG+高荞麦黄酮组、HG+荞麦黄酮+pcDNA组和HG+荞麦黄酮+pcDNA-HMGB1组,CCK-8检测细胞抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,比色法检测MDA含量、LDH漏出量及SOD活性,ELISA检测IL-6、TNF-α和IL-10水平,蛋白质印迹法检测细胞中Bax、Bcl-2和HMGB1蛋白表达,RT-PCR法检测细胞中HMGB1 mRNA表达。结果：与0 mg/ml荞麦黄酮组比较,不同剂量（0.125、0.25、0.5、1、1.25、1.5、1.75、2 mg/ml）荞麦黄酮组HRMECs抑制率无显著变化（P>0.05）。与NC组比较,HG组HRMECs抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH漏出量及IL-6、TNF-α水平均升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达、SOD活性和IL-10水平降低（P<0.05）,HMGB1 mRNA和蛋白表达量均升高（P<0.05）。与HG组比较,HG+低荞麦黄酮组、HG+中荞麦黄酮组、HG+高荞麦黄酮组HRMECs抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH漏出量及IL-6、TNF-α水平均降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达、SOD活性和IL-10水平升高（P<0.05）,HMGB1mRNA和蛋白表达量均降低（P<0.05）。与HG+荞麦黄酮+pcDNA组比较,HG+荞麦黄酮+pcDNA-HMGB1组HRMECs抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH漏出量及IL-6和TNF-α水平均升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达、SOD活性和IL-10水平降低（P<0.05）,HMGB1 mRNA和蛋白表达量均升高（P<0.05）。结论：荞麦黄酮可能通过下调HMGB1抑制HG诱导的HRMECs凋亡、氧化应激和炎症反应。     

miR-9-5p通过抑制SIRT1调控骨关节炎发病进程中软骨细胞的凋亡

为研究miR-9-5p靶向沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator factor 2-related enzyme 1, SIRT1)对骨关节炎(osteoarthritis, OA)软骨细胞凋亡的影响及相关机制,对小鼠的原代软骨细胞进行分离、培养并构建OA细胞模型(加入IL-1β)和OA小鼠模型,检测miR-9-5p的表达、Caspase-3活性、细胞活性及凋亡。确定miR-9-5p和SIRT1存在靶向关系后检测SIRT1活性和上述指标。用番红O-固绿对OA小鼠组织进行染色并分析,在OA小鼠模型中再次验证miR-9-5p通过抑制SIRT1对软骨细胞凋亡的影响。结果显示,miR-9-5p mRNA在OA组织及IL-1β处理的软骨细胞中表达显著升高(P<0.001), miR-9-5p可抑制OA软骨细胞活性(P<0.001)并促进其凋亡(P<0.01)。miR-9-5p靶向作用于SIRT1,并通过抑制SIRT1抑制OA软骨细胞活性(P<0.001),促进其凋亡(P<0.05)。在OA动物模型的验证中得到相同的结果。...     

miRNA-130a-3p通过调控NF-κB信号通路影响损伤心肌细胞

目的 探讨miRNA-130a-3p在LPS诱导的心肌细胞损伤中的作用及可能机制。方法H9C2心肌细胞分为4组,即正常对照组、LPS模型组、miRNA阴性对照组、miRNA-130a-3p mimics组,利用RT-qPCR检测miRNA-130a-3p mRNA表达水平,CCK-8检测细胞活性,ELISA检测培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量,Western blot检测NF-κBp65、IκBα、Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平。结果RT-qPCR结果显示LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平显著低于正常对照组;与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞活性显著升高;与正常对照组相比较,LPS组细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著升高,而与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低;与正常对照组相比较,LPS组细胞中NF-κBp65、Bax、Cleaved-Casp...     

抗凋亡抑制剂维奈克拉在治疗髓系白血病的研究进展

抗凋亡蛋白Bcl-2抑制剂维奈克拉(Ven)能够显著改善不适合强化化疗的老年以及复发/难治的急性髓系白血病(AML)患者的缓解率和远期生存。临床治疗中伴随出现TP53/FLT3突变、异常脂肪酸及氨基酸的能量代谢、Mcl-1蛋白的高表达以及铁死亡程序的激活等多种机制,参与了Ven耐药发生和白血病进展。深入探索导致Ven治疗髓系白血病耐药的机制,有助于克制Ven耐药产生和持续改善白血病患者的远期生存。     

内质网应激在骨关节炎中作用的研究进展

骨关节炎是一种常见的关节退变性疾病,软骨细胞凋亡是其主要的病理生理改变,而内质网应激(ER stress)在其中发挥了不可忽视的作用。为了限制内质网应激带来的不利影响,细胞会激活未折叠蛋白质应答(UPR)。然而当内质网应激持续存在超过UPR所能承受的最大限度时,细胞会通过UPR的3条通路引发内质网功能障碍从而导致软骨细胞凋亡。     

IL-6促进小鼠小胶质细胞系BV2坏死性凋亡

目的 探究在神经炎性反应中小胶质细胞凋亡的调控机制。方法 脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠小胶质细胞系BV2,构建神经炎性反应细胞模型,使用白介素-6(IL-6)拮抗剂塞妥昔单抗(siltuximab)处理LPS诱导的BV2细胞。CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞测量术检测细胞凋亡;ELISA检测IL-6与TNF-α含量;RT-qPCR检测BV2细胞M1极化标志物IL-1β、IFN-γ与M2极化标志物CD206、Arg-1表达;Western blot检测JAK-STAT3信号通路关键蛋白及坏死性凋亡相关蛋白(RIP1)和RIP3表达。结果 LPS诱导后BV2细胞的增殖活力下降,凋亡增加,炎性因子IL-6与TNF-α含量增加(P<0.01)。M1极化标志物IL-1β、IFN-γ表达增加(P<0.01),M2极化标志物CD206、Arg-1表达减少(P<0.01)。JAK-STAT3通路关键蛋白磷酸化增加(P<0.01),RIP1、RIP3蛋白表达增加(P<0.01)。IL-6拮抗剂siltuximab处理细胞后,JAK-ST...     

运用原位DNA末端标记法研究细胞凋亡对乳腺癌预后的影响

研究临床乳腺癌标本中细胞凋亡的发生情况,评价其在预测后在的意义。方法搜集９１例浸润性乳腺癌的石蜡组织切片,运用原位ＤＮＡ断裂位点的末端标记法,检测细胞凋亡,计算凋亡细胞占肿瘤细胞的百分比,求得凋亡指数。结果本组病例细胞凋亡发生率为９１．２％,凋亡指数分为两组：０～０．２１和０．２８～０．６２,凋亡指数高低与腋淋巴结转称相关（Ｐ＜０．０１）。生存率单因素分析中,凋亡指数高的病例,无病生存率（Ｐ＝０．００９５）及总生存率（Ｐ＝０．０３４８）均优于凋亡指数低的病例。但Ｃｏｘ模型多因素分析末能指示凋亡指数是一个独立的预后指标。结论在乳腺癌组织中,细胞凋亡是一种自发现象,其发生情况各有不同,研究初步提示了细胞凋亡在乳腺癌预后中的作用,了解了凋亡和腋淋巴结转移的相关性。     

紫杉醇诱发人乳癌细胞凋亡的机制研究

探讨紫杉醇诱发人乳腺癌细胞凋亡的发生机制。方法应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪、活细胞视频观察和蛋白印迹免疫法进行检测和观察。结果癌细胞在紫杉醇作用下,细胞分裂阻滞在分裂期的中期,并诱导细胞发生凋亡。凋亡细胞表现为细胞固缩,核染色质凝聚或者断裂。细胞ＤＮＡ裂解片段呈现典型的“阶梯状”排列的条带。凋亡抑制基因Ｂｃｌ－２在细胞凋亡过程中呈低表达并发生修饰反应,而凋亡诱导基因Ｂａｘ先呈高表达然后表达降低。结论紫杉醇诱发的人乳癌细胞的凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关,Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ在紫杉醇诱发的人乳癌细胞凋亡中可能起着重要的调控作用     

二甲苯对不同年龄大鼠脑组织形态学及神经细胞凋亡的影响

目的　探讨年龄对二甲苯神经毒作用的影响。方法　采用 Ｈ Ｅ 染色法和 Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 技术对不同月龄大鼠的脑组织病理形态学和神经细胞凋亡情况进行了研究。结果　二甲苯５００ ｍ ｇ／ｋｇ 染毒后,２ 月龄组较８ 月龄组大鼠脑组织形态学改变相对严重,２ 月龄组染毒大鼠神经细胞凋亡的发生率为（１ ．５３ ±１ ．０６） 个／ 视野,明显高于同龄对照组的（０ ．９３ ±０ ．７５） 个／ 视野, Ｆ＝ １２ ．６５９ ６ , Ｐ＜ ０ ．００１ ;８ 月龄组染毒大鼠的神经细胞凋亡率为（１ ．６５ ±１ ．１１） 个／ 视野,明显高于同龄对照组的（１ ．１５ ±１ ．０７） 个／ 视野, Ｆ＝ ６ ．２６３ ３ , Ｐ＜ ０ ．０５ 。结论　低龄大鼠对二甲苯的神经毒作用更为敏感