苦参碱体外促进肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨苦参碱体外促进肿瘤细胞凋亡及其作用机制。方法将浓度为0.2 mg/ml、0.4 mg/ml、0.6 mg/ml的苦参碱作用于卵巢癌细胞株A21-2和骨肉瘤细胞株MG63,利用倒置相差显微镜观察不同浓度苦参碱作用后细胞的形态变化;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡周期、Caspase-3蛋白的表达。结果倒置相差显微镜观察表明,苦参碱能抑制MG63细胞和A21-2细胞的增殖;FCM分析发现,苦参碱与细胞作用72h后,C_0/G_1期前出现凋亡峰,与对照组比较,观察组不同浓度下凋亡率升高(P<0.01),且随浓度升高,凋亡率亦增高,差异有统计学意义(P<0.05),FCM分析显示,与对照组比较,观察组不同浓度下Caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),且随浓度升高,Caspase-3蛋白表达亦升高,差异有统计学意义(P<005)。结论苦参碱能明显抑制A21-2细胞和MG63细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与促进Caspase-3蛋白的表达有关。     

香加皮中C21甾体化合物的体外抗肿瘤活性及其构效关系研究

目的：研究香加皮中分离得到的5个C21甾体化合物的体外抗肿瘤作用并探讨其构效关系。方法：首次采用MTF法对香加皮中分离获得的C21甾体化合物1—5进行3种肿瘤细胞株的体外抗肿瘤活性实验。结果：体外抗肿瘤活性实验结果显示：化合物1对人肝癌SMMC-7721细胞株（1C5012。9ng·L-1）、宫颈癌Hela细胞株（IC5d8．63ng·L-1）、人乳腺癌MCF-7细胞株（IC5018．5ng·L-1）均有较强的细胞毒活性,其他化合物细胞毒活性相对较弱。结论：化合物1（杠柳苷M）具有较强的细胞毒活性,初步的构效关系显示C-3位的不同取代基团对香加皮中C21甾体化合物的细胞毒活性有一定影响。     

miRNA-497与miRNA-195基因簇在宫颈癌组织中的表达及预测靶基因的生物信息学分析

目的探讨miRNA-497-195基因簇在宫颈癌组织中的表达,并对其预测的靶基因进行生物信息学分析,为miRNA-497-195基因簇在宫颈癌发生中的作用机制研究提供理论基础。方法收集2010年3月～2012年3月在广西壮族自治区人民医院就诊患者的宫颈标本,利用miRNA芯片技术检测宫颈病变组织中miRNA表达谱,用real-time RT-PCR进行验证;采用real-time RT-PCR检测miRNA-497和miRNA-195在宫颈病变组织中的表达情况,并用Spearman法进行miRNA-497与miRNA-195相关性分析。通过生物信息学预测miRNA-497和miRNA-195的靶基因,并对其靶基因进行GO（gene ontology）功能富集分析及信号转导通路富集分析。结果芯片结果显示,宫颈癌及高度鳞状上皮内瘤变中miRNA-195和miRNA-497表现为下调（均P〈0.05）。real-time RT-PCR结果显示,miRNA-497和miRNA-195在宫颈癌组织中表现为下调,且表达存在显著性相关（r=0.983,P〈0.05）。miRNA-497和miRNA-195预测靶基因大量重合,且集合功能也大量重合,并富集于细胞周期调控、生物学过程调控、转录调控、基因表达及核苷酸代谢过程等生物学过程,以及蛋白结合、核酸结合、蛋白激酶活性、连接酶活性等分子功能（P〈0.01）;KEGG通路分析涉及癌症通路、p53信号通路、GnRH信号通路、细胞外因子信号通路等信号传导通路及直肠癌、前列腺癌、甲状腺癌、黑色素瘤、慢性粒细胞性白血病、非小细胞肺癌等疾病通路（P〈0.05）。结论 miRNA-195和miRNA-497在宫颈癌组织中呈现低表达,二者表达呈显著正相关,miRNA-497-195基因簇可能是宫颈癌的抑制因子。miRNA-497和miRNA-195预测靶基因功能大量重合,并显著富集在与肿瘤发生相关的信号通路中。     

Krupple 样转录因子 6 蛋白在口腔癌组织中的表达及其与 p21 蛋白的关 系简

目的探讨Krupple样转录因子6（KLF6）蛋白在口腔癌中的表达及其与p21蛋白的关系。方法采用免疫组化法,对2007年9月～2012年9月入住益阳医学高等专学校附属医院的50例15腔癌组织、50例口腔癌旁组织及50例正常口腔组织的KLF6蛋白、p21蛋白进行检测．分析两种蛋白在上述组织的表达情况以及两种蛋白的相关性。结果KLF6及p21表达在浸润深度方面,差异均有统计学意义（P〈0．05）,但在年龄、性别、肿瘤大小、Dukes’分期及淋巴转移等方面差异无统计学意义（P〉0．05）;口腔癌组织中KLF6与p21蛋白阳性表达率分别为88．00％及74．00％：癌旁组织分别为58．00％及40．00％;正常口腔组织分别为0．00％、0．00％。三组KLF6及p21阳性表达率相比,差异有高度统计学意义（P〈0．001）;口腔癌组织中KLF6与p21具有正相关性（r=0．568,P〈0．01）。结论KLF6与p21蛋白在口腔癌的发生与发展中可能具有非常重要的作用,且两者在口腔癌组织中呈现正相关关系。     

低氘水抑制宫颈癌 Hela 细胞增殖和侵袭能力的研究

目的 探讨培养基中氘浓度的下降对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 用含不同氘浓度的培养基培养Hela细胞,分为150×10-6、100×10-6、75×10-6和50×10-6共4组,其中,氘浓度为150×10-6的培养基为对照组,其他为实验组;用四甲基噻唑蓝（MTT）法、划痕实验检测随着培养基中氘浓度下降,Hela细胞增殖和迁移侵袭力的变化;流式细胞术检测含不同氘浓度的培养基对Hela细胞周期的影响;蛋白免疫印迹和免疫组化实验检测含不同氘浓度的培养基对Hela细胞肿瘤相关蛋白p21、Na＋/K＋-ATPase表达的影响.结果 MTT实验结果显示,随着培养基中氘浓度的降低Hela细胞增殖得到明显的抑制,其中氘浓度为50×10-6的培养基抑制效果最明显,相同条件下与对照组相比在72 h抑制率达到39.54％（P＜ 0.01）;划痕实验可观察到Hela细胞在氘浓度为75×10-6、50×10-6的培养基中细胞迁移能力得到明显抑制（P＜ 0.05）;Hela细胞在氘浓度为75×10-6、50×10-6的培养基中培养24 h后,流式细胞术检测S期明显低于对照组（P＜0.01）;Hela细胞肿瘤相关蛋白p21在氘浓度为100×10-6、75×10-6和50×10-6的培养基中的表达与对照组比较,差异均有高度统计学意义（P＜0.01）.结论 培养基中氘浓度的下降对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力有明显的抑制作用.     

高尿酸通过miR-663下调转化生长因子β1抑制内皮细胞迁移

目的探讨高尿酸通过miR-663影响内皮细胞迁移功能的机制。方法培养人脐静脉内皮细胞系（EA．hy926）,用600μmol／L尿酸孵育48h,实时定量PCR检测miR-663的水平,并检测高尿酸患者血清中miR-663水平;利用双荧光素酶试验预测并验证miR-663的靶基因;检测高尿酸条件下内皮细胞中转化生长因子β1（transforming growth fator beta1,TGF—β1）的表达水平,利用miR-663抑制物、TGFB1siRNA转染及划痕实验观察高尿酸如何通过miR-663及其靶基因影响内皮细胞的迁移功能。结果高尿酸培养条件下内皮细胞中miR-663表达水平明显升高,高尿酸血症患者血清中miR-663的水平也高于正常人;双荧光素酶试验结果表明TGFB1的翻译水平受miR-663直接调控;高尿酸能明显抑制细胞的迁移能力,而高尿酸条件下TGF-β1的表达水平也明显下降,转染miR-663抑制物后,TGF-β1表达水平升高,内皮细胞迁移能力也明显改善,但是利用siRNA抑制TGF—β1的表达后,miR-663抑制物不能再促进内皮细胞的迁移。结论高尿酸通过miRNA-663下调TGF—β1而抑制细胞迁移。     

miR-21在山核桃叶总黄酮抑制人脐静脉内皮细胞增殖中的作用研究

[目的]探讨山核桃叶总黄酮对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖的作用,以及miR-21在山核桃叶总黄酮抑制HUVECs增殖中的作用,进一步探讨山核桃叶总黄酮抑制血管生成的作用机制.[方法]不同浓度山核桃叶总黄酮孵育HUVECs后,采用Cell Counting Kit （CCK-8）法检测HUVECs的生长情况;采用SYBR定量PCR检测miR-21的转录水平及Western blot法测定其靶基因PDCD4的蛋白表达水平.[结果]CCK-8法检测结果表明,山核桃叶总黄酮可以剂量依赖性地抑制HUVECs的增殖;SYBR定量PCR结果表明山核桃叶总黄酮孵育过的HUVECs中miR-21的表达量呈浓度依赖性降低,而PDCD4蛋白的表达量呈浓度依赖性升高.[结论]miR-21可能通过PDCD4参与了山核桃叶总黄酮抑制HUVECs增殖的过程.     

益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生大鼠P21WAF1及CyclinD1的影响

目的 观察益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生模型大鼠P21 WAF1和CylinD1基因的影响.方法 将60只Wistar大鼠随机选取50只造模,其余10只为空白组.造模成功后将大鼠随机分为模型组、维酶素组、消痞颗粒组,每组各11只.模型组予生理盐水,维酶素组予维酶素悬浊液,消痞颗粒组予消痞颗粒中药制备药液,1次/d.连续治疗12周后用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及Western blot法对各组大鼠P21WAF1和细胞周期素D1(CyclinD1)基因进行检测.结果 P21 WAF1 mRNA及蛋白表达量消痞颗粒组较模型组及维酶素组显著增高(P＜0.05).CyclinD1mRNA及蛋白表达量消痞颗粒组较模型组、维酶素组显著降低(P＜0.05).结论 中医益气化瘀解毒法可以逆转胃黏膜异型增生,这种作用可能是通过促进P21 WAF1的表达、抑制CyclinD1的表达,从而恢复P21-CDK-CyclinD1之间的平衡,进而使细胞周期调控恢复正常而实现的.     

MicroRNA-21与胃癌关系的研究进展

胃癌的发生和发展是一个复杂、多步骤的过程,涉及原癌基因和抑癌基因的遗传失调,最近研究较多的微RNA(miRNA)起着重要作用。miRNA是一种长为21²3个核苷酸的非编码RNA分子,参与细胞增殖、凋亡和分化以及恶性肿瘤的发生,是重要的调节器。近些年来,人们针对miR-21在恶性肿瘤中的表达研究最为广泛深入,该文就miR-21与胃癌的关系进展予以综述。     

IL-21基因多态性与SLE易患性关系的Meta分析

目的用Meta分析的方法综合评价白细胞介素(IL)21 rs907715多态性与系统性红斑狼疮(SLE)的关系。方法检索中国学术期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、PubMed、Embase和Web of Knowledge数据库,检索时间为1997年1月至2013年12月。按照纳入和排除标准纳入合格文献,并对其进行质量评价,用Stata 11.0软件进行Meta分析。结果共纳入4篇文献,包括7802例SLE病例,7907例健康对照。Meta分析结果显示rs907715 G>A多态性与SLE有关(OR=0.868,95%CI=0.828⁰.919),纯合子模型(AA vs GG,OR=0.740,95%CI=0.6280.919),纯合子模型(AA vs GG,OR=0.740,95%CI=0.628⁰.871)、杂合子模型GA vs GG,OR=0.838,95%CI=0.7530.871)、杂合子模型GA vs GG,OR=0.838,95%CI=0.753⁰.970)、隐性模型(AA vs AG+GG,OR=0.830,95%CI=0.7210.970)、隐性模型(AA vs AG+GG,OR=0.830,95%CI=0.721⁰.954)和显性模型(AG+AA vs GG,OR=0.818,95%CI=0.7260.954)和显性模型(AG+AA vs GG,OR=0.818,95%CI=0.726⁰.922)也显示同样结果。结论 rs907715位点多态性可能与SLE易患性有关,A等位基因对SLE有保护效应。