长链非编码RNA HOTAIR在胃癌组织中的表达及其与预后相关性

目的 探讨胃癌中长链非编码RNA HOTAIR的表达及意义.方法 收集手术切除的胃癌及癌旁正常组织标本60例,采用逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HOTAIR在胃癌组织与癌旁正常组织中的mRNA表达水平,并利用Kaplan Meier-plotter数据库分析其与病人预后的相关性.结果 胃癌组织中HOTAIR的表达水平为(4.26±1.47)明显高于癌旁组织表达(0.47±0.35),差异有统计学意义(P<0.001);HOTAIR高表达组病人的预后不良.结论 HOTAIR在胃癌中呈高表达并与胃癌病人的预后呈负相关关系.     

沉默长链非编码RNA HOTAIR对直肠腺癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨沉默长链非编码RNA HOTAIR对直肠腺癌细胞株SW480和HCT116细胞增殖、放射敏感性和凋亡的影响。方法 通过实时荧光定量PCR检测直肠腺癌细胞株中lncRNA HOX转录反义RNA (lncRNA HOTAIR)的表达水平。应用RNA干扰技术沉默HOTAIR的表达,分析其在细胞增殖、细胞放射敏感性和凋亡中的作用。对细胞株进行梯度剂量照射后,检测其放射敏感性和细胞凋亡情况。结果 直肠腺癌细胞株SW480和HCT116中的lncRNA HOTAIR的相对表达水平明显高于直肠黏膜细胞系。克隆形成试验结果显示,与对照siRNA转染组比较,在细胞株SW480和HCT116中siRNA-HOTAIR的放射增敏比分别为1.58和1.33。沉默直肠腺癌细胞中的lncRNA HOTAIR可增加直肠腺癌SW480细胞株的凋亡率及放射敏感性。结论 直肠腺癌中lncRNA HOTAIR的表达水平与细胞放射敏感性之间存在相关性,其有可能是预测直肠腺癌细胞放射敏感性的指标之一。放射联合应用siRNA-HOTAIR对直肠腺癌细胞株SW480和HCT116有抑制细胞增殖、诱导凋亡和放射增敏的作用。     

血清中lncRNA HOTAIR检测方法的建立及其在结肠癌诊断中的应用价值

目的 建立血清中长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) HOTAIR的检测方法及评价其在结肠癌诊断中的作用.方法 收集结肠癌患者血清样本47例,正常志愿者血清样本40例,10对结肠癌及癌旁组织.采用TRIzol LS和TRIzol分离组织和血清中的RNA;采用qRT-PCR检测HOTAIR在组织及血清中的表达.结果 结肠癌组织或结肠癌患者血清中HOTAIR的表达显著高于癌旁组织或正常志愿者(P＜0.05,P＜0.01),且TNMⅢ/Ⅳ期的结肠癌患者血清中HOTAIR的表达高于正常志愿者(P＜0.05),Ⅲ/Ⅳ期显著高于Ⅰ/Ⅱ期(P＜0.01);淋巴结转移及非转移的结肠癌患者血清中HOTAIR的表达均显著高于正常志愿者(P＜0.01),且淋巴结转移患者显著高于非转移患者(P＜0.05);血清中HOTAIR的表达值诊断结肠癌的敏感性为65.96％,特异性为85.00％,曲线下面积为0.741 0;血清中HOTAIR的表达与CA199值呈显著正相关(P＜0.01,R2 =0.147 1).结论 成功建立血清中HOTAIR的检测方法,血清中HOTAIR的高表达可能作为诊断结肠癌的生物标志物.     

RNA结合基元蛋白24通过调控HOTAIR表达抑制鼻咽癌细胞增殖

目的： 探讨RNA结合基元蛋白24（RBM24）抑制鼻咽癌细胞增殖的可能机制。方法： 分别在永生化鼻咽上皮细胞N5、NP69和鼻咽癌细胞CNE1中转染RBM24 siRNA构建敲低RBM24表达的细胞模型。建模后分别于1~5 d用CCK-8法检测细胞增殖活性，用实时荧光PCR法检测细胞HOX转录反义RNA（HOTAIR）的表达水平。结果： 实时荧光PCR法检测结果表明敲低RBM24表达的细胞模型构建成功。第4天时RBM24敲低组的CNE1、N5细胞增殖率（分别为5.11±0.03和2.09±0.18）与相应的对照组细胞（分别为4.53±0.05和1.73±0.12）相比均升高（P均 < 0.05），且CNE1、N5细胞的HOTAIR mRNA表达水平（分别为67.54±1.87和7.81±1.90）较相应的对照组（1.00±0.21和1.00±0.19）亦升高，差异均有统计学意义（P均 < 0.05），而NP69细胞的增殖率和HOTAIR mRNA表达水平变化不明显（P均 > 0.05）。结论： RBM24可抑制鼻咽癌CNE1细胞和永生化鼻咽上皮N5细胞的增殖，其机制可能是通过抑制HOTAIR表达起作用。     

长链非编码RNA HOTAIR在乳腺癌中作用的研究进展

乳腺癌已成为女性常见的恶性肿瘤,有着较高的病死率。长链非编码RNA(Lnc RNAs)HOX转录反义RNA(HOTAIR)与多种人类肿瘤的发生、发展、转移和预后等密切相关。该文就Lnc RNA HOTAIR在乳腺癌中作用的研究进展作一综述。     

血浆长链非编码RNA HOTAIR是乳腺癌诊断的潜在生物标志物

目的探讨长链非编码RNA HOTAIR在乳腺癌血浆中的表达情况及其对乳腺癌的潜在诊断价值。方法首先采用实时定 量PCR（RT-PCR）的方法检测HOTAIR在24例乳腺癌组织和70例乳腺癌血浆中的表达情况,分析血浆HOTAIR与临床病理特 征相关性;其次采用电化学发光免疫测定法检测血浆中CEA、CA153水平,并建立多元逻辑回归模型分析血浆中HOTAIR相对 于传统标记物CEA和CA153对乳腺癌诊断价值及3项指标联合后诊断价值;最后采用定量PCR的方法检测24位乳腺癌患者术 前和术后血浆中HOTAIR表达水平,并分析24位乳腺癌患者血浆中HOTAIR与组织表达相关性,以评价血浆中的HOTAIR对 患者体内肿瘤动态监测情况。结果与对照组相比,HOTAIR在乳腺癌组织和血浆中表达增高,且血浆中HOTAIR的表达水平 与雌激素受体（ER）（P=0.004）和淋巴结转移明显相关（P=0.010）。通过对血浆中高表达的HOTAIR、CEA及CA153绘制ROC 曲线并建立多元逻辑回归模型,发现HOTAIR曲线下面积（AUC）为0.82（P<0.001）,灵敏度和特异性分别为73.3%和93.3%,其 诊断价值高于传统标记物CA153（AUC=0.66,P=0.030）和CEA（AUC=0.52,P=0.001）,且3项指标联合后诊断效能（AUC=0.84） 和特异度（96.7%）高于HOTAIR 单独检测。此外,术后血浆中HOTAIR 表达水平较术前明显降低（P<0.0001）,且血浆中 HOTAIR表达水平与体内肿瘤表达中度相关（r=0.62,P<0.0001）。结论血浆中高表达的HOTAIR可作为乳腺癌诊断的一个潜 在的新型生物标志物。     

LncRNA HOTAIR促进女性滋养层细胞迁移的机制

目的 探究长链非编码RNA HOTAIR对女性滋养层细胞系Swan 71和HTR-8/SVneo细胞迁移能力的影响以及潜在的分子机制。方法 采取特异性小干扰RNA敲低两种滋养层细胞系中HOTAIR后,采用划痕实验检测滋养层细胞迁移能力的改变,采用Western blot检测PI3K/AKT通路上蛋白的含量及其磷酸化水平的改变,采用Dunnett-t检验方法比较实验组与对照组数据的统计学差异。结果 与对照组比较,两种特异性小干扰RNA均可将Swan 71与HTR-8/SVneo细胞中HOTAIR的表达含量显著下调至30%以下;并且敲低HOTAIR后,两种滋养层细胞的迁移能力显著下降,细胞中PI3K/AKT蛋白总量不变,但其磷酸化水平都下调。结论 HOTAIR可促进女性滋养层细胞Swan 71与HTR-8/SVneo的迁移,上调PI3K与AKT蛋白的磷酸化水平,为后续开展更为深入的体内实验提供前期基础。     

The long non-coding RNA HOTTIP enhances pancreatic cancer cell proliferation,survival and migration

HOTTIP is a long non-coding RNA (lncRNA) transcribed from the 5′ tip of the HOXA locus and is associated with the polycomb repressor complex 2 (PRC2) and WD repeat containing protein 5 (WDR5)/mixed lineage leukemia 1 (MLL1) chromatin modifying complexes. HOTTIP is expressed in pancreatic cancer cell lines and knockdown of HOTTIP by RNA interference (siHOTTIP) in Panc1 pancreatic cancer cells decreased proliferation, induced apoptosis and decreased migration. In Panc1 cells transfected with siHOTTIP, there was a decrease in expression of 757 genes and increased expression of 514 genes, and a limited gene analysis indicated that HOTTIP regulation of genes is complex. For example, Aurora kinase A, an important regulator of cell growth, is coregulated by MLL and not WDR5 and, in contrast to previous studies in liver cancer cells, HOTTIP does not regulate HOXA13 but plays a role in regulation of several other HOX genes including HOXA10, HOXB2, HOXA11, HOXA9 and HOXA1. Although HOTTIP and the HOX-associated lncRNA HOTAIR have similar pro-oncogenic functions, they regulate strikingly different sets of genes in Panc1 cells and in pancreatic tumors.     

长链非编码RNA-HOTAIR与乳腺癌腋窝淋巴结转移相关性研究

目的:探索长链非编码RNA-HOTAIR在乳腺癌及前哨淋巴结、腋窝淋巴结中的表达情况,分析与乳腺癌其他指标的相关关系,以指导治疗并预测预后。方法:收集2013年6月-2013年12月乳腺癌住院手术患者10例,均行前哨淋巴结活检术,取乳腺肿块组织、癌旁组织及前哨淋巴结(SLN)、腋窝淋巴结(ALN)。术后均经病理证实为浸润性导管癌。四组标本组织采用实时荧光定量RT-PCR检测HOTAIR的表达情况,结合临床病理结果,采用t检验、等级相关等统计方法分析各指标之间的关系。结果:(1)HOTAIR基因在各组中的表达,SLN组(9.33±1.23),ALN组(6.90±2.00),两者比较差异有统计学意义(t=3.401,P=0.004);癌组织组(8.81±1.27),癌旁组织组(7.00±1.11),两者比较差异有统计学意义(t=3.389,P=0.003);SLN组与癌旁组织组比较差异有统计学意义(t=4.441,P0.001)。(2)HOTAIR表达情况与临床病理指标关系密切,与淋巴结转移率、ki-67蛋白表达呈正相关,相关系数分别为0.67和0.82,差异有统计学意义(P0.05)。结论:HOTAIR基因在乳腺癌前哨淋巴结以及癌组织中有异常高表达,其促进细胞增殖、侵袭转移的功能显著,提供乳腺癌基因靶向治疗的新位点。